Fluo-5N AM,Cell Permeant,,鈣離子熒光探針
- 公司名稱 西安強化生物科技有限公司
- 品牌 其他品牌
- 型號
- 產(chǎn)地
- 廠商性質(zhì) 生產(chǎn)廠家
- 更新時間 2025/5/13 9:56:25
- 訪問次數(shù) 13
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純度 | ≥95% | 供貨周期 | 一周 |
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規(guī)格 | 1mg | 應用領域 | 化工 |
技術參數(shù)
其他名稱:Fluo-5N, Acetoxymethyl Ester
分子式:C50H47F2N3O25
分子量:1127.92
解離常數(shù):~90µM
純度:≥95%
儲存條件:-20℃避光干燥
化學結(jié)構(gòu)式:
相關描述
Fluo-5N AM,Cell Permeant,鈣離子熒光探針是Fluo-4的結(jié)構(gòu)類似物,,具有較低的鈣結(jié)合親和力,,可用于鈣水平在1µM~1mM區(qū)間內(nèi)的胞內(nèi)鈣離子檢測,而Fluo-3和Fluo-4在這個區(qū)間內(nèi)的鈣離子反應達到飽和,。
Fluo-5N AM,Cell Permeant,,鈣離子熒光探針,激發(fā)和發(fā)射波長分別是494和516nm,。
使用方法
A,, 試劑準備
1) 配制Pluronic F-127母液:稱取100mgPluronic F-127粉末中加入500μl DMSO,配制成20% DMSO母液,。溶解過程需要在40-50℃加熱20-30min,。
溶液室溫保存,不用冷藏,。如有結(jié)晶析出,,可以重新加熱后溶解,不影響使用,。
2)HHBS Buffer(1X Hank’s Balanced Salt Solution with 20mM HEPES buffer, pH 7.2)或者其他生理緩沖液 ,。
B, 操作步驟
1) 用無水DMSO溶解Fluo-5NAM配制成2-5mM的儲存液,,或?qū)⒁雅浜玫腇luo-5NAM儲存液取出于室溫回溫,。
(如:若配制成4mM的母液,,需向50µg Fluo-5NA M中加入11µl無水DMSO)。
準備Fluo-5NAM工作液之前,,有時需要往Fluo-5NAM儲存液中加入20% Pluronic F-127溶液,,增強AM探針的水溶性。
2) 用HHBS或其他生理緩沖液(含鈣鎂)將Fluo-5NAM+DMSO儲存液稀釋到1-20µM的工作液,。
3) 如果細胞內(nèi)含有機陰離子轉(zhuǎn)運體,,磺吡酮(Sulfinpyrazone)可能需要加入細胞培養(yǎng)基內(nèi),以降低去酯化探針的泄露水平,。
4) 將準備好的Fluo-5NAM染色工作液加入細胞,,加入量以覆蓋細胞為準。室溫或37℃孵育20-120min,。
5) 吸掉染色工作液,,并用HHBS或其他生理緩沖液清洗細胞1~2次,以去除殘留探針,。
6) 室溫再孵育30min以保證細胞內(nèi)AM的去酯化。
7) 可用激發(fā)/發(fā)射波長來檢測熒光,。
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