YZ-X1088 PK-1人胰腺導管腺癌細胞
- 公司名稱 上海研尊生物科技有限公司
- 品牌 研尊生物
- 型號 YZ-X1088
- 產(chǎn)地
- 廠商性質(zhì) 生產(chǎn)廠家
- 更新時間 2025/4/9 10:53:01
- 訪問次數(shù) 471
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| 供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | T25或1mL凍存管 |
|---|---|---|---|
| 貨號 | YZ-X1088 | 主要用途 | 科研實驗 |
PK-1人胰腺導管腺癌細胞
產(chǎn)品信息
細胞名稱： PK-1人胰腺導管腺癌細胞
種屬來源: 人
性別年齡： 男性
種屬來源: 胰腺
生長特性： 貼壁生長
細胞形態(tài): 不規(guī)則細胞樣
細胞規(guī)格: 1 X 106cells/T25或1 mL凍存管
培養(yǎng)條件: RPMI1640 +10% fetal bovine serum
37 ℃, 5% CO2
凍存條件: 90% FBS + 10% DMSO
傳代方法：1:3傳代, 2-3天傳1代
細胞培養(yǎng)操作
干冰運輸：收到細胞后需立即轉(zhuǎn)入液氮保存、或者-80°C冰箱短期凍存,、或者直接復蘇
常溫運輸：收到細胞后,，請立即將細胞培養(yǎng)瓶從包裝盒中取出，并按照下方操作步驟進行培養(yǎng)傳代
細胞傳代：細胞密度達80% - 90%,，即可進行傳代培養(yǎng)
培養(yǎng)瓶中細胞操作步驟
對于貼壁培養(yǎng)的細胞,，寄送前，我們會將培養(yǎng)基充滿整個培養(yǎng)瓶,，以減少產(chǎn)品運輸過程中貼壁細胞的脫落,。
收到細胞后，請注意觀察是否有污染,。將培養(yǎng)瓶置于倒置顯微鏡下仔細檢查是否渾濁,、是否細菌污染。因為運輸過程中存在顛簸,，且有些細胞對溫度變化也很敏感,，可能存在一些細胞脫落漂浮的情況，這些細胞仍是活細胞,，請勿丟棄,，可離心富集后傳代使用。
對于貼壁細胞,，在生物安全柜環(huán)境中,，用真空泵去除培養(yǎng)瓶中多余的培養(yǎng)基，至剩余5-8mL 左右,，隨后根據(jù)培養(yǎng)基選擇合適的CO2含量的37℃恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng),，擰松瓶蓋。如果細胞已經(jīng)長滿培養(yǎng)瓶，請立即傳代,。
對于懸浮的細胞,，在生物安全柜環(huán)境中，轉(zhuǎn)移培養(yǎng)瓶中的細胞至離心管,，150 g 離心 5 分鐘,，去除上清后，用5 mL培養(yǎng)基吹散細胞,，轉(zhuǎn)移至新的培養(yǎng)瓶中,，隨后置于合適的CO2含量的37℃恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
凍存管細胞操作步驟
注意： 為保證細胞的高活率,，請收到產(chǎn)品后,，立即解凍培養(yǎng)。
將凍存管置于37℃水浴中來回晃動,，迅速解凍,。為避免污染，確保凍存管口置于水面之上,。解凍需迅速,，大約1分鐘。
一旦凍存管中液體融化后,，立即取出,，采用酒精噴拭凍存管表面,。從此步開始,，后續(xù)操作須在生物安全柜中完成。
將凍存管中的液體轉(zhuǎn)移到含有5mL完培養(yǎng)基的離心管中,，150 g 離心 5 分鐘,，用真空泵去除上清。
用全培養(yǎng)基重新懸浮細胞并轉(zhuǎn)移到新的培養(yǎng)瓶中,。為保證細胞復蘇的存活率,，請將培養(yǎng)基在37℃水浴預熱后使用。
將細胞置于含有合適CO2的37℃恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng),。
貼壁細胞傳代培養(yǎng)
吸取并棄掉培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)基,，加入PBS潤洗一次。
加入1 mL 0.25 (w/v) Trypsin-EDTA 溶液,，并置于37℃培養(yǎng)箱中孵育,，直至細胞從壁上脫落分離。此過程大約需要3-5分鐘,。
加入2mL全培養(yǎng)基中和胰蛋白酶,，并輕輕吹打?qū)⒓毎麖呐囵B(yǎng)瓶表面吹落，并使細胞分散。
將細胞懸液收集到15mL離心管里,，150 g 離心 5 分鐘,，用真空泵去除上清。取適量的培養(yǎng)基將細胞重懸,，轉(zhuǎn)移到新的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng),。
懸浮細胞傳代可參考以下方法：
一、直接傳代法
1,、待懸浮細胞長滿至 80%～90%（細胞懸液變黃）,，即可傳代；
2,、用吸管吸棄細胞懸液 1 / 2~1 / 3,；
3、加入適量的新鮮培養(yǎng)基,，繼續(xù)培養(yǎng),。
二、離心傳代法（在發(fā)現(xiàn)有細胞碎片的情況下）
1,、將細胞懸液轉(zhuǎn)移到離心管內(nèi),；
2、150 g 離心 5 min,，棄去上層清液,；
3、使用新鮮的培養(yǎng)基重懸細胞,；
4,、吸管吸取適量細胞懸液，裝入新的培養(yǎng)瓶,，再加入適量的新鮮培養(yǎng)基,，繼續(xù)培養(yǎng)。
細胞凍存操作
1. 1000rpm離心5分鐘去掉上清,。加1 mL血清重懸細胞,，根據(jù)細胞數(shù)量加入血清和DMSO，輕輕混勻,， DMSO終濃度為10%,，細胞密度不低于1 x 106/mL，每支凍存管凍存1mL細胞懸液,，注意凍存管做好標識,。
2. 將凍存管置于程序降溫盒中，放入-80°C冰箱,，至少2個小時以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存,。
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