【試劑描述】

Cell-Tracker熒光探針是用來監(jiān)測(cè)細(xì)胞運(yùn)動(dòng)、定位,、增殖,、遷移、趨化和侵襲的工具。

Cell-Tracker Blue CMAC熒光探針是氯甲基衍生物,，能自由穿透細(xì)胞膜進(jìn)入細(xì)胞,，在胞內(nèi)轉(zhuǎn)化生成不具細(xì)胞膜滲透性的反應(yīng)產(chǎn)物。在細(xì)胞群內(nèi),，染料只會(huì)轉(zhuǎn)移到子代細(xì)胞,，不會(huì)轉(zhuǎn)移到鄰近細(xì)胞。

Cell-Tracker Blue CMAC熒光探針

【技術(shù)參數(shù)】

英文名：7-amino-4-chloromethylcoumarin

分子式：C10H8ClNO2

分子量：209.63

生產(chǎn)廠商：西安強(qiáng)化生物科技

純度：≥95%

溶解性：溶于DMSO

外觀：白色固體

Ex/Em：353 nm/466 nm

儲(chǔ)存條件：-20℃避光干燥

化學(xué)結(jié)構(gòu)式

【染色液制備】

儲(chǔ)存液配制：

用無水DMSO溶解粉末至25 mM（如5 mg粉末加954 μL DMSO）,，分裝避光保存于-20°C,，避免反復(fù)凍融。

工作液稀釋：

根據(jù)實(shí)驗(yàn)需求,，用無血清培養(yǎng)基稀釋至0.5–25 μM：

長期染色或快速分裂細(xì)胞：5–25 μM（維持3–6代）,。

短期活力檢測(cè)：0.5–5 μM（減少細(xì)胞形態(tài)干擾）。

【染色步驟】

細(xì)胞處理：

貼壁細(xì)胞：在含蓋玻片的培養(yǎng)皿中孵育,；懸浮細(xì)胞：直接離心處理,。

染色條件：37°C孵育15–45分鐘，避光操作,。

信號(hào)穩(wěn)定化：

移除染色液后,，加入新鮮培養(yǎng)基繼續(xù)孵育30分鐘，促進(jìn)未反應(yīng)染料排出,。

固定與透化：

固定：3.7%多聚甲醛（PBS溶液）室溫處理15分鐘,。

透化：冰冷丙酮處理10分鐘（需抗體標(biāo)記時(shí)）。

檢測(cè)與成像

顯微鏡觀察：使用DAPI或藍(lán)色通道濾光片,，熒光信號(hào)可維持至少72小時(shí),。

定量分析：通過熒光酶標(biāo)儀檢測(cè)（激發(fā)354 nm，發(fā)射469 nm）

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注意：本試劑用于科研領(lǐng)域,，其他用途概不適用,！

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