產品簡介：

本試劑盒適用于檢測的疑似感染病人的靜脈血等標本中登革熱病毒Ⅲ型 RNA,，適用于登革熱病毒Ⅲ型感染的輔助診斷,。

產品特點：

一、嚴格的質控體系

所有試劑盒從原料到成品都經過嚴格的質量控制,，確保每一盒試劑盒都具有穩(wěn)定可靠的質量,，讓您的檢測結果更可信。

二,、高靈敏度

產品經過不斷優(yōu)化,，具有出色的靈敏度，能夠檢測到極微量的登革熱病毒3型核酸,，不放過任何潛在的感染風險,。

三、便捷操作

綜合各項指標特性,，研發(fā)出操作便捷的試劑盒,。從樣本制備到結果分析，每一步都有清晰的操作指南,，即使是新手也能輕松上手,。

四、多樣的檢測驗證樣本

該試劑盒經過多種樣本的檢測驗證,，適用于靜脈血等多種常見樣本,，滿足不同的檢測需求。

五,、個性化定制服務

專業(yè)的研發(fā)團隊可為您提供個性化的定制服務,，根據您的特殊需求進行產品優(yōu)化和調整，為您提供更貼合實際的檢測方案,。

六,、豐富的產品線

除了登革熱病毒3型（DFV-Ⅲ）熒光PCR檢測試劑盒，我們還提供Elisa試劑盒以及其它快檢試劑盒,，滿足您在不同領域的檢測需求,。

七、完善的售前售后服務

我們擁有完善專業(yè)的售前售后服務團隊,，在您購買前為您提供詳細的產品咨詢和技術支持,，購買后為您解決使用過程中遇到的任何問題，讓您無后顧之憂,。

產品參數：

產品規(guī)格

50T/盒,，可滿足一定規(guī)模的檢測需求。

檢測方法

實時熒光PCR,，具有快速,、準確,、靈敏等優(yōu)點。

適用儀器

ABI ,、安捷倫 MX3000P/3005P、LightCycler,、Bio-Rad,、eppendorf 等系列熒光定量 PCR 檢測儀。

標本采集

疑似感染病人的靜脈血 2mL 至 EDTA-2Na 抗凝管,。

保存和運輸

上述標本短期內可保存于-20℃,，長期保存可置-70℃，但不能超過 6 個月,，標本運送應采用 2~8℃冰袋運輸,，嚴禁反復凍融。

使用方法：

1.樣品處理（樣本處理區(qū)）

1.1樣本前處理

2000rpm 離心 5min,，吸取上層血清轉入 1.5mL 滅菌離心管中,。

1.2核酸提取

推薦采用上海烜雅生物科技有限公司生產的核酸-提取或純化試劑（磁珠法或離心柱法）進行核酸提取， 請按照試劑說明書進行操作,。

2.試劑配制（試劑準備區(qū)）

根據待檢測樣本總數,，設所需要的 PCR 反應管管數為 N(N=樣本數+1 管陰性對照+1 管陽性對照；反應管數每滿 10 份,，多配制 1 份),，每測試反應體系配制如下表：

試劑DFV-Ⅲ反應液酶液

用量20μL1μL

3.加樣（樣本處理區(qū)）

將步驟 1 提取的核酸、陽性質控品,、陰性質控品各取 4μL,，分別加入相應的反應管中，蓋好管蓋,，混勻,， 短暫離心。

4.PCR 擴增（核酸擴增區(qū)）

4.1將待檢測反應管置于熒光定量 PCR 儀反應槽內,；

4.2設置好通道,、樣品信息，反應體系設置為 25μL,；熒光通道選擇：

檢測通道（Reporter Dye）FAM,， 淬滅通道（Quencher Dye）NONE，請勿選擇 ROX 參比熒光,。

4.3推薦循環(huán)參數設置：

步驟循環(huán)數溫度時間收集熒光信號

11 cycle42℃20min否

21 cycle95℃10min否

340 cycles94℃15sec否

55℃30sec是

5.結果分析判定

5.1結果分析條件設定

設置 Baseline 和 Threshold：一般直接按機器自動分析的結果分析,，當曲線出現(xiàn)整體傾斜時，根據分析后圖像調節(jié) Baseline 的 start 值(一般可在 3~15 范圍內調節(jié)),、stop 值(一般可在 5~20 范圍內調節(jié)),，以及Threshold 的Value 值(上下拖動閾值線至高于陰性對照),，重新分析結果。

5.2結果判斷

陽性：檢測通道 Ct 值≤35,，且曲線有明顯的指數增長曲線,；

可疑：檢測通道 35<Ct 值≤38，建議重復檢測,，如果檢測通道仍為 35<Ct 值≤38,，且曲線有明顯的增長曲線， 判定為陽性,，否則為陰性,；

陰性：樣本檢測結果 Ct 值>38 或無 Ct 值。

6.質控標準

陰性質控品：Ct>38 或無 Ct 值顯示,；

陽性質控品：擴增曲線有明顯指數生長期,，且 Ct 值≤32； 以上條件應同時滿足,，否則實驗視為無效,。

7.檢測方法的局限性

1.樣本檢測結果與樣本收集、處理,、運送以及保存質量有關,；

2.樣本提取過程中沒有控制好交叉污染，會出現(xiàn)假陽性結果,；

3.陽性對照,、擴增產物泄漏，會導致假陽性結果,；

4.病原體在流行過程中基因突變,、重組，會導致假陰性結果,；

5.不同的提取方法存在提取效率差異,，會導致假陰性結果；

6.試劑運輸,，保存不當或試劑配制不準確引起的試劑檢測效能下降,，出現(xiàn)假陰性或定量檢測不準確的結果；

7.本檢測結果僅供參考,，如須確診請結合臨床癥狀以及其他檢測手段,。

注意事項：

1.所有操作嚴格按照說明書進行；

2.試劑盒內各種組分使用前應自然融化,，完-全混勻并短暫離心,；

3.反應液應避光保存；

4.反應中盡量避免氣泡存在，管蓋需蓋緊,；

5.使用一次性吸頭,、一次性手套和各區(qū)專用工作服；

6.樣本處理,、試劑配制,、加樣需在不同區(qū)進行，以免交叉污染,；

7.實驗完畢后用 10%次氯酸或 75%酒精或紫外燈處理工作臺和移液器,；

8.試劑盒里所有物品應視為污染物對待，并按照《微生物生物醫(yī)學實驗室生物安全通則》進行處理,。

9.本產品僅供科研。

選擇我們的登革熱病毒3型（DFV-Ⅲ）熒光PCR檢測試劑盒,，就是選擇精準,、高效、可靠的檢測方案,，為您的科研實驗保駕護航,！