注意事項：轉化前請準確查找該質粒相應的抗生素名稱,、抗生素使用濃度、感受態(tài)名稱和培養(yǎng)溫度,。

1,、收到質粒干粉后請先5000rpm離心1min，再加入20μl~50μl無菌水或 pH8.0 的 1*TE緩沖液來溶解質粒,，室溫放置1min,；

2、從-80℃冰箱中取出相應的感受態(tài),，置于冰盒上解凍,，并做好標記；

3,、取2μl質粒加至100μl感受態(tài)中,，冰浴30min；

4,、42℃熱激90s,，再冰浴2min；

5,、加入900μl無抗的LB液體培養(yǎng)基,，180rpm震蕩培養(yǎng)45min；

6,、6000rpm離心5min,，僅留100ul上清混勻菌體沉淀；

7,、混勻后的菌液加至對應抗性的LB平板上,，倒入適量玻璃珠，涂勻液體；

8,、將平板正向培養(yǎng)1h，再倒置培養(yǎng)12h~16h,；

9,、挑取單克隆菌落至對應抗性的LB液體培養(yǎng)基中，震蕩培養(yǎng)12h~16h,，根據(jù)實驗需要提取質粒