細(xì)胞實(shí)驗(yàn)步驟：

一,、細(xì)胞復(fù)蘇

1.將10ml移液管,、移液槍、1ml槍頭,、50ml離心管,、T25培養(yǎng)瓶、酒精燈,、廢液缸等物品放入超凈工作臺(tái),，紫外燈照射30min后再通風(fēng)30min；

2.預(yù)熱培養(yǎng)基,；

3.用75%酒精消毒后放入超凈工作臺(tái),；

4.將凍存細(xì)胞從液氮罐中取出；

5.放入一次性手套于37℃水浴鍋中快速晃動(dòng)使其融化,；

6.用75%酒精消毒后放入超凈工作臺(tái),；

7.吸取9ml培養(yǎng)基到50ml離心管中；

8.用1ml槍頭吸取解凍的細(xì)胞懸液于離心管中,；

9.1000r/min,離心5min,；

10.用75%酒精消毒后放入超凈工作臺(tái)；

11.吸棄上清液,；

12.吸取1ml培養(yǎng)基重懸細(xì)胞,，將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)，補(bǔ)加適量培養(yǎng)基,，輕輕晃動(dòng)培養(yǎng)瓶使細(xì)胞分布均勻,，并做好標(biāo)記；

13.在顯微鏡下觀察復(fù)蘇的細(xì)胞密度及狀態(tài),；

14.將細(xì)胞放回二氧化碳培養(yǎng)箱中靜置培養(yǎng),。

商品屬性：

大鼠原代淚道上皮細(xì)胞培養(yǎng)基由團(tuán)隊(duì)精心優(yōu)化,，經(jīng)過(guò)長(zhǎng)期測(cè)試，本產(chǎn)品可保持大鼠原代淚道上皮細(xì)胞優(yōu)良的生長(zhǎng)狀態(tài),。

本產(chǎn)品中已包含大鼠原代淚道上皮細(xì)胞生長(zhǎng)所需的各種成分,，無(wú)需添加任何成分，可直接用于大鼠原代淚道上皮細(xì)胞的培養(yǎng),。

注意事項(xiàng)：

僅限科研用,。

培養(yǎng)體系中的一些組分是對(duì)人體健康有害的物質(zhì)，請(qǐng)不要用暴露的皮膚接觸培養(yǎng)體系的液體和有培養(yǎng)體系的液體殘留的容器內(nèi)部,；這部分有害物質(zhì)的濃度和危害性都較低,，如有接觸，立即用自來(lái)水沖洗即可,。

細(xì)胞培養(yǎng)步驟：

?細(xì)胞復(fù)蘇?：

從液氮罐中取出凍存細(xì)胞,，迅速放入37℃水浴中解凍。

解凍后,，將細(xì)胞轉(zhuǎn)移到含有新鮮培養(yǎng)基的培養(yǎng)皿中,，輕輕搖動(dòng)使細(xì)胞均勻分布。

放入37℃,、5%CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng),。

?細(xì)胞換液?：

吸除或倒掉培養(yǎng)皿內(nèi)的舊培養(yǎng)液。

加入PBS緩沖液,，輕輕漂洗細(xì)胞,，以去除懸浮在細(xì)胞表面的碎片，重復(fù)幾次,。

加入新的培養(yǎng)基,。

?細(xì)胞傳代?：

當(dāng)細(xì)胞長(zhǎng)到80%~90%時(shí)，進(jìn)行傳代,。

吸除或倒掉瓶?jī)?nèi)舊培養(yǎng)液,，加入PBS緩沖液漂洗。

加入消化液,，輕輕搖動(dòng)使消化液流遍所有細(xì)胞表面,。

將培養(yǎng)瓶放入37℃培養(yǎng)箱中靜止幾分鐘，觀察細(xì)胞變化,。當(dāng)細(xì)胞間隙增大后,，加入含有血清的培養(yǎng)液終止消化。

吹打細(xì)胞使其成為懸液，轉(zhuǎn)移到離心管中離心,。

棄上清，加入適量的細(xì)胞培養(yǎng)液重懸細(xì)胞,。

按比例分裝到新的培養(yǎng)皿中,，補(bǔ)加新鮮培養(yǎng)基。

做好標(biāo)記,，放入37℃,、5%CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。

?細(xì)胞凍存?：

選擇對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期的細(xì)胞進(jìn)行凍存,。

將細(xì)胞轉(zhuǎn)移到離心管中離心,，棄上清。

加入適量的凍存液（如90%的培養(yǎng)基+10%的DMSO）,，輕輕吹打重懸細(xì)胞,。

將細(xì)胞轉(zhuǎn)移到冷凍保存管中，標(biāo)記后放入程序降溫盒,，再放入-80℃冰箱凍存,。幾小時(shí)后或過(guò)夜轉(zhuǎn)至液氮罐保存。

公司正在出售的產(chǎn)品：

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小鼠β內(nèi)啡肽(β-EP)試劑盒   96T/48T

小鼠β甘露糖苷酶(βManase)試劑盒   96T/48T

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humanglamicaciddecarboxylaseaoaibody,GAD-AbELISAKit 人谷脫羧酶自身抗體(GAD-Ab)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

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SBNO1蛋白抗體

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大鼠原代淚道上皮細(xì)胞專用培養(yǎng)基BACE1重組小鼠 BACE-1 蛋白 Protein

Clenbuterol Hydrochloride/BSA 鹽酸克偶聯(lián)牛血清白蛋白BSA 1mgClenbuterol Hydrochloride/BSA 鹽酸克偶聯(lián)牛血清白蛋白BSA

LSAMP重組人 LSAMP 蛋白 Protein

F3 Protein Human 重組人 Coagulation Factor III / Tissue Factor / CD142 蛋白

CD38 Protein Mouse 重組小鼠 SCARB3 蛋白