產品簡介：

利什曼原蟲（Leishania）  屬錐蟲科利什曼屬?是一種專性細胞內寄生的鞭毛蟲?可寄生于人和哺乳動物內臟引起人畜共患的利什曼原蟲病（Leishmania spp）?該病又稱為黑熱病,。

本試劑盒適用于檢測骨髓,、抗凝全血、白蛉,、動物臟器組織等樣本中利士曼原蟲病,，用于利士曼原蟲感染的輔助診斷。

產品特點：

一,、嚴格的質控體系

所有試劑盒從原料到成品都經(jīng)過嚴格的質量控制,，確保每一盒試劑盒都具有穩(wěn)定可靠的質量，讓您的檢測結果更可信。

二,、高靈敏度

產品經(jīng)過不斷優(yōu)化,，具有出色的靈敏度，能夠檢測到極微量的利什曼原蟲病核酸,，不放過任何潛在的感染風險,。

三、便捷操作

綜合各項指標特性,，研發(fā)出操作便捷的試劑盒,。從樣本制備到結果分析，每一步都有清晰的操作指南,，即使是新手也能輕松上手,。

四、多樣的檢測驗證樣本

該試劑盒經(jīng)過多種樣本的檢測驗證,，適用于骨髓,、抗凝全血、白蛉,、動物臟器等多種常見樣本,，滿足不同的檢測需求。

五,、個性化定制服務

專業(yè)的研發(fā)團隊可為您提供個性化的定制服務,，根據(jù)您的特殊需求進行產品優(yōu)化和調整，為您提供更貼合實際的檢測方案,。

六,、豐富的產品線

除了利什曼原蟲病(Leishmania spp)PCR試劑盒，我們還提供Elisa試劑盒以及其它快檢試劑盒,，滿足您在不同領域的檢測需求,。

七、完善的售前售后服務

我們擁有完善專業(yè)的售前售后服務團隊,，在您購買前為您提供詳細的產品咨詢和技術支持,，購買后為您解決使用過程中遇到的任何問題，讓您無后顧之憂,。

產品參數(shù)：

產品規(guī)格

50T/盒,，可滿足一定規(guī)模的檢測需求。

檢測方法

實時熒光PCR,，具有快速,、準確,、靈敏等優(yōu)點,。

適用儀器

ABI、安捷倫 MX3000P/3005P、LightCycler,、Bio-Rad,、Eppendorf 等系列熒光定量 PCR 檢測儀。

標本采集

采集骨髓,、抗凝全血,、白蛉、動物臟器組織等樣本,。

保存和運輸

上述標本短期內可保存于-20℃,，長期保存可置-70℃，但不能超過 6 個月,，標本運送應采用 2~8℃冰袋運輸,， 嚴禁反復凍融。

使用方法：

1.樣品處理（樣本處理區(qū)）

1.1樣本前處理

骨髓,、抗凝全血樣本處理：骨髓涂片以生理鹽水洗滌,，重懸至 200μL。取 200μL 骨髓或抗凝全血,，進行提?。?白蛉,、動物臟器樣本處理：單只白蛉或動物組織約 2mg 充分研磨,，加入無菌水 300μL 重懸，取 200μL 進行提

取,。

1.2核酸提取

推薦采用上海烜雅生物科技有限公司生產的核酸-提取試劑（離心柱法）進行核酸提取,，請按照試劑說明書進    行操作。

2.試劑配制（試劑準備區(qū)）

根據(jù)待檢測樣本總數(shù),，設所需要的 PCR 反應管管數(shù)為 N（N=樣本數(shù)+1 管陰性對照+1 管陽性對照,；反應管數(shù)每滿 10 份，多配制 1 份）,，每測試反應體系配制如下表：

試劑LS 反應液酶液

用量（樣本數(shù)為 N）19μL1μL

將混合好的測試反應液分裝到 PCR 反應管中,，20μL/管。

3.加樣（樣本處理區(qū)）

將步驟 1 提取的核酸,、陽性質控品,、陰性質控品各取 5μL，分別加入相應的反應管中,，蓋好管蓋,，混勻，短暫離心,。

4.PCR 擴增（核酸擴增區(qū)）

4.1將待檢測反應管置于熒光定量 PCR 儀反應槽內,；

4.2設置好通道,、樣品信息，反應體系設置為 25μL,；

熒光通道選擇： 檢測通道（Reporter Dye）FAM,， 淬滅通道（Quencher Dye）NONE，ABI 系列儀器請勿選擇

ROX 參比熒光,，選擇 None 即可,。

4.3推薦循環(huán)參數(shù)設置：

步驟循環(huán)數(shù)溫度時間收集熒光信號

11 cycle95℃2min否

245 cycles95℃15sec否

60℃30sec是

5.結果分析判定

結果分析條件設定（請參照各儀器使用說明書進行設置，以分析 ABI7500 儀器為例）

反應結束后自動保存結果,，根據(jù)分析后圖像調節(jié) Baseline 的 Start 值,、End 值以及 Threshold 值（用戶可根據(jù)實際情況自行調整，Start 值可設在 3～15,、End 值可設在 5～20,，使閾值線位于擴增曲線指數(shù)期，陰性質控品的擴增曲線平直或低于閾值線）,，點擊 Analyze 自動獲得分析結果,。

5.1結果判斷

陽性：檢測通道 Ct 值≤40，且曲線有明顯的指數(shù)增長曲線,； 陰性：樣本檢測結果無 Ct 值,，且無特異性擴增曲線；

可疑：樣本檢測結果 40＜Ct 值≤45,，建議重復檢測,，如果檢測通道仍為 40<Ct 值≤45，且曲線有明顯的增長曲線,，判定為陽性,，否則為陰性。

6.質控標準

陰性質控品：無特異性擴增曲線或無 Ct 值顯示,；

陽性質控品：擴增曲線有明顯指數(shù)增長期,，且 Ct 值≤32； 以上條件應同時滿足,，否則實驗視為無效,。

7.檢測方法的局限性

1.樣本檢測結果與樣本收集、處理,、運送以及保存質量有關,；

2.樣本提取過程中沒有控制好交叉污染，會出現(xiàn)假陽性結果,；

3.陽性對照,、擴增產物泄漏，會導致假陽性結果,；

4.病原體在流行過程中基因突變,、重組,，會導致假陰性結果；

5.不同的提取方法存在提取效率差異,，會導致假陰性結果；

6.試劑運輸,，保存不當或試劑配制不準確引起的試劑檢測效能下降,，出現(xiàn)假陰性或定量檢測不準確的結果；

7.本檢測結果僅供參考,，如須確診請結合臨床癥狀以及其他檢測手段,。

注意事項：

1.所有操作嚴格按照說明書進行；

2.試劑盒內各種組分使用前應自然融化,，完-全混勻并短暫離心,；

3.反應液應避光保存；

4.反應中盡量避免氣泡存在,，管蓋需蓋緊,；

5.使用一次性吸頭、一次性手套和各區(qū)專用工作服,；

6.樣本處理,、試劑配制、加樣需在不同區(qū)進行,，以免交叉污染,；

7.實驗完畢后用 10%次氯酸或 75%酒精或紫外燈處理工作臺和移液器；

8.試劑盒里所有物品應視為污染物對待,，并按照《微生物生物醫(yī)學實驗室生物安全通則》進行處理,。

9.本產品僅供科研。

選擇我們的利什曼原蟲病(Leishmania spp)PCR試劑盒,，就是選擇精準,、高效、可靠的檢測方案,，為您的科研實驗保駕護航,！