諾博萊德 真菌蛋白提取試劑盒

NobleRyder P5085 真菌蛋白提取試劑盒（蛋白組實(shí)驗(yàn),、質(zhì)譜適用） 

產(chǎn)品貨號(hào)：P5085

產(chǎn)品名稱(chēng)：真菌蛋白提取試劑盒（蛋白組實(shí)驗(yàn),、質(zhì)譜適用）

產(chǎn)品規(guī)格：50T/100T

產(chǎn)品簡(jiǎn)介：

中文名稱(chēng)：真菌蛋白提取試劑盒（蛋白組實(shí)驗(yàn)、質(zhì)譜適用）

規(guī)格：100T ; 50T

儲(chǔ)存條件：2-8℃,，1 year

具體產(chǎn)品的參數(shù)以收到產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)的參數(shù)為準(zhǔn)

NobleRyder P5085 真菌蛋白提取試劑盒（蛋白組實(shí)驗(yàn),、質(zhì)譜適用）

真菌蛋白提取試劑盒（蛋白質(zhì)組學(xué)實(shí)驗(yàn)適用）適用于從各種絲狀真菌中提取總蛋白。優(yōu)化的裂解液配方可以充分釋放各種有隔膜菌絲和無(wú)隔膜菌絲蛋白以及各種菌絲bian態(tài)體蛋白,，提取過(guò)程簡(jiǎn)單方便,，可在1小時(shí)內(nèi)完成。本試劑盒含有的du特配方能夠有效溶解細(xì)胞膜組份,，包括細(xì)胞質(zhì)膜,、核膜和各種細(xì)胞器膜。本試劑盒含有的蛋白酶抑制劑混合物,，阻止了蛋白酶對(duì)蛋白的降解,，為提取高純度的蛋白提供了保證。本試劑盒的蛋白提取組份中不含有不可透析除去的去垢劑組份,，不含SDS,、TritonX-100、chaps等可能影響質(zhì)譜實(shí)驗(yàn)的組份,，最后得到的蛋白質(zhì)樣品經(jīng)過(guò)透析或者脫鹽處理后將不含有去垢劑,、高濃度鹽等影響，基本可以滿足下游任意的蛋白質(zhì)組學(xué)相關(guān)實(shí)驗(yàn)研究,。本產(chǎn)品的蛋白酶抑制劑混合物中不含AEBSF,，可以避免由于AEBSF導(dǎo)致的質(zhì)譜峰漂移，因此使用本產(chǎn)品提取的蛋白樣品可以用于質(zhì)譜(MassSpectrometry,MS)檢測(cè)和分析,，蛋白質(zhì)組學(xué)(proteomics)等相關(guān)研究,。

適用樣本：真菌

注：

1. 蛋白提取液A2、蛋白酶抑制劑未開(kāi)蓋使用前也可以2-8℃儲(chǔ)存,。開(kāi)蓋使用后-20℃儲(chǔ)存,。

2. 蛋白提取液A2避免反復(fù)凍融。

3. 蛋白酶抑制劑在2-8℃低溫時(shí)是固體狀態(tài),，從冰箱取出后恢復(fù)至室溫或37℃短時(shí)間水浴,，變成液體狀態(tài)后離心至管底部再開(kāi)蓋。

4. 試劑拆封后請(qǐng)盡快使用完,！

產(chǎn)品簡(jiǎn)介：

真菌蛋白提取試劑盒（蛋白質(zhì)組學(xué)實(shí)驗(yàn)適用）適用于從各種絲狀真菌中提取總蛋白,。優(yōu)化的裂解液配方可以充分釋放各種有隔膜菌絲和無(wú)隔膜菌絲蛋白以及各種菌絲bian態(tài)體蛋白，提取過(guò)程簡(jiǎn)單方便,，可在 1 小時(shí)內(nèi)完成,。

本試劑盒含有的du特配方能夠有效溶解細(xì)胞膜組份,。本試劑盒含有的蛋白酶抑制劑混合物，阻止了蛋白酶對(duì)蛋白的降解,，為提取高純度的蛋白提供了保證,。

本試劑盒的蛋白提取組份中不含有不可透析除去的去垢劑組份，不含 SDS,、Triton X-100,、chaps 等可能影響質(zhì)譜實(shí)驗(yàn)的組份，最后得到的蛋白質(zhì)樣品經(jīng)過(guò)透析或者脫鹽處理后將不含有去垢劑,、高濃度鹽等成分,，基本可以滿足下游任意的蛋白質(zhì)組學(xué)相關(guān)實(shí)驗(yàn)研究。

本產(chǎn)品的蛋白酶抑制劑混合物中不含 AEBSF,，可以避免由于 AEBSF 導(dǎo)致的質(zhì)譜峰漂移,，因此使用本產(chǎn)品提取的蛋白樣品可以用于質(zhì)譜(Mass Spectrometry, MS)檢測(cè)和分析，蛋白質(zhì)組學(xué)(proteomics)等相關(guān)研究,。

需要提取蕈類(lèi)真菌等大型真菌蛋白質(zhì)可以選用貨號(hào)為 EX1710 的試劑盒,。

本試劑盒提取的蛋白為具有天然蛋白構(gòu)象的活性蛋白。

本試劑盒中不含有 EDTA,，與金屬螯和層析等下游應(yīng)用兼容,。

本試劑盒提取的蛋白也可用于 Western Blotting、蛋白質(zhì)電泳,、免疫沉淀,、ELISA,、轉(zhuǎn)錄活性分析,、Gel shift 凝膠阻滯實(shí)驗(yàn)、酶活性測(cè)定等下游蛋白研究實(shí)驗(yàn),。

自備試劑和儀器：

離心機(jī),、振蕩器、勻漿器,、渦旋混勻器,、移液器、冰箱,、冰盒,，PBS 緩沖液、蛋白定量試劑盒,，離心管,、吸頭、一次性手套

1. 使用方便,，從細(xì)胞,，組織中提取蛋白不需經(jīng)過(guò)研磨,、反復(fù)凍融、超聲破碎等前處理,。

2. 提取過(guò)程簡(jiǎn)單方便,，將蛋白提取的時(shí)間縮短至 30 分鐘-1 小時(shí)。

3. 含蛋白穩(wěn)定劑,，提取的蛋白穩(wěn)定,。

4. 紫外檢測(cè)蛋白濃度時(shí)，背景干擾低,。

5. 總蛋白提取液含多種有效成分,，可以充分釋放胞漿蛋白、核蛋白和膜蛋白,，又可結(jié)合釋出的蛋白防止沉淀,。

6. 蛋白酶抑制劑抑制了蛋白的降解，蛋白酶抑制劑配方優(yōu)化,。蛋白酶抑制劑混合物包含 5種獨(dú)立的蛋白酶抑制劑 Aprotinin,、Leupeptin、Pepstatin A,、Bestatin,、E-64，每一種抑制劑可特異性抑制某一種或幾種蛋白酶活性,。該混合物優(yōu)化的組成使其可以抑制幾乎所有重要的蛋白酶活性,，包括si氨酸蛋白酶、半guang氨酸蛋白酶,、天冬氨酸蛋白酶,、丙氨酰-氨基肽酶等。

使用方法：

一,、使用注意事項(xiàng)：

1. 旋帽離心管裝的試劑在開(kāi)蓋前請(qǐng)短暫離心,，將蓋內(nèi)壁上的液體甩至管底，避免開(kāi)蓋時(shí)液體灑落,。

2. 實(shí)驗(yàn)過(guò)程中的所有試劑須預(yù)冷,；所有器具須放-20℃冰箱預(yù)冷。整個(gè)過(guò)程須保持樣品處于低溫,。

3. 蛋白酶抑制劑儲(chǔ)存期間溶液如果出現(xiàn)沉淀,，不影響使用，溶解后正常使用,。

4. 可以根據(jù)自己實(shí)驗(yàn)需要加入其它蛋白酶抑制劑單品,。

5. 離心機(jī)轉(zhuǎn)速有相對(duì)離心力（RCF，×g）和每分鐘轉(zhuǎn)速（RPM）兩種表示方式，有些離心機(jī)設(shè)置有 RPM 和×g 顯示切換,，但部分離心機(jī)沒(méi)有自動(dòng)切換功能,。需要用下面的公式進(jìn)行換算：g=r×1.118×10^-5×rpm²（r 為有效離心半徑，即從離心機(jī)軸心到離心收集管底部中心位置的長(zhǎng)度,，單位為厘米) 例如: 轉(zhuǎn)速為 3000rpm,，有效離心半徑為 10 cm，則相對(duì)離心力（RCF,，×g）為=10×1.118×10^-5×3000²=1006.2（×g）,。

二、真菌蛋白提?。?/span>

1. 提取液制備：

將試劑 A1 和試劑 A2 混合,，配成蛋白提取液 A，充分混勻備用,。

每 500ul 真菌蛋白提取液 A 中加入 2ul 蛋白酶抑制劑混合物,，混勻后置冰上備用。

【注】：

1) 蛋白提取液 A 置 4℃保存,，長(zhǎng)期不用的可以分裝后-20℃保存,。

2) 根據(jù)需要處理的樣品數(shù)量準(zhǔn)備蛋白提取液，蛋白酶抑制劑混合物不可以一次全部加入提取液,。

3) 加過(guò)蛋白酶抑制劑的提取液一周內(nèi)未使用完,，再次使用前需要再次加入蛋白酶抑制劑。

2. 取培養(yǎng)絲狀真菌,，在 4℃,，5000×g 條件下離心 5-10 分鐘，小心吸取培養(yǎng)基,，盡可能吸干,，收集菌體。

3. 用冷 PBS 洗滌細(xì)胞兩次,，每次洗滌后盡可能吸干上清,。

4. 將菌體置于研缽中用液氮研磨至粉末,。

【注】：

1) 若無(wú)液氮研磨條件,，可直接用蛋白提取液研磨。

5. 每 100mg 菌體中加入 300ul-500ul 蛋白提取液,，混勻后,，在 2-8℃條件下振蕩 20-30 分鐘。

【注】：

1) 使用振蕩器/搖床的較低轉(zhuǎn)速,，提取液能輕微晃動(dòng)即可,。

2) 沒(méi)有振蕩條件也可以不振蕩，稍微延長(zhǎng)提取液的處理時(shí)間，中間每隔幾分鐘用移液器吹打混勻即可,。

6. 在 4℃,，12000×g 條件下離心 10 分鐘。

7. 將上清吸入另一預(yù)冷的干凈離心管,，即可得到真菌總蛋白,。

8. 將上述蛋白提取物定量后分裝于-80℃冰箱保存?zhèn)溆没蛴糜谙掠螌?shí)驗(yàn)。

【注】：

1) 建議用 BCA 法進(jìn)行蛋白定量,。

2) 蛋白樣品-80℃存放一年沒(méi)有問(wèn)題,。注意不要被蛋白酶水解掉，不要被細(xì)菌污染,。

9. 將蛋白樣品透析處理或者脫鹽柱脫鹽處理后用于下游實(shí)驗(yàn),。

【注】：

1) 蛋白樣品中含有鹽，需要脫鹽處理后用于雙向電泳,。

2) 經(jīng)透析或脫鹽離心柱處理的蛋白樣品不含有去垢劑和高濃度鹽,。

注意事項(xiàng)：

1. 正式實(shí)驗(yàn)前請(qǐng)選取幾個(gè)樣本做預(yù)實(shí)驗(yàn)，以優(yōu)化實(shí)驗(yàn)條件,，取得優(yōu)良實(shí)驗(yàn)效果,。

2. 螺旋蓋微量試劑管裝的試劑在開(kāi)蓋前請(qǐng)短暫離心，將蓋和管內(nèi)壁上的液體離心至管底,，避免開(kāi)蓋時(shí)試劑損失,。

3. 禁止與其他品牌的試劑混用，否則會(huì)影響使用效果,。

4. 樣品或試劑被細(xì)菌或真菌污染或試劑交叉污染可能會(huì)導(dǎo)致錯(cuò)誤的結(jié)果,。

5. 最好使用一次性吸頭、管,、瓶或玻璃器皿,，可重復(fù)使用的玻璃器皿必須在使用前清洗并徹di清除殘留清潔劑。

6. 實(shí)驗(yàn)后完成后所有樣品及接觸過(guò)的器皿應(yīng)按照規(guī)定程序處理,。

7. 本試劑盒僅供科學(xué)研究使用,，不可用于診斷或治療。

8. 避免皮膚或粘膜與試劑接觸,；如果試劑不小心接觸皮膚或眼睛,，應(yīng)立即用水沖洗。

真菌蛋白提取試劑盒

產(chǎn)品訂購(gòu)信息：

P5085  真菌蛋白提取試劑盒（蛋白組實(shí)驗(yàn),、質(zhì)譜適用）  50T/100T