產(chǎn)品名稱：MDCK犬腎細胞,、MDCK犬腎細胞,、MDCK犬腎細胞、MDCK犬腎細胞,；細胞介紹 該細胞系源自一只雌性英國可卡犬的腎臟組織,，由S.H. Madin and N.B. Darby于1958年建立。該細胞為角蛋白陽性細胞,。 細胞特性 1） 來源：狗腎 2） 形態(tài)：上皮細胞樣,，貼壁生長 3） 含量：>1x106 個/mL 4） 污染：支原體、細菌,、酵母和真菌檢測為陰性 5） 規(guī)格：T25瓶或者1mL凍存管包裝 運輸和保存 可選擇干冰運輸及發(fā)送復蘇存活細胞方式 （1）干冰運輸，收到后立即轉(zhuǎn)入液氮或者-80度冰箱凍存或直接復蘇,； （2）存活細胞,，收到后應繼續(xù)生長，傳代達到細胞生長狀態(tài)良好時,，再進行凍存,。具體操作見細胞培養(yǎng)步驟。 （3）收到細胞后請拍照,，3天內(nèi)如果發(fā)現(xiàn)污染,，請及時拍照與我們聯(lián)系,。 細胞用途 ：僅供科研使用。 細胞接收后的處理 1） 收到細胞后,，請檢查發(fā)貨培養(yǎng)瓶的狀況,，若發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)瓶破損、有液溢出及細胞有污染,，請拍照后及時聯(lián)系我們,。 2） 在顯微鏡下確認細胞生長狀態(tài)時，在低倍鏡（4或5X物鏡)下進行,，能準確判斷細胞的傳代密度,。看細胞的形態(tài)請在10X和20×物鏡下,，同時給剛收到的細胞拍照,，（10×，20×）各2-3張以及培養(yǎng)瓶外觀照片一張留存,，作為細胞需要售后時提供收到細胞時細胞狀態(tài)的依據(jù),。 3） 觀察好細胞狀態(tài)后，75%酒精消毒瓶壁將T25瓶置于37℃培養(yǎng)箱放置約2-3h,。 4） 貼壁細胞：在運輸過程中貼壁細胞會有脫落的現(xiàn)象,，如發(fā)現(xiàn)貼壁細胞有脫落或者脫落后抱團生長，可將T25瓶置于37℃培養(yǎng)箱放置約2-3h,，然后抽出瓶中的培養(yǎng)基和未貼壁細胞1000rpm離心5分鐘,，棄去上清重懸后接種到加有按照說明書細胞培養(yǎng)條件新配制的培養(yǎng)基的原培養(yǎng)瓶中（或新的培養(yǎng)瓶中）。 5） 懸浮細胞：T25瓶置于37℃培養(yǎng)箱放置約2-3h,，然后抽出瓶中的培養(yǎng)基和細胞1000rpm離心5分鐘,，棄去上清重懸后接種到新的培養(yǎng)瓶中（加入按照說明書細胞培養(yǎng)條件新配制的培養(yǎng)基）。 6） 備注：運輸用的培養(yǎng)基（灌液培養(yǎng)基）不能再用來培養(yǎng)細胞,，請換用按照說明書細胞培養(yǎng)條件新配制的培養(yǎng)基來培養(yǎng)細胞,。 收到細胞后次傳代建議1：2傳代 。 細胞培養(yǎng)步驟 一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備 1） 準備MEM培養(yǎng)基,；優(yōu)質(zhì)胎牛血清,，10%；雙抗,，1%,。 2） 培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%,；二氧化碳,，5%。 溫度：37攝氏度,，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%,。 3） 凍存液：90%血清,，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配,。 二． 細胞處理 1） 復蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,，棄去上清液,，補加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜（或?qū)⒓毎麘乙杭尤?50px皿中,，加入約8ml培養(yǎng)基,，培養(yǎng)過夜）。第二天換液并檢查細胞密度,。 2） 細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%,，即可進行傳代培養(yǎng)。 對于貼壁細胞,，傳代可參考以下方法 1. 棄去培養(yǎng)上清,，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次,。 2. 加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中,，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,，若細胞大部分變圓并脫落,，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化,。 3. 按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘,，棄去上清液,，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。 4. 將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,。 注：次傳代推薦傳代比例為1:2,，以后傳代比例可根據(jù)客戶需要自己決定。 3）細胞凍存：待細胞生長狀態(tài)良好時,，可進行細胞凍存,。 下面T25瓶為類 1，細胞凍存時,，棄去培養(yǎng)基后，PBS清洗一遍后加入1ml,，細胞變圓脫落后,，加入1ml含血清的培養(yǎng)基終止消化,，可使用血球計數(shù)板計數(shù)。 2,，4min 1000rpm 離心去掉上清,。加1ml血清重懸細胞，根據(jù)細胞數(shù)量加入血清和DMSO,，輕輕混勻,，DMSO終濃度為10%，細胞密度不低于1x106/ml,，每支凍存管凍存1ml細胞懸液,，注意凍存管做好標識。 3,，將凍存管置于程序降溫盒中,，放入-80度冰箱，至少2個小時以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存,。記錄凍存管位置以便下次拿取,。


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抗體：兔多抗、鼠單抗種類豐富,，一抗 1 萬余種,，二抗 100 多種；
重組蛋白：多項發(fā)明,，原核表達系統(tǒng)穩(wěn)定表達蛋白 1000 余種,。


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