BC1518 諾博萊德 磷酸化蛋白提取試劑盒
- 公司名稱 北京諾博萊德科技有限公司
- 品牌 NobleRyder/諾博萊德
- 型號(hào) BC1518
- 產(chǎn)地 北京
- 廠商性質(zhì) 生產(chǎn)廠家
- 更新時(shí)間 2025/3/10 16:03:07
- 訪問(wèn)次數(shù) 34
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供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 50T / 100T |
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貨號(hào) | BC1518 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 化工,生物產(chǎn)業(yè),農(nóng)業(yè),制藥 |
主要用途 | 用于哺乳動(dòng)物組織和細(xì)胞中提取總蛋白 |
諾博萊德 磷酸化蛋白提取試劑盒
NobleRyder BC1518 磷酸化蛋白提取試劑盒
產(chǎn)品貨號(hào):BC1518
產(chǎn)品名稱:磷酸化蛋白提取試劑盒
產(chǎn)品規(guī)格:50T / 100T
產(chǎn)品簡(jiǎn)介:
中文名稱:磷酸化蛋白提取試劑盒
規(guī)格:50T ; 100T
儲(chǔ)存條件:-20℃,,avoid light,at least 1 year
具體產(chǎn)品的參數(shù)以收到產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)的參數(shù)為準(zhǔn)
NobleRyder BC1518 磷酸化蛋白提取試劑盒產(chǎn)品介紹
磷酸化蛋白提取試劑盒用于哺乳動(dòng)物組織和細(xì)胞中提取總蛋白,,試劑盒中的裂解液含有蛋白酶抑制劑和磷酸酶抑制劑,,作用較為強(qiáng)烈,可快速獲得總蛋白,,可用于免疫印跡實(shí)驗(yàn)等基礎(chǔ)研究實(shí)驗(yàn),,由于含有上述的酶抑制劑,不能用于研究蛋白激酶和磷酸激酶的研究,。本品僅用于科研,。
產(chǎn)品組成:
試劑名稱 | 規(guī)格 | 儲(chǔ)存條件 |
裂解液 | 100mL | 2-8℃ |
磷酸酶抑制劑(100×) | 1mL | -20℃ |
蛋白酶抑制劑(100×) | 1mL | |
PMSF(100×) | 1mL |
操作方法:
在 1mL 的冷裂解液中各加入 10µL 的磷酸酶抑制劑、蛋白酶抑制劑和 PMSF,;混勻,,放置在冰上備 用;
1,、組織總蛋白的提取
1) 稱取 0.1g 的新鮮組織,,放置于玻璃勻漿器的入口緩沖處,用眼科剪將組織塊盡可能的剪碎,,然 后加入 0.5-1mL 的新配置的裂解液,,研磨直至沒(méi)有明顯的組織塊,這個(gè)過(guò)程注意冰上操作,;
2) 將組織勻漿液移入 1.5mL 的 EP 管中,,4 ℃ 12000g 離心 30min;
3) 吸取上清至新的管中,;
4) 進(jìn)行蛋白定量或者變性進(jìn)行蛋白實(shí)驗(yàn),。 (提取好的蛋白建議保存于-80℃,即用即取,,避免反復(fù)凍融,,避免長(zhǎng)時(shí)間儲(chǔ)存。)
2,、細(xì)胞總蛋白的提取
1) 裂解液的用量:107個(gè)細(xì)胞需要裂解液 1mL,;
2) 貼壁細(xì)胞:棄去培養(yǎng)基,用冷的 PBS 洗兩次,,棄去 PBS,,然后加入計(jì)算好的細(xì)胞裂解液;在冰上用細(xì)胞刮刀進(jìn)行刮離細(xì)胞,,將刮離的細(xì)胞裂解液移入 EP 管中,顛倒裂解 20-30min,。
3) 懸浮細(xì)胞:4℃ 400g 離心收集細(xì)胞,,用冷的 PBS 洗兩次細(xì)胞,,同樣按細(xì)胞數(shù)加入裂解液,渦旋10s,,放置冰上裂解 10min,,重復(fù) 3-4 次;
4) 裂解完畢之后,,將細(xì)胞裂解液 4 ℃12000g 離心 30min,;
5) 將上清移入新的 EP 管中;進(jìn)行蛋白定量或者變性進(jìn)行蛋白實(shí)驗(yàn),。 (提取好的蛋白建議保存于-80℃,,即用即取,避免反復(fù)凍融,,避免長(zhǎng)時(shí)間儲(chǔ)存,。)
注意事項(xiàng):
1、實(shí)驗(yàn)過(guò)程,,所有試劑都要需要預(yù)冷或者即融,,保證操作過(guò)程中的低溫環(huán)境;2,、PSMF(有毒)現(xiàn)用現(xiàn)加,,因?yàn)镻MSF在水溶液中會(huì)快速降解;
諾博萊德 磷酸化蛋白提取試劑盒