諾博萊德 細(xì)菌活力/毒性檢測試劑盒 Live/Dead Bacteria Staining Kit

細(xì)菌活力/毒性檢測試劑盒   蛋白提取

產(chǎn)品貨號：P5143

產(chǎn)品名稱：細(xì)菌活力/毒性檢測試劑盒細(xì)菌活力/毒性檢測試劑盒 Live/Dead Bacteria Staining Kit

產(chǎn)品規(guī)格：20T/100T

產(chǎn)品簡介：

英文名稱：Live/Dead Bacteria Staining Kit

規(guī)格：20T ; 100T

儲存條件：-20℃ 避光保存,。

具體產(chǎn)品的參數(shù)以收到產(chǎn)品說明書的參數(shù)為準(zhǔn)

NobleRyder P5143 細(xì)菌活力/毒性檢測試劑盒 Live/Dead Bacteria Staining Kit

產(chǎn)品簡介:

試劑盒包含兩種熒光染料，NucGreen是綠色核酸染料,，可染色活細(xì)菌和死細(xì)菌;EthD-III是紅色核酸染料,，僅染色細(xì)胞膜受損的死細(xì)菌。將NucGreen和EthD-II共同使用,，具有鑒別細(xì)菌死活的能力,。完整細(xì)胞膜的細(xì)菌呈現(xiàn)綠色，而具有受損細(xì)胞膜的細(xì)菌在不同通道下可分別呈現(xiàn)綠色和紅色,。

細(xì)菌活力的常見標(biāo)準(zhǔn)是在合適的營養(yǎng)培養(yǎng)基中繁殖的能力,，稱為生長測定。本試劑盒通常與在液體或固體培養(yǎng)基中的生長測定結(jié)果有著很好的一致性,。但,，在某些條件下，膜損傷的細(xì)菌可能會在營養(yǎng)培養(yǎng)基中恢復(fù)并繁殖,，而這種細(xì)菌在本測定中會被認(rèn)定死菌,。相反，一些具有完整膜的細(xì)菌可能無法在營養(yǎng)培養(yǎng)基中繁殖,，但在本測定中會被認(rèn)定活菌,。因此，若本試劑盒檢測結(jié)果和細(xì)菌生長測定之間有較大的差異，應(yīng)考慮上述可能,。

光譜特性:

NucGreen: Ex/Em: 503/530nm(結(jié)合DNA)

EthD-III:Ex/Em: 530/620nm(結(jié)合DNA)

產(chǎn)品使用（僅供參考）：

以 Esc.coli 為例熒光鏡檢

(1) 在合適的液體培養(yǎng)基中培養(yǎng)細(xì)菌至對數(shù)生長晚期,。

(2) 向 EP 管中加入1mL 的菌液，5,000g 離心 15min,。

(3) 去除上清液,，加入1mL的0.85%NaCl溶液重懸細(xì)菌。

(4) 5,000g 離心 15 min,，去除上清，加入1mL的0.85%NaCl溶液重懸細(xì)菌,。重復(fù)一次,。

(5) 將菌懸液密度調(diào)整到 108個(gè)細(xì)菌/mL（OD670≈0.03）。

(6) 配制染色工作液：取1μL的NucGreen 和2μL的 EthD-III,，充分混勻后,，加入8μL的0.85%NaCl溶液。

(7) 取1mL菌懸液,，加 10μL 的染色工作液,。充分混合，室溫避光孵育15min,。

(8) 染色結(jié)束后,，取10μL菌懸液滴加在潔凈的載玻片上，蓋玻片壓片后盡快觀察拍照,，避免干片后熒光猝滅,。

(9) 熒光顯微鏡成像：綠色熒光可使用 FITC適用濾光片觀察，紅色熒光可使用PI適用濾光片觀察,。

注意事項(xiàng)

(1) 若使用孔板檢測,，可靜置 10 min 后留少量菌液成像，能有效降低背景,。

(2) 為更接近真實(shí)結(jié)果,，Merge 圖片時(shí)建議保持紅色熒光與綠色熒光亮度一致。

(3) 在對細(xì)菌染色之前,，必須注意除去生長介質(zhì)的殘留,。核酸和其他培養(yǎng)基組分可能會以某種方

式結(jié)合染料，導(dǎo)致不可接受的染色變化,。不建議使用磷酸鹽（PBS）緩沖液,，以免降低染色效率。

(4) 正式實(shí)驗(yàn)前應(yīng)依據(jù)不同菌株適當(dāng)調(diào)整染料用量及濃度,。一般最好使用能夠提供充足信號的zui低染料濃度,。

(5) 本產(chǎn)品僅用于科研。

細(xì)菌活力/毒性檢測試劑盒   蛋白提取

產(chǎn)品訂購信息：

P5143  細(xì)菌活力/毒性檢測試劑盒 Live/Dead Bacteria Staining Kit  20T/100T