大鼠膿毒癥模型是膿毒癥研究中的重要工具,，借此模型的研究成果有望指導臨床,，提高治療水平。

大鼠膿毒癥模型SOP：

背景：盲腸結扎穿孔模型（CLP）模型是接近于人類膿毒癥機制的模型，被稱為膿毒癥模型的“金標準”,。CLP 技術在20世紀70年代被建立,。CLP 模型非常適宜用于防治膿毒癥或膿毒性休克新藥的臨床前觀察。

實驗動物：

品系：SD大鼠,；性別：雄性,；周齡：6-8周；體重：180-220g,。

操作流程：

1）動物適應性飼養(yǎng)7天,；

2）盲腸結扎穿刺（Cecal ligation and puncture, CLP）建立膿毒癥大鼠模型：麻醉 ，做腹部正中切口尋找盲腸,，分離腸系膜后在盲腸中點結扎,，后在結扎位置至盲腸遠端的中點用 20G針做貫通穿刺，擠出少許糞便置于盲腸表面,，將盲腸回納腹腔并關腹,。皮下注射鎮(zhèn)痛藥并放回籠中。

模型嚴重程度

盲腸結扎位置是CLP模型中死亡率和疾病嚴重程度的最主要決定因素,。結論為：① 低位CLP或以下的死亡率幾乎為零,，為輕度膿毒癥；② 中位CLP（50%～60%）的術后死亡率為30%,，為中度膿毒癥,；③ 高位CLP（75%）的大鼠在術后7d內(nèi)全部死亡,，為重度膿毒癥,。而在不同程度膿毒癥中，死亡主要集中在最初的48 h內(nèi),。

模型評估

1. 觀察大鼠的行為和生理反應: 外觀,、自主意識 、自主活動,、  對外界刺激的反應,、 眼睛是否有分泌物、 呼吸頻率和質量,、etc..,；

2. 全血的菌落總數(shù)的單位CFU(Colony-Forming Units，菌落形成單位),； 

3. 血清指標 在手術后的0-72小時內(nèi),，可以檢測血液相關反映炎癥水平和臟器損傷情況： 天冬氨酸轉移酶(AST) Bing氨酸轉移酶(ALT) 、肌酸激酶(CK),、 乳酸脫氫酶(LDH) ,、血肌酐（CR）、血尿素氮(BUN)  、TNF-α,、IL-6,、etc.^[1,2,3]；

4. 組織病理損傷檢測 通過肺,、肝,、腎組織石蠟切片進行糖原/HE.染色，可以觀察組織病理損傷的情況,。例如,，盲腸結扎穿刺法構建的膿毒血癥大鼠模型會發(fā)現(xiàn)腎小管上皮細胞膨脹、刷狀緣缺失,、空泡變性,、壞死、管型形成和細胞脫落等病理改變^[1,2,3],。

多方面的指標檢測有助于評估膿毒癥大鼠的病理生理狀態(tài),、嚴重程度和模型的有效性。

1.Mitchell PS, Parkin RK, Kroh EM, Fritz BR, Wyman SK, Tewari M et al.Circulating microRNAs as stable blood-based markers for cancer detection. Proc Natl Acad Sci. 2008; 105: 10513-8.

2. Xiao B, Wang Y, Li W, Baker M, Guo J, He YW. Plasma microRNA signature

as a non-invasive biomarker for acute graft-versus-host disease. Blood. 2013;

122: 3365.

3. Yamaguchi T, Izumi Y, Nakamura Y, Yamazaki T, Shiota M, Iwao H. Repeated remote ischemic conditioning attenuates left ventricular remodeling via exosome-mediated intercellular communication on chronic heart failure after myocardial infarction. Int J Cardiol. 2015; 178: 239-46