大鼠胰腺上皮原代細(xì)胞

培養(yǎng)信息：

包被條件 鼠尾膠原Ⅰ（2-5μg/cm2）

培養(yǎng)基 含FBS,、生長添加劑,、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率 每2-3天換液一次

生長特性 貼壁

細(xì)胞形態(tài) 上皮細(xì)胞樣

傳代特性 可傳1-2代

消化液 0.25%

培養(yǎng)條件 氣相：空氣,，95%,；CO2，5%

大鼠胰腺上皮細(xì)胞分離自胰腺組織,；胰腺分為外分泌腺和內(nèi)分泌腺兩部分,。外分泌腺由腺泡和腺管組成，腺泡分泌胰液,，腺管是胰液排出的通道,。胰液中含有、原,、脂肪酶,、等。胰液通過胰腺管排入十二指腸,，有消化蛋白質(zhì),、脂肪和糖的作用。內(nèi)分泌腺由大小不同的細(xì)胞團(tuán)──胰島所組成,，胰島主要由4種細(xì)胞組成：α細(xì)胞,、β細(xì)胞、γ細(xì)胞及PP細(xì)胞,。α細(xì)胞分泌胰高血糖素,，升高血糖；β細(xì)胞分泌胰島素,，降低血糖,；γ細(xì)胞分泌，以旁分泌的方式抑制α,、β細(xì)胞的分泌；PP細(xì)胞分泌胰多肽,，抑制胃腸運動,、胰液分泌和膽囊收縮,。胰腺干細(xì)胞在發(fā)育上被認(rèn)為分離自內(nèi)胚層胰腺上皮，在隨后的胰腺發(fā)育過程中,，胰腺干細(xì)胞分化為胰島細(xì)胞（α,、β、δ,、PP細(xì)胞）,、導(dǎo)管上皮細(xì)胞以及腺泡細(xì)胞。胰腺組織中還存在大量的間充質(zhì)來源的細(xì)胞,，包括成纖維細(xì)胞,、血管內(nèi)皮細(xì)胞、血管平滑肌細(xì)胞以及星形細(xì)胞,，其中以成纖維細(xì)胞占主要部分,。要離體分離培養(yǎng)獲得胰腺上皮細(xì)胞就要排除間充質(zhì)來源的細(xì)胞，尤其是成纖維細(xì)胞,。目前常用的去除成纖維細(xì)胞方法有機械刮除法,、消化以及膠原酶消化法等，胰腺上皮細(xì)胞的病變與急慢性胰腺炎的發(fā)生具有重大意義,。

方法簡介：

公司實驗室分離的大鼠胰腺上皮細(xì)胞采用膠原酶分次消化法并通過上皮細(xì)胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來,，細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。

質(zhì)量檢測：

公司實驗室分離的大鼠胰腺上皮細(xì)胞經(jīng)Cytokeratin-19免疫熒光鑒定,，純度可達(dá)90%以上,，且不含有HIV-1、HBV,、HCV,、支原體、細(xì)菌,、酵母和真菌等,。

① 組織塊培養(yǎng)法

　　組織塊培養(yǎng)是常用、簡便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法,。其基本方法是將剪成的小組織團(tuán)塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中,，瓶壁可預(yù)先涂以膠原薄層，以利于組織塊粘著于瓶壁,，使周邊細(xì)胞能沿瓶壁向外生長,。

　　② 消化培養(yǎng)法

　?、?懸浮細(xì)胞培養(yǎng)法

　　對于懸浮生長的細(xì)胞,，如白血病細(xì)胞、淋巴細(xì)胞、骨髓細(xì)胞,、胸水和腹水中的癌細(xì)胞和免疫細(xì)胞無需消化,，可采用低速離心分離，直接培養(yǎng),，或經(jīng)淋巴細(xì)胞分層液分離后接種培養(yǎng),。

　　④器官培養(yǎng)

　　器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后,，不進(jìn)行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng),，器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對完整性，可用于重點觀察細(xì)胞間的聯(lián)系,、排列情況和相互影響,，以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用。

客戶收到細(xì)胞后,，請按照以下方法進(jìn)行操作,。(該細(xì)胞傳代次數(shù)有限約 2 代，建議客戶收到細(xì)胞后盡快安排后續(xù)實驗)

1,、取出細(xì)胞瓶,，75%酒精消毒后拆下封口膜，放入 37℃,，5%CO2 培養(yǎng)箱中靜置 6-8 小時,，以穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。

2,、待細(xì)胞達(dá)到 80%匯合時準(zhǔn)備進(jìn)行傳代培養(yǎng),。

3、細(xì)胞傳代：

1)吸出細(xì)胞瓶中的培養(yǎng)基,，用 PBS 清洗細(xì)胞一次,。

2)加入 0.125%消化液約 1mL 至培養(yǎng)瓶中，37℃消化 3min 左右,；顯微鏡下觀察,，待細(xì)胞回縮變圓后吸棄消化液，再加入培養(yǎng)液終止消化,。

3)用吸管輕輕吹打混勻,，按 1:2 或 1:3 等適當(dāng)?shù)谋壤M(jìn)行接種傳代，然后補充新鮮的培養(yǎng)基至 5mL,，放入 37℃ 5% CO2 細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng),。

4)待細(xì)胞貼壁后，培養(yǎng)觀察,，每隔 2-3 天更換新鮮的培養(yǎng)基,。

CD274 Others Cynomolgus 食蟹猴 / 恒河猴 PD-L1 / B7-H1 / CD274 人細(xì)胞裂解液   293(人胚細(xì)胞)     肺成纖維細(xì)胞Many   中國倉鼠卵巢細(xì)胞系;CHO-TGF-beta-3/2000 Carrying Psv2-beta-TGF  人羊膜細(xì)胞 小鼠原代主動脈瓣膜間質(zhì)細(xì)胞 兔原代胎盤間充質(zhì)干細(xì)胞

軟骨寡聚基質(zhì)蛋白(COMP)重組蛋白 Recombinant Cartilage Oligomeric Matrix Protein (COMP)

AACS Protein Human 重組人 AACS / Acetoacetyl-CoA Synthetase 蛋白 (His 標(biāo)簽)

EPOR重組人 EPOR / Erythropoietin Receptor 蛋白  Protein

HA Protein Influenza B 重組乙型流感 (B/Florida/4/2006) 血凝素HA2 (Hemagglutinin) 蛋白

PRNP重組人 PRNP / Prion 蛋白  Protein

小鼠Ⅹ(FⅩ)ELISA 試劑盒

Rat alpha fetoprotein / alpha fetoprotein (AFP) ELISA Kit 大鼠甲種胎兒球蛋白/甲胎蛋白(AFP)試劑盒

Humanimmunosuppressiveacidicprotein,IAPELISAKit 人免疫抑制酸性蛋白(IAP)試劑盒 進(jìn)口分裝

Human16-αHydroxyesogen1,16-αOHE-1試劑盒人16α羥基雌同1(16-αOHE-1)試劑盒

真菌/酵母細(xì)胞線粒體可溶性總蛋白制備試劑盒20次

MouseAquaporin2,AQP-2ELISAKit小鼠水通道蛋白2(AQP-2)試劑盒

人組織因子(TF)試劑盒   96T/48T

人組織型纖維溶酶激活物（t-PA）試劑盒   96T/48T

人組織型纖溶酶原激活劑(t-PA)試劑盒   96T/48T

人組織相容性復(fù)合體Ⅰ類相關(guān)基因D（MICD）試劑盒   96T/48T

大鼠胰腺上皮原代細(xì)胞小鼠糖原0酸化酶同工酶BB(GP-BB)ELISA 試劑盒 96T/48T

Human thioredoxin (x) ELISA Kit 人硫氧化還原蛋白(x)試劑盒

Humancostimulatorymoleculesrecptor,CMRELISAKit 人協(xié)同刺激分子受體(CMR)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

Chickeumornecrosisfactor-relatedapoptosis-inducingligand3,AIL-R3試劑盒雞壞死因子相關(guān)凋亡誘導(dǎo)配體3(AIL-R3)試劑盒規(guī)格：96T/48T

載玻片細(xì)胞AIL蛋白表達(dá)熒光顯微鏡試劑盒10/20次

MouseEsadiolreceptor,ERELISAKit小鼠雌二醇受體(ER)試劑盒規(guī)格：96T/48T

CD274重組大鼠 PD-L1 / B7-H1 / CD274 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein

CREB-1 (cAMP responsive element binding protein-1 0.5mgCREB-1 (cAMP responsive element binding protein-1) 環(huán)腺苷酸應(yīng)答元件結(jié)合蛋白(抗原)

CSF3R重組人 G-CSFR / CD114 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein

AK1 Protein Human 重組人 AK1 / Adenylate kinase 1 蛋白 (His 標(biāo)簽)

NTRK3 Protein Mouse 重組小鼠 TrkC / NTRK3 蛋白 (His 標(biāo)簽)