產(chǎn)品名稱：NCI-H661人大細胞肺癌細胞,、NCI-H661人大細胞肺癌細胞、NCI-H661人大細胞肺癌細胞,、NCI-H661人大細胞肺癌細胞細胞介紹 該細胞1982年建系,，源自一位患有大細胞肺癌的男性的胸腔積液。該細胞角蛋白,、波形蛋白陽性,。 細胞特性 1） 來源：肺癌 2） 形態(tài)：上皮細胞樣，貼壁生長 3） 含量：>1x106 個/mL 4） 污染：支原體,、細菌,、酵母和真菌檢測為陰性 5） 規(guī)格：T25瓶或者1mL凍存管包裝 運輸和保存 可選擇干冰運輸及發(fā)送復蘇存活細胞方式： （1）干冰運輸，收到后立即轉入液氮或者-80度冰箱凍存或直接復蘇,； （2）存活細胞,，收到后應繼續(xù)生長，傳代達到細胞生長狀態(tài)良好時,，再進行凍存,。具體操作見細胞培養(yǎng)步驟。 （3） 收到細胞后請拍照,，3天內(nèi)如果發(fā)現(xiàn)污染,，請及時拍照與我們聯(lián)系。 細胞用途： 僅供科研使用,。 細胞接受后的處理： 1） 收到細胞后,，請檢查是否漏液，如果漏液,，請拍照片發(fā)給我們,。 2） 請先在顯微鏡下確認細胞生長狀態(tài)，去掉封口膜并將T25瓶置于37℃培養(yǎng)約2-3h,。 3） 棄去T25瓶中的培養(yǎng)基,，添加6ml新的培養(yǎng)基。 4） 如果細胞長滿（90%以上）請及時進行細胞傳代,。 5） 接到細胞次日,，請檢查細胞是否污染,，若發(fā)現(xiàn)污染或疑似污染，請及時與我們?nèi)〉寐?lián)系,。 細胞培養(yǎng)步驟 一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備： 1） 準備RPMI-1640培養(yǎng)基,；優(yōu)質胎牛血清，10%,；雙抗,，1%。 2） 培養(yǎng)條件： 氣相：空氣,，95%,；二氧化碳，5%,。 溫度：37攝氏度,，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。 3） 凍存液：90%血清,，10%DMSO,，現(xiàn)用現(xiàn)配,。 二． 細胞處理： 1） 復蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,，棄去上清液,，補加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜（或將細胞懸液加入250px皿中,，加入約8ml培養(yǎng)基,，培養(yǎng)過夜）。第二天換液并檢查細胞密度,。 2） 細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%,，即可進行傳代培養(yǎng)。 對于貼壁細胞,，傳代可參考以下方法： 1. 棄去培養(yǎng)上清,，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次,。 2. 加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中,，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,，若細胞大部分變圓并脫落,，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化,。 3. 按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,，輕輕打勻后吸出,，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液,，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,。 4. 將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。 注：次傳代推薦傳代比例為1:2,，以后傳代比例可根據(jù)客戶需要自己決定,。 3）細胞凍存：待細胞生長狀態(tài)良好時，可進行細胞凍存,。 下面T25瓶為類,； 1，細胞凍存時,，棄去培養(yǎng)基后,，PBS清洗一遍后加入1ml，細胞變圓脫落后,，加入1ml含血清的培養(yǎng)基終止消化,，可使用血球計數(shù)板計數(shù)。 2,，4min 1000rpm 離心去掉上清,。加1ml血清重懸細胞，根據(jù)細胞數(shù)量加入血清和DMSO,，輕輕混勻,，DMSO終濃度為10%，細胞密度不低于1x106/ml,，每支凍存管凍存1ml細胞懸液,，注意凍存管做好標識。 3,，將凍存管置于程序降溫盒中,，放入-80度冰箱，至少2個小時以后轉入液氮灌儲存,。記錄凍存管位置以便下次拿取,。


南京萬木春生物科技有限公司（Najing Wanmuchun Biotechnology Co., Ltd)面向國內(nèi)外市場專業(yè)研發(fā)、生產(chǎn)和銷售細胞,、 外泌體,、ELISA 試劑盒、 抗體,、重組蛋白及相關試劑,。產(chǎn)品在免疫學、信號轉導、代謝,、 神經(jīng)科學等領域內(nèi)都有科學文獻發(fā)表,，被國內(nèi)外多所大學、研究機構和藥學平臺使用并發(fā)表文獻多達1000多次,。我公司憑借優(yōu)異的產(chǎn)品和完善的服務 體系現(xiàn)已受到廣大國內(nèi)外用戶的青睞和認可,。
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抗體：兔多抗、鼠單抗種類豐富,，一抗 1 萬余種,，二抗 100 多種；
重組蛋白：多項發(fā)明,，原核表達系統(tǒng)穩(wěn)定表達蛋白 1000 余種,。


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