常溫細胞收貨當天處理方式
1.收到常溫細胞后,，及時拍照記錄有無漏液/瓶身破損現(xiàn)象,。
2.鏡下觀察有無微生物污染現(xiàn)象，拍照記錄不同倍數(shù)鏡下細胞狀態(tài)和有無染菌現(xiàn)象,，方便后續(xù)售后處理,。
3.用 75%酒精擦拭瓶身，置于培養(yǎng)箱中靜置培養(yǎng) 2~4h 后進行傳代操作,。
4.觀察細胞密度若超過 80%則可正常傳代處理(有的原代細胞不可傳代,，請根據(jù)實際情況決定),，傳代推薦比例 1：2 到 1：3（按實際收貨細胞密度決定，若不確定可聯(lián)系技術支持）,；若細胞密度不到 80%則可取出部分培養(yǎng)基留 6ml 左右原瓶培養(yǎng) 基繼續(xù)培養(yǎng),，注意擰松瓶蓋或更換透氣瓶蓋；懸浮細胞注意離心所有培養(yǎng)基以收集細胞,。
5.由于氣溫,，運輸?shù)扔绊懺斐少N壁細胞漂浮的，請將細胞離心收集后在離心管中消化后進行傳代（參考附件）,，或及時聯(lián)系技術支持進行指導傳代,。
6.若觀察到異常或者對細胞有疑問,，請及時跟代理商或者我們聯(lián)系,；對于細胞培養(yǎng)操 作及培養(yǎng)注意事項有疑問的，可跟我們的技術支持交流,。
附:收到貼壁細胞漂浮處理方法（部分細胞由于貼壁松散,，會出現(xiàn)運輸后漂浮，冬天氣溫低時也會出現(xiàn)細胞收縮漂浮,，屬于不可避免因素,，正確處理后都可以正常生長）
1、將培養(yǎng)瓶內所有培養(yǎng)基轉入無菌離心管,，離心收集細胞（1200rpm 3min）去除 舊培養(yǎng)基,；
2、用 PBS 重懸細胞,，將所有細胞收集到一個離心管中,，再次離心（1200rpm 3min）去除 PBS；
3,、加入 1ml 左右 0.25%重懸細胞,，混勻即可，不能吹打太多次,，放入培養(yǎng)箱消化細胞,，根據(jù)細胞特性決定消化時間（TM3、TM4,、293 系列約 1~2 分 鐘）；
4,、消化好后,，用移液槍輕輕吹打細胞懸液，使細胞團分散,，迅速加入 3-5ml 含 血清的培 養(yǎng)基混勻以終止消化,，離心（1200rpm 3min）去除,；
5、加入 5ml 左右的細胞相應的培養(yǎng)基混勻,，按比例接入無菌培養(yǎng)瓶/皿中,；
6、顯微鏡下觀察看細胞是否成均勻分散的單顆細胞,，若有 3-5 個成團的小細胞團可不用重新消化,，使之貼壁后待細胞生長穩(wěn)定后再消散細胞。
貼壁細胞傳代
1. 從培養(yǎng)容器中吸出用過的細胞培養(yǎng)基并丟棄,；
2. 用不含鈣,、鎂的沖洗細胞（每10cm 2培養(yǎng)表面積約2mL溶液）；從與貼壁細胞層相對的容器一側輕輕加入沖洗液,，以避免攪動細胞層,，前后搖晃容器數(shù)次（注：沖洗步驟可去除可能抑制解離劑作用的少量
血清、鈣和鎂）,；
3. 從培養(yǎng)容器中吸出沖洗液并丟棄,，向培養(yǎng)瓶中加入預熱的解離劑；試劑量應足以覆蓋細胞層(每10cm 2大約0.5mL),；
4. 輕輕搖晃容器,，使試劑覆蓋細胞層；吸出多余解離試劑,，T25 細胞培養(yǎng)瓶留 200ul 左右即可,；
5. 將培養(yǎng)容器在室溫下孵育約 2分鐘（請注意實際孵育時間根據(jù)所用細胞不同而有所差異）；
6. 在顯微鏡下觀察細胞解離情況,；如果解離程度未達 90%,，可將孵育時間 延長幾分鐘，每 30 秒鐘檢查一次解離情況,；也可輕輕拍打培養(yǎng)容器以加快細胞解離,；
7. 細胞解離程度大于等于 90%時，傾斜培養(yǎng)容器,，使細胞上液體盡快流盡,；加入所用解離劑兩倍體積的預熱生長培養(yǎng)基；吹打細胞層表面數(shù)次,，使培養(yǎng)基分散,；
8. 將細胞轉移到15mL 無菌離心管中，以 200×g 的離心力離心 3-5 分鐘 （請注意離心速度和時間依細胞種類不同而有所差異）,；
9. 用最少體積的預熱生長培養(yǎng)基重新懸浮細胞沉淀,，將細胞懸液按照 推薦比例稀釋，并將適量體積的細胞懸液轉移到新的細胞培養(yǎng)容器中，把細胞放回培養(yǎng)箱（注：如果使用培養(yǎng)瓶,，將其放入培養(yǎng)箱前應將瓶蓋旋松,，以便進行充分的氣體交換，除非您使用的是通氣式培養(yǎng)瓶和透氣性瓶蓋）,。
南京萬木春生物科技有限公司（Najing Wanmuchun Biotechnology Co., Ltd)面向國內外市場專業(yè)研發(fā),、生產和銷售細胞、 外泌體,、ELISA 試劑盒,、 抗體、重組蛋白及相關試劑,。產品在免疫學,、信號轉導、代謝,、 神經科學等領域內都有科學文獻發(fā)表,，被國內外多所大學、研究機構和藥學平臺使用并發(fā)表文獻多達1000多次,。我公司憑借優(yōu)異的產品和完善的服務 體系現(xiàn)已受到廣大國內外用戶的青睞和認可,。
采購中心
化工儀器網(wǎng)