諾博萊德 全蛋白提取試劑盒（強）樣本裂解

NobleRyder BC1598 全蛋白提取試劑盒（強）

產(chǎn)品貨號：BC1598

產(chǎn)品名稱：全蛋白提取試劑盒（強）

產(chǎn)品規(guī)格：50T / 100T

產(chǎn)品簡介：

中文名稱：全蛋白提取試劑盒（強）

規(guī)格：50T ; 100T

儲存條件：-20℃,，avoid light，at least 1 year

具體產(chǎn)品的參數(shù)以收到產(chǎn)品說明書的參數(shù)為準(zhǔn)

NobleRyder BC1598 全蛋白提取試劑盒（強）產(chǎn)品介紹：

全蛋白提取試劑盒（強）用于哺乳動物組織和細(xì)胞中提取總蛋白,，試劑盒中的裂解液含有蛋白酶抑制劑和磷酸酶抑制劑,，作用較為強烈，可快速獲得總蛋白,，可用于免疫印跡實驗等基礎(chǔ)研究實驗,，由于含有上述的酶抑制劑，不能用于研究蛋白激酶和磷酸激酶的研究,。本品僅用于科研,。

產(chǎn)品組成：

操作方法:
1、組織總蛋白的提取
1)在1ml的冷裂解液中各加入10ul的磷酸酶抑制劑,、蛋白酶抑制劑和PMSF,；混勻，放置在冰上備用,；
2)稱取0.1g的新鮮組織,，放置于玻璃勻漿器的入口緩沖處,，用眼科剪將組織塊盡可能的剪碎，然后加入0.5-1ml的新配置的裂解液,，研磨直至沒有明顯的組織塊,，這個過程注意冰上操作；
3)將組織勻漿液移入1.5ml的EP管中,，4 ℃ 12000g離心30min,；
4)吸取上清至新的管中；
5)進行蛋白定量或者變性進行蛋白實驗,。
（提取好的蛋白建議保存于-80 ℃,，即用即取，避免反復(fù)凍融,，避免長時間儲存,。)
2、細(xì)胞總蛋白的提取
1)裂解液的用量：10⁷個細(xì)胞需要裂解液1ml,；
2)貼壁細(xì)胞：棄去培養(yǎng)基,，用冷的PBS洗兩次，棄去PBS,，然后加入計算好的細(xì)胞裂解液,；在冰上用細(xì)胞刮刀進行刮離細(xì)胞，
將刮離的細(xì)胞裂解液移入EP管中,，顛倒裂解20-30min
3)懸浮細(xì)胞：4 ℃ 400g離心收集細(xì)胞,，用冷的PBS洗兩次細(xì)胞，同樣按細(xì)胞數(shù)加入裂解液,，
渦旋10s,，放置冰上裂解10min，重復(fù)3-4次,；
4)裂解完畢之后,，將細(xì)胞裂解液4 ℃ 12000g離心30min；
5)將上清移入新的EP管中,；進行蛋白定量或者變性進行蛋白實驗,。
（提取好的蛋白建議保存于-80 ℃，即用即取,，避免反復(fù)凍融,，避免長時間儲存。)

注意事項：
實驗過程,，所有試劑都要需要預(yù)冷或者即融，保證操作過程中的低溫環(huán)境,；
PSMF（有毒）現(xiàn)用現(xiàn)加,，因為PMSF在水溶液中會快速降解,；

諾博萊德 全蛋白提取試劑盒（強）樣本裂解