脂肪酸氧化(FAO)檢測(cè)試劑盒
- 公司名稱(chēng) 武漢艾美捷科技有限公司
- 品牌 Assay Genie
- 型號(hào)
- 產(chǎn)地
- 廠商性質(zhì) 代理商
- 更新時(shí)間 2025/4/30 11:42:12
- 訪問(wèn)次數(shù) 48
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Assay Genie脂肪酸氧化檢測(cè)試劑盒是一種高靈敏度的比色法檢測(cè)試劑盒,,用于定量檢測(cè)細(xì)胞和組織中的脂肪酸氧化,。這種特別的檢測(cè)方法使用了高溶解性的辛酰輔酶A(Octanoyl-CoA)底物,,能夠比長(zhǎng)鏈且溶解性較差的底物(例如18碳不飽和脂肪酸油酸)更準(zhǔn)確地測(cè)量脂肪酸氧化,。
作為Assay Genie全國(guó)總代理,艾美捷科技強(qiáng)烈推薦Assay Genie銷(xiāo)售產(chǎn)品脂肪酸氧化(FAO)檢測(cè)試劑盒,。產(chǎn)品僅用于科研,,不可用于臨床診斷。
產(chǎn)品名稱(chēng) | 貨號(hào) | 詳情 |
脂肪酸氧化(FAO)檢測(cè)試劑盒 | BR00001 | 查看 |
脂肪酸氧化(FAO)檢測(cè)試劑盒:
產(chǎn)品名稱(chēng):脂肪酸氧化檢測(cè)
貨號(hào):BR00001
應(yīng)用范圍:定量檢測(cè)細(xì)胞和組織中的脂肪酸氧化。
注意事項(xiàng):僅供研究使用,。
細(xì)胞/組織提取物的制備
步驟| 操作
步驟1| 用冰冷的磷酸鹽緩沖液(PBS)洗滌約10?個(gè)細(xì)胞兩次,,并w全去除細(xì)胞沉淀中的PBS。細(xì)胞沉淀應(yīng)保存在-80℃,。組織樣本應(yīng)c底用PBS洗滌以去除可能引起結(jié)果不一致的血細(xì)胞,。
步驟2| 用冰冷的去離子水(dH?O)稀釋10倍細(xì)胞裂解液,制備足夠的1倍細(xì)胞裂解液,。向細(xì)胞沉淀中加入50-100微升冰冷的1倍細(xì)胞裂解液,,通過(guò)上下移液(輕柔但c底)提取細(xì)胞。將裂解液置于冰上,,間歇性輕柔振蕩5分鐘,。如果裂解液黏稠,可加入更多1倍細(xì)胞裂解液并重復(fù)移液,。在低溫離心機(jī)中以最大速度離心裂解液5分鐘,,收集上清液用于檢測(cè)。組織樣本在1倍細(xì)胞裂解液中勻漿,,并通過(guò)離心澄清裂解液,。每0.5毫升1倍細(xì)胞裂解液用于勻漿約25毫克組織。
步驟3| 進(jìn)行蛋白定量檢測(cè)以確定樣本蛋白濃度,。通過(guò)用冰冷的1倍細(xì)胞裂解液稀釋?zhuān)瑢颖镜鞍诐舛日{(diào)整至1-3毫克/毫升,。始終將蛋白樣本保存在冰上。凍融后的粗蛋白裂解液可能會(huì)降低酶活性,。裂解液應(yīng)保存在-80℃,。
注意:不要使用含有還原劑或SDS的緩沖液。
試劑解凍
將解凍后的脂肪酸氧化(FAO)檢測(cè)液和20倍FAO底物置于冰上,。在移液前輕輕振蕩溶液,。盡量減少試劑解凍的時(shí)間,使用后立即冷凍保存,。
對(duì)照液和反應(yīng)液的制備
-對(duì)照液:將1份去離子水(dH?O)與20份FAO檢測(cè)液混合,,例如25微升去離子水與500微升FAO檢測(cè)液混合。檢測(cè)過(guò)程中將新制備的對(duì)照液置于冰上保存,。
-反應(yīng)液:將1份20倍FAO底物與20份FAO檢測(cè)液混合,,例如25微升20倍FAO底物與500微升FAO檢測(cè)液混合。將溶液置于冰上并立即使用,。每個(gè)蛋白樣本分別用50微升對(duì)照液和50微升反應(yīng)液處理,。
試劑盒描述
脂肪酸提供的ATP比碳水化合物(如葡萄糖)更多。在能量需求高的組織(如心臟組織)中,,高達(dá)50-70%的能量來(lái)自脂肪酸β-氧化,,該過(guò)程將脂肪酸轉(zhuǎn)化為乙酰輔酶A,,同時(shí)在線粒體中產(chǎn)生FADH?和NADH。
這種嚴(yán)格的需氧氧化途徑包括四個(gè)不同的步驟:
1. 由?;o酶A脫氫酶催化的?;o酶A脫氫反應(yīng);
2. 由烯酰輔酶A水合酶催化的水合反應(yīng),;
3. 由3-羥基?;o酶A脫氫酶催化的脫氫反應(yīng);
4. 由β-酮硫解酶催化的硫解反應(yīng),。
脂肪酸β-氧化系統(tǒng)在人類(lèi)中的重要性體現(xiàn)在存在一組遺傳性疾病,,稱(chēng)為脂肪酸氧化障礙(FAODs)。這是一組脂肪酸轉(zhuǎn)運(yùn)和氧化缺陷的異質(zhì)性疾病,,以常染色體隱性方式遺傳,,具有廣泛的臨床表現(xiàn)。
證據(jù)表明,,胎兒發(fā)育過(guò)程中脂肪酸氧化(FAO)活性的調(diào)節(jié)不僅對(duì)胎兒生命至關(guān)重要,,還對(duì)成年期的健康和疾病有影響。脂肪酸氧化活性的測(cè)量為許多疾病的病理生理學(xué)和代謝基礎(chǔ)提供了寶貴的見(jiàn)解,。
Assay Genie的非放射性脂肪酸氧化檢測(cè)基于辛酰輔酶A底物的氧化,。NADH的生成與四氮雜唑鹽INT的還原偶聯(lián),形成紅色的甲臜,。紅色甲臜的強(qiáng)度與脂肪酸氧化活性的增加成正比,。
檢測(cè)液和底物應(yīng)分裝后保存在-80℃。
Assay Genie旗下涵蓋了15種種屬的高品質(zhì)的ELISA試劑盒及多種抗體,,可檢測(cè)的指標(biāo)種類(lèi)豐富,,覆蓋免疫、代謝和分子等多種研究領(lǐng)域,,是科學(xué)研究中便捷的小助手,。
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