考馬斯亮藍G250染料試劑  凝膠染色

產(chǎn)品簡介:

考馬斯亮藍 G250 染料試劑由考馬斯亮藍 G250,、乙醇,、磷酸等組成，用于考馬斯染料結(jié)合(Bradford)分析的總蛋白測量,其特點在于對蛋白樣品中可能存在的大多數(shù)鹽,、溶劑,、緩沖液、硫醇,、金屬螯合劑,、還原性物質(zhì)等均不排斥，檢測濃度下限達到 25ug/ml,，最小檢測蛋白量達到0.5μg,，待測樣品體積為1~20ul，在50~1000ug/ml濃度范圍內(nèi)有較好的線性關(guān)系,。

自備材料:

1,、酶標(biāo)儀或分光光度計

2、蒸餾水,、96 孔板或比色杯

具體產(chǎn)品的參數(shù)以收到產(chǎn)品說明書的參數(shù)為準(zhǔn)

操作步驟(僅供參考):

1、 稀釋蛋白標(biāo)準(zhǔn)(一般為 BSA 5mg/ml)使其終濃度為 0.5mg/ml,。注意:蛋白樣品在什么溶液中,，蛋白標(biāo)準(zhǔn)也應(yīng)用什么溶液稀釋，也可以用0.9%NaCl或 PBS稀釋蛋白標(biāo)準(zhǔn)

2,、將標(biāo)準(zhǔn)品按 0,1,2,4,8,12,16,20ul加到 96 孔板的蛋白標(biāo)準(zhǔn)孔中,，加蛋白標(biāo)準(zhǔn)稀釋液補足至 20ul。

3,、加適當(dāng)體積樣品到 96 孔板的樣品孔中,，補加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液至 20m。

4,、各孔加入 200ul考馬斯亮藍 G250染料試劑,，室溫放置3~5min。

5、酶標(biāo)儀測定 595nm 波長處的吸光值,，560~610nm 之間的波長也可,。

6、根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計算出樣品中的蛋白濃度,。

注意事項:

1,、 待測蛋白溶解于什么樣的稀釋液中，蛋白標(biāo)準(zhǔn)也應(yīng)溶解于什么樣的稀釋液中,，否者待測蛋白與蛋白標(biāo)準(zhǔn)中所含非蛋白成分不一致,，有可能導(dǎo)致測定不準(zhǔn)確。

2,、 需可檢測 560~610nm 之間波長的酶標(biāo)儀一臺,，最佳檢測波長為 595nm。

3,、 建議每次測定時都做標(biāo)準(zhǔn)曲線,，因為測定時顏色會隨著時間的延長不斷加深，并且顯色反應(yīng)的速度和溫度有關(guān),，所以除非精確控制顯色反應(yīng)的時間和溫度,，否則如需精確測定應(yīng)每次都做標(biāo)準(zhǔn)曲線。

4,、如果沒有酶標(biāo)儀,，也可以使用普通的分光光度計測定，但測定時應(yīng)考慮根據(jù)比色皿的最小檢測體積;應(yīng)按比例適當(dāng)加大考馬斯亮藍 G250 染料試劑的用量使總體積不小于最小檢測體積,，樣品和標(biāo)準(zhǔn)品的用量亦相應(yīng)按比例放大;使用分光光度計測定蛋白濃度時,，每個試劑盒可以測定的樣品數(shù)量可能會顯著減少。

5,、為了您的安全和健康,，請穿實驗服并戴一次性手套操作。

6,、試劑開封后請盡快使用,，以防影響后續(xù)實驗效果。

有效期:12個月有效,。

考馬斯亮藍G250染料試劑  凝膠染色