產(chǎn)品簡介：

尼帕病毒(Nipah virus,， NiV)是一種新發(fā)現(xiàn)的副豁病毒，屬于生物安全 4 級(BSL4)病毒,。NiV 可引起豬的呼吸道疾病和人的急性發(fā)熱性腦炎,，并且對人具有高度致死性，人感染 NIV 后死亡率高達 40%-70%,，且在 2004 年孟加拉國疫情中顯示有人與人之間傳播的可能性,。近年來，疫情在東南亞一些國家,，如馬來西亞,、孟加拉、    印度等頻頻出現(xiàn),引起人們高度關注,。由于豬感染 NiV 后可大量繁殖和迅速傳播此病毒,，但癥狀并不明顯，所以難以及時發(fā)現(xiàn)疫情,，而我國又是養(yǎng)豬大國,因此 NiV 對我國構成嚴重威脅,。

本試劑盒適用于檢測的疑似感染動物或人的血液、腦脊液,、咽-拭子等樣本中尼帕病毒,，適用于尼帕病毒感染的輔助診斷。

產(chǎn)品特點：

一,、嚴格的質控體系

所有試劑盒從原料到成品都經(jīng)過嚴格的質量控制,，確保每一盒試劑盒都具有穩(wěn)定可靠的質量，讓您的檢測結果更可信,。

二,、高靈敏度

產(chǎn)品經(jīng)過不斷優(yōu)化，具有出色的靈敏度,，能夠檢測到極微量的尼帕病毒核酸,，不放過任何潛在的感染風險。

三,、便捷操作

綜合各項指標特性,，研發(fā)出操作便捷的試劑盒,。從樣本制備到結果分析，每一步都有清晰的操作指南,，即使是新手也能輕松上手,。

四、多樣的檢測驗證樣本

該試劑盒經(jīng)過多種樣本的檢測驗證,，適用于血液,、腦脊液、咽-拭子等多種常見樣本,，滿足不同的檢測需求,。

五、個性化定制服務

專業(yè)的研發(fā)團隊可為您提供個性化的定制服務,，根據(jù)您的特殊需求進行產(chǎn)品優(yōu)化和調整,，為您提供更貼合實際的檢測方案。

六,、豐富的產(chǎn)品線

除了尼帕病毒（NIPAH）熒光PCR檢測試劑盒,，我們還提供Elisa試劑盒以及其它快檢試劑盒，滿足您在不同領域的檢測需求,。

七,、完善的售前售后服務

我們擁有完善專業(yè)的售前售后服務團隊，在您購買前為您提供詳細的產(chǎn)品咨詢和技術支持,，購買后為您解決使用過程中遇到的任何問題,，讓您無后顧之憂。

產(chǎn)品參數(shù)：

產(chǎn)品規(guī)格

50T/盒,，可滿足一定規(guī)模的檢測需求,。

檢測方法

實時熒光PCR，具有快速,、準確,、靈敏等優(yōu)點。

適用儀器

ABI7500,、安捷倫 MX3000P/3005P,、LightCycler、Bio-Rad,、Eppendorf 等系列熒光定量 PCR 檢測儀,。

標本采集

采集疑似感染動物或人血液、腦脊液,、咽-拭子等樣本,。樣品的運送過程宜在 0℃以下進行。

保存和運輸

采集或處理好的樣品在 2℃~8℃條件下保存應不超過 24 h,；若需長期保存,，應放置-70℃以下保存,，凍融不超過 3 次。

使用方法：

1.樣品處理（樣本處理區(qū)）

1.1樣本前處理

血液樣本直接分離血清或血漿,。腦脊液樣本首先在 4℃以 3000 r/min 離心 10 min,，小心吸棄上層液體,，保留約250 μL 上清,，并用其重懸細胞沉淀。咽-拭子樣本直接進行病毒核酸提取,。不能立即進行檢驗時,，樣本凍存于-70℃ 超低溫冰箱備用。

1.2核酸提取

推薦采用上海烜雅生物科技有限公司生產(chǎn)的核酸-提取試劑（離心柱法）進行核酸提取,，請按照試劑說明書    進行操作,。

2.試劑配制（試劑準備區(qū)）

根據(jù)待檢測樣本總數(shù)，設所需要的 PCR 反應管管數(shù)為 N(N=樣本數(shù)+1 管陰性對照+1 管陽性對照,；反應管數(shù)每滿 10 份,，多配制 1 份)，每測試反應體系配制如下表：

試劑NIPAH 反應液酶液

用量19μL1μL

將混合好的測試反應液分裝到 PCR 反應管中,，20μL/管,。

1.加樣（樣本處理區(qū)）

將步驟 1 提取的核酸、陽性質控品,、陰性質控品各取 5μL,，分別加入相應的反應管中，蓋好管蓋,，混勻,， 短暫離心。

2.PCR 擴增（核酸擴增區(qū)）

4.1將待檢測反應管置于熒光定量 PCR 儀反應槽內,；

4.2設置好通道,、樣品信息，反應體系設置為 25μL,；熒光通道選擇：

檢測通道（Reporter Dye）FAM,， 淬滅通道（Quencher Dye）NONE，ABI 系列儀器請勿選擇 ROX 參比熒光,。

4.3推薦循環(huán)參數(shù)設置：

步驟循環(huán)數(shù)溫度時間收集熒光信號

11 cycle50℃10min否

21 cycle95℃2min否

345 cycles95℃15sec否

60℃30sec是

3.結果分析判定

5.1結果分析條件設定（請參照各儀器使用說明書進行設置,，以分析 ABI7500 儀器為例）

反應結束后自動保存結果，根據(jù)分析后圖像調節(jié) Baseline 的 Start 值,、End 值以及 Threshold 值（用戶可根據(jù)實際情況自行調整,，Start 值可設在 3～15、End 值可設在 5～20,，使閾值線位于擴增曲線指數(shù)期,，陰性質控品的擴增曲線平直或低于閾值線）,，點擊 Analyze 自動獲得分析結果。

5.2結果判斷

陽性：檢測通道 Ct 值≤40,，且曲線有明顯的指數(shù)增長曲線,； 陰性：樣本檢測結果 Ct 值>40 或無 Ct 值。

5.3質控標準

陰性質控品：無特異性擴增曲線或無 Ct 值顯示,；

陽性質控品：擴增曲線有明顯指數(shù)增長期,，且 Ct 值≤32； 以上條件應同時滿足,，否則實驗視為無效,。

4.檢測方法的局限性

1.樣本檢測結果與樣本收集、處理,、運送以及保存質量有關,；

2.樣本提取過程中沒有控制好交叉污染，會出現(xiàn)假陽性結果,；

3.陽性對照,、擴增產(chǎn)物泄漏，會導致假陽性結果,；

4.病原體在流行過程中基因突變,、重組，會導致假陰性結果,；

5.不同的提取方法存在提取效率差異,，會導致假陰性結果；

6.試劑運輸,，保存不當或試劑配制不準確引起的試劑檢測效能下降,，出現(xiàn)假陰性或定量檢測不準確的結果；

7.本檢測結果僅供參考,，如須確診請結合臨床癥狀以及其他檢測手段,。

注意事項：

1.所有操作嚴格按照說明書進行；

2.試劑盒內各種組分使用前應自然融化,，完-全混勻并短暫離心,；

3.反應液應避光保存；

4.反應中盡量避免氣泡存在,，管蓋需蓋緊,；

5.使用一次性吸頭、一次性手套和各區(qū)專用工作服,；

6.樣本處理,、試劑配制、加樣需在不同區(qū)進行，以免交叉污染,；

7.實驗完畢后用 10%次氯酸或 75%酒精或紫外燈處理工作臺和移液器,；

8.試劑盒里所有物品應視為污染物對待，并按照《微生物生物醫(yī)學實驗室生物安全通則》進行處理,。

9.本產(chǎn)品僅供科研,。

選擇我們的尼帕病毒（NIPAH）熒光PCR檢測試劑盒，就是選擇精準,、高效,、可靠的檢測方案，為您的科研實驗保駕護航,！