MH7A 人類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎成纖維細(xì)胞
背景描述MH7A 人類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎成纖維細(xì)胞來(lái)源于 53 歲女性類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎患者，對(duì) IL-1β 有反應(yīng)
培養(yǎng)條件準(zhǔn)備 DMEM 培養(yǎng)基,；優(yōu)質(zhì)胎牛血清,，10%；雙抗,，1%
氣相：空氣,，95%；二氧化碳,，5%,。 溫度：37攝氏度，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%
細(xì)胞特征1)來(lái)源：滑膜組織
2)形態(tài)：成纖維細(xì)胞樣,，貼壁生長(zhǎng)
凍存條件無(wú)血清凍存液,。
細(xì)胞檢測(cè)不含有HIV-1、HBV,、HCV,、支原體,、細(xì)菌、酵母和真菌等,。
供應(yīng)限制僅供科研使用
運(yùn)輸方式常溫或凍存（T25瓶或者1mL凍存管包裝）
注意事項(xiàng)細(xì)胞接收后的處理：
1）收到細(xì)胞后,，75%酒精消毒瓶壁將T25瓶置于37℃培養(yǎng)箱放置約2-3h，若發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)瓶破損,、有液溢出及細(xì)胞有污染,，請(qǐng)拍照后及時(shí)聯(lián)系我們。
2）請(qǐng)?jiān)?或5X顯微鏡下確認(rèn)細(xì)胞狀態(tài),，同時(shí)給剛收到的細(xì)胞拍照（10×,，20×）各2-3張以及培養(yǎng)瓶外觀照片一張留存，作為售后時(shí)收到時(shí)細(xì)胞狀態(tài)的依據(jù),。
3）貼壁細(xì)胞：細(xì)胞在37℃培養(yǎng)箱中放置2-3h,，顯微鏡下觀察細(xì)胞的生長(zhǎng)和貼壁情況，有些貼壁細(xì)胞在快遞運(yùn)送過(guò)程中會(huì)因振動(dòng)脫落和脫落后成團(tuán)的情況,。若鏡下觀察細(xì)胞的生長(zhǎng)密度若在60%以下,，可去除培養(yǎng)瓶中灌液培養(yǎng)基（若有未貼壁的細(xì)胞需要離心回收，重懸打入到原培養(yǎng)瓶中）,加入新配制的專用培養(yǎng)基6-8mL,，放到細(xì)胞培養(yǎng)箱中繼續(xù)培養(yǎng),。若細(xì)胞生長(zhǎng)密度達(dá)70%-80%以上，可以對(duì)細(xì)胞進(jìn)行傳代處理,。傳代過(guò)程中,，若因運(yùn)輸振動(dòng)脫落的細(xì)胞需要離心回收。
1）凍存細(xì)胞的復(fù)蘇：
將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,，加入到含4-6mL專用培養(yǎng)基的離心管中混合均勻,。在1000RPM條件下離心3-5min，棄去上清液,，專用培養(yǎng)基重懸細(xì)胞,。然后將細(xì)胞懸液加入含6-8ml專用培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶（或皿）中37℃培養(yǎng)過(guò)夜。第二天顯微鏡下觀察細(xì)胞生長(zhǎng)情況和細(xì)胞密度,。
2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對(duì)于貼壁細(xì)胞傳代可以參考以下方法：
1.吸去培養(yǎng)液,，加PBS清洗1-2遍,，去PBS。加入0.25%胰酶2ml消化15秒,，去胰酶,。將培養(yǎng)瓶放37度培養(yǎng)箱，靠殘余胰酶繼續(xù)消化細(xì)胞3-10分鐘直至細(xì)胞變圓（每3分鐘觀察一次,。）
2.加12ml專用培養(yǎng)基,，吹打均勻,，即可分到2個(gè)T25培養(yǎng)瓶里。（細(xì)胞1傳2,，若顧客使用培養(yǎng)皿或培養(yǎng)孔板,，建議先包被）
3）細(xì)胞凍存: 收到細(xì)胞后建議在培養(yǎng)前3代時(shí)凍存一批細(xì)胞種子以備后續(xù)實(shí)驗(yàn)使用。下面T25瓶為例,；
1.細(xì)胞凍存時(shí)按照細(xì)胞傳代的過(guò)程收集消化好的細(xì)胞到離心管中,，可使用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)，來(lái)決定細(xì)胞的凍存密度,。一般細(xì)胞的推薦凍存密度為1×106~1×107個(gè)活細(xì)胞/ml.
2.1000rpm離心3-5min,，去掉上清,。用配制好的細(xì)胞凍存液重懸細(xì)胞 ,，按每1ml凍存液含1×106~1×107個(gè)活細(xì)胞/ml分配到一個(gè)凍存管中將細(xì)胞分配到凍存管中，標(biāo)注好名稱,、代數(shù),、日期等信息。
3.將要凍存的細(xì)胞置于程序降溫盒中,，-80度冰箱中過(guò)夜,，之后轉(zhuǎn)入液氮容器中儲(chǔ)存。同時(shí)記錄好凍存管在液氮容器中的位置以便后續(xù)查閱和使用,。
備注：運(yùn)輸用的培養(yǎng)基（灌液培養(yǎng)基）不能再用來(lái)培養(yǎng)細(xì)胞,，請(qǐng)換用按照說(shuō)明書(shū)細(xì)胞培養(yǎng)條件新配制的專用培養(yǎng)基來(lái)培養(yǎng)細(xì)胞。 收到細(xì)胞后第一次傳代建議T25培養(yǎng)瓶1：2傳代 ,。
上海語(yǔ)純生物科技有限公司,，是由具有優(yōu)良生命科學(xué)、生物技術(shù)背景人員共同創(chuàng)辦的技術(shù)企業(yè),。公司專注于原代細(xì)胞,、腫瘤細(xì)胞及細(xì)胞培養(yǎng)相關(guān)試劑產(chǎn)品，為高校,、食品,、醫(yī)藥、生物研究等領(lǐng)域提供相關(guān)技術(shù)支持和服務(wù),。
公司自成立以來(lái)通過(guò)不斷地科技創(chuàng)新,，產(chǎn)品研發(fā)，已為客戶提供定制化細(xì)胞產(chǎn)品以及完整的細(xì)胞培養(yǎng)解決方案,，通過(guò)積極地探索,、研發(fā)、深化和豐富產(chǎn)品,，目前基礎(chǔ)培養(yǎng)基產(chǎn)品種類多達(dá)200多種,，細(xì)胞系300多種,，原代細(xì)胞接近600種。我們始終以“發(fā)展科學(xué)技術(shù),，關(guān)愛(ài)公眾生命健康”為動(dòng)力,，通過(guò)技術(shù)創(chuàng)新，廣泛吸納高科技人才,，不斷完善產(chǎn)品體系,、豐富產(chǎn)品鏈，積極拓展市場(chǎng),，擴(kuò)充應(yīng)用領(lǐng)域,，，建立了具有市場(chǎng)競(jìng)爭(zhēng)力的“語(yǔ)純”品牌,。
注意事項(xiàng)
1,、為了您的安全和健康，請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套及口罩操作,；
2,、為保持本產(chǎn)品的優(yōu)良使用效果，請(qǐng)務(wù)必按照建議的儲(chǔ)存條件進(jìn)行保存,；
3,、本產(chǎn)品僅供科學(xué)研究或進(jìn)一步生產(chǎn)使用，不可用于臨床診斷或治療,。
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