諾博萊德 無(wú)血清細(xì)胞凍存液 （含酚紅） Serum-free Cell Freezing Medium (With Phenol Red)

通用細(xì)胞凍存液(無(wú)血清)  

產(chǎn)品貨號(hào)：C0738

產(chǎn)品名稱：無(wú)血清細(xì)胞凍存液 （含酚紅） Serum-free Cell Freezing Medium (With Phenol Red)

產(chǎn)品規(guī)格：50ml/100ml

產(chǎn)品簡(jiǎn)介：

英文名稱：Serum-free Cell Freezing Medium (With Phenol Red)

中文名稱：無(wú)血清細(xì)胞凍存液

規(guī)格：100ml ; 50ml

儲(chǔ)存條件：2-8℃

具體產(chǎn)品的參數(shù)以收到產(chǎn)品說(shuō)明書的參數(shù)為準(zhǔn)

NobleRyder C0738無(wú)血清細(xì)胞凍存液 （含酚紅） Serum-free Cell Freezing Medium (With Phenol Red)

細(xì)胞凍存液為即用型產(chǎn)品,，不含血清和動(dòng)物來(lái)源性蛋白,。因此，不僅降低了各類細(xì)菌,、病毒,、支原體等污染風(fēng)險(xiǎn)，保證凍存細(xì)胞的安全,，而且減少外源性蛋白對(duì)細(xì)胞正常生長(zhǎng)和分化的影響,。此外，無(wú)需程序降溫,，可長(zhǎng)期-80℃保存細(xì)胞,，適用于絕大多數(shù)哺乳動(dòng)物細(xì)胞的凍存。

產(chǎn)品簡(jiǎn)介：

細(xì)胞凍存液為即用型產(chǎn)品,，不含血清和動(dòng)物來(lái)源性蛋白,。因此，不僅降低了各類細(xì)菌、病毒,、支原體等污染風(fēng)險(xiǎn),，保證凍存細(xì)胞的安全，而且減少外源性蛋白對(duì)細(xì)胞正常生長(zhǎng)和分化的影響,。此外,，無(wú)需程序降溫，可長(zhǎng)期-80℃保存細(xì)胞,，適用于絕大多數(shù)哺乳動(dòng)物細(xì)胞的凍存,。

產(chǎn)品使用：

1. 細(xì)胞凍存

(1) 貼壁細(xì)胞：

移除細(xì)胞培養(yǎng)基，用無(wú)菌 1×PBS 輕輕清洗 細(xì)胞一次以除去殘余的血清,，再加入適量的yi酶消化液消化細(xì)胞,。

消化完成后立即加入適量含血清的細(xì)胞培養(yǎng)基以終止yi酶，隨后輕輕吹打細(xì)胞,，并適當(dāng)吹散和重懸,。

注：不可過(guò)度消化細(xì)胞，以剛好能把細(xì)胞吹打下來(lái)為最佳,。 過(guò)度消化后的細(xì)胞由于生長(zhǎng)狀況較差,，通常不宜再冷凍保存。吹打和重懸的過(guò)程也應(yīng)輕柔,，否則可能會(huì)影響細(xì)胞復(fù)蘇時(shí)的 存活率,。

懸浮細(xì)胞：從步驟（3）開(kāi)始執(zhí)行。

(2) 將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移至合適的離心管中,。

(3) 細(xì)胞計(jì)數(shù),，計(jì)算細(xì)胞總數(shù)和所需細(xì)胞凍存液的量。細(xì)胞的凍存密度一般為 1×10⁶-1×10⁷ cells/mL,。

(4) 100-200g,，離心 5-10 min，棄上清,。離心速度和時(shí)間取決于細(xì)胞類型,。

(5) 加入計(jì)算好的細(xì)胞凍存液體積，用移液槍輕輕吹打重懸細(xì)胞,，根據(jù)細(xì)胞類型調(diào)整細(xì)胞密度（一般為 1×106 cells/mL 或更高）,。

(6) 分裝：將上述細(xì)胞懸液分裝于1.5 mL 或 2 mL細(xì)胞凍存管中，并做好標(biāo)記,。

注：如果后續(xù)放入液氮罐中保存,，須使用可用于液氮凍存的細(xì)胞凍存管。

(7) 將細(xì)胞凍存管放置于-80oC 冰箱中,。

注：如果后續(xù)擬放入液氮中長(zhǎng)期保存,，可在-80oC 冰箱內(nèi)保存24h后移入液氮罐內(nèi),。

2. 細(xì)胞復(fù)蘇：

(1) 從-80oC 冰箱或液氮中取出凍存管，立即放入 37oC水浴鍋中,，輕輕晃動(dòng)少于1min，直至殘留小部分冰塊,。

(2) 將上述細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移至 15 mL無(wú)菌離心管中,，加入5- 10 mL預(yù)熱的wan全培養(yǎng)基，輕輕混勻,。

注：對(duì)于一些復(fù)蘇效率很高的細(xì)胞也可直接將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移至離心管進(jìn)行下一步,。

(3) 100-200g，離心 5-10 min,，離心速度和時(shí)間取決于細(xì)胞類型,。

(4) 沉淀細(xì)胞，小心去除上清,。

(5) 加入適量預(yù)熱的wan全培養(yǎng)基,，輕輕吹勻后轉(zhuǎn)移至培養(yǎng)器皿中，置于細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng),。

注意事項(xiàng)

(1) 本產(chǎn)品含有酚紅指示劑,， 長(zhǎng)時(shí)間敞口會(huì)導(dǎo)致 PH 變化，并出現(xiàn)沉淀,。故使用過(guò)程中請(qǐng)盡量縮短敞口時(shí)間,，使用完畢后蓋緊蓋子保存，如有必要可適當(dāng)分裝使用,。若使用一段時(shí)間 后出現(xiàn)少量沉淀,，經(jīng)測(cè)試對(duì)細(xì)胞凍存無(wú)影響，去除沉淀可采取離心取上清或者用0.22um孔徑過(guò)濾器

過(guò)濾等方法去除,。

(2) 本產(chǎn)品含DMSO,，部分對(duì)DMSO敏感的細(xì)胞，建議進(jìn)行預(yù)實(shí)驗(yàn),。

(3) 對(duì)于某些珍貴的細(xì)胞,，建議同時(shí)使用含F(xiàn)BS的常規(guī)凍存液進(jìn)行對(duì)比測(cè)試，確認(rèn)性能后再進(jìn)行正式凍存,。

(4) 凍存細(xì)胞分裝后應(yīng)盡快移入-80oC 超低溫冰箱內(nèi),，減少在外存放時(shí)間。

(5) 為了您的安全和健康,，請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作,。

(6) 本產(chǎn)品僅用于科研。

 通用細(xì)胞凍存液(無(wú)血清)  

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C0738 無(wú)血清細(xì)胞凍存液 （含酚紅） Serum-free Cell Freezing Medium (With Phenol Red) 50ml/100ml