土壤總磷/有機磷/無機磷含量測定試劑盒說明書

微量法 100T/96S

土壤總磷/有機磷/無機磷含量測定試劑盒-

正式測定前務必取 2-3 個預期差異較大的樣本做預測定測定意義：

土壤總磷包括有機磷和無機磷，其中無機磷能夠直接被植物利用。土壤有機磷經(jīng)過礦化分解而轉化為無機磷,。同時測定土壤總磷,、有機磷和無機磷，可以全面反映土壤磷營養(yǎng)狀況,。

測定原理：

利用鉬藍法定磷,。取一份土樣，通過浸提法測定土壤無機磷含量,；另外取一份土樣,，經(jīng)高溫灼燒后，土壤有機磷轉化為無機磷,，測得土壤總磷含量,；總磷含量減去無機磷含量，即可計算出有機磷含量,。

試劑組成和配制：

試劑一：液體×1 瓶,，4℃保存。臨用前用蒸餾水稀釋 10 倍后再用,。

試劑三：粉劑×1 瓶,，4℃避光保存。臨用前配制,，加入 8ml 蒸餾水,，充分溶解后加入 4ml 試劑二，混勻,。

標準品：液體×1 支,，20 μmol/L 無機磷標準品，4℃保存,。

自備儀器和用品：

可見分光光度計/酶標儀,、微量玻璃比色皿/96 孔板、臺式離心機,、可調式水浴鍋,，分析天平、可調式移液器,、550℃高溫電爐,、蒸餾水、100 目篩子（可更?。?。

土壤不同形態(tài)磷提取：

無機磷：稱取通過 100 目篩子的風干土樣 0.01g,，轉移到 1ml 離心管,，加入 1ml 試劑一,，震蕩混勻，然后置于 45℃水浴 1h,，8000g,，25℃離心 10min，取上清液一,，用于無機磷含量測定,。

總磷提取：取通過 100 目篩子的風干土樣,，550℃灼燒 1h,，冷卻后稱取約 0.01g，轉移到 1 ml 離心管,，加入 1ml 試劑一,，震蕩混勻，然后置于 45℃水浴 1h,，8000g,，25℃離心 10min，取上清液二,，用于總磷含量測定,。

測定步驟：

分光光度計/酶標儀預熱 30 min，調節(jié)波長到 660 nm,，蒸餾水調零。

打開水浴鍋,，調節(jié)溫度到 40℃,。

空白管：取EP 管，依次加入 100μl 蒸餾水,，100μl 試劑三,，混勻后置于 40℃水浴保溫 10min，室溫冷卻 10 min 后于 660 nm 測定吸光度,，記為A 空白管,。

標準管：取EP 管，依次加入 10μl 標準液,，90μl 蒸餾水,，100μl 試劑三，混勻后置于 40℃水浴保溫10min,，室溫冷卻 10 min 后于 660 nm 測定吸光度,，記為A 標準管。

測定管：取EP 管,，依次加入 10μl 上清液一或者上清液二,，90μl 蒸餾水,，100μl 試劑三，混勻后置于 40℃水浴保溫 10min,，室溫冷卻 10 min 后于 660 nm 測定吸光度,，記為A 測定管。

注意：空白管和標準管只需測定一次,。

土壤磷含量計算：

使用微量石英比色皿測定的計算公式如下

土壤無機磷含量（μmol /g 干重）=[C 標準液×(A 測定－A 空白)÷(A 標準－A 空白)]×V 總÷W =0.02×(A

測定－A 空白)÷(A 標準－A 空白)÷W

C 標準液：20 μmol/L,； W：土壤樣品質量，g,； V 總：上清液一總體積,，1 ml=0.001 L。

土壤總磷含量（μmol /g 干重）=[C 標準液×(A 測定－A 空白)÷(A 標準－A 空白)]×V 總÷W=0.02×(A測定－A 空白)÷(A 標準－A 空白)÷W

C 標準液：20 μmol/L,；W：土壤樣品質量,，g；V 總：上清液二總體積,，1ml=0.001 L,。 3.土壤有機磷（μmol /g 干重）=土壤總磷-土壤無機磷

使用 96 孔板測定的計算公式如下

土壤無機磷含量（μmol /g 干重）=[C 標準液×(A 測定－A 空白)÷(A 標準－A 空白)]×V 總÷W =0.02×(A測定－A 空白)÷(A 標準－A 空白)÷W

C 標準液：20 μmol/L； W：土壤樣品質量,，g,； V 總：上清液一總體積，1 ml=0.001 L,。

土壤總磷含量（μmol /g 干重）=[C 標準液×(A 測定－A 空白)÷(A 標準－A 空白)]×V 總÷W=0.02×(A測定－A 空白)÷(A 標準－A 空白)÷W

C 標準液：20 μmol/L,；W：土壤樣品質量，g,；V 總：上清液二總體積,，1ml=0.001 L。 4.土壤有機磷（μmol /g 干重）=土壤總磷-土壤無機磷,。

注意事項：

試劑三配制過程中,，可能會產生黑色固體，其不影響結果,，注意吸取時不要將黑色固體吸入,。

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