產(chǎn)品名稱：COLO320 HSR人結(jié)直腸腺癌細(xì)胞,、COLO320 HSR人結(jié)直腸腺癌細(xì)胞,、COLO320 HSR人結(jié)直腸腺癌細(xì)胞、COLO320 HSR人結(jié)直腸腺癌細(xì)胞細(xì)胞特性 1） 來(lái)源：人結(jié)腸癌 2） 形態(tài)：貼壁生長(zhǎng),，貼不牢,、成團(tuán) 3） 含量：>1x106 個(gè)/mL 4） 污染：支原體、細(xì)菌,、酵母和真菌檢測(cè)為陰性 5） 規(guī)格：T25瓶或者1mL凍存管包裝 運(yùn)輸和保存 可選擇干冰運(yùn)輸及發(fā)送復(fù)蘇存活細(xì)胞方式 （1）干冰運(yùn)輸,，收到后立即轉(zhuǎn)入液氮或者-80度冰箱凍存或直接復(fù)蘇； （2）存活細(xì)胞,，收到后應(yīng)繼續(xù)生長(zhǎng),，傳代達(dá)到細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí)，再進(jìn)行凍存,。具體操作見(jiàn)細(xì)胞培養(yǎng)步驟,。 （3）收到細(xì)胞后請(qǐng)拍照，3天內(nèi)如果發(fā)現(xiàn)污染,，請(qǐng)及時(shí)拍照與我們聯(lián)系,。 細(xì)胞用途： 僅供科研使用。 細(xì)胞接收后的處理： 1） 收到細(xì)胞后,，請(qǐng)檢查發(fā)貨培養(yǎng)瓶的狀況,，若發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)瓶破損,、有液溢出及細(xì)胞有污染，請(qǐng)拍照后及時(shí)聯(lián)系我們,。 2） 在顯微鏡下確認(rèn)細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)時(shí),，在低倍鏡（4或5X物鏡)下進(jìn)行，能準(zhǔn)確判斷細(xì)胞的傳代密度,?？醇?xì)胞的形態(tài)請(qǐng)?jiān)?0X和20×物鏡下，同時(shí)給剛收到的細(xì)胞拍照,，（10×,，20×）各2-3張以及培養(yǎng)瓶外觀照片一張留存，作為細(xì)胞需要售后時(shí)提供收到細(xì)胞時(shí)細(xì)胞狀態(tài)的依據(jù),。 3） 觀察好細(xì)胞狀態(tài)后,，75%酒精消毒瓶壁將T25瓶置于37℃培養(yǎng)箱放置約2-3h。 4） 貼壁細(xì)胞：在運(yùn)輸過(guò)程中貼壁細(xì)胞會(huì)有脫落的現(xiàn)象,，如發(fā)現(xiàn)貼壁細(xì)胞有脫落或者脫落后抱團(tuán)生長(zhǎng),，可將T25瓶置于37℃培養(yǎng)箱放置約2-3h，然后抽出瓶中的培養(yǎng)基和未貼壁細(xì)胞1000rpm離心5分鐘,，棄去上清重懸后接種到加有按照說(shuō)明書(shū)細(xì)胞培養(yǎng)條件新配制的培養(yǎng)基的原培養(yǎng)瓶中（或新的培養(yǎng)瓶中）,。 5） 懸浮細(xì)胞：T25瓶置于37℃培養(yǎng)箱放置約2-3h，然后抽出瓶中的培養(yǎng)基和細(xì)胞1000rpm離心5分鐘,，棄去上清重懸后接種到新的培養(yǎng)瓶中（加入按照說(shuō)明書(shū)細(xì)胞培養(yǎng)條件新配制的培養(yǎng)基）,。 6） 備注：運(yùn)輸用的培養(yǎng)基（灌液培養(yǎng)基）不能再用來(lái)培養(yǎng)細(xì)胞，請(qǐng)換用按照說(shuō)明書(shū)細(xì)胞培養(yǎng)條件新配制的培養(yǎng)基來(lái)培養(yǎng)細(xì)胞,。 收到細(xì)胞后次傳代建議1：2傳代 ,。 細(xì)胞培養(yǎng)步驟 一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備： 1） 準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基；優(yōu)質(zhì)胎牛血清,，10%,；雙抗1%。細(xì)胞生長(zhǎng)貼壁不牢,、會(huì)出現(xiàn)成團(tuán)現(xiàn)象,。 2） 培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%,；二氧化碳,，5%。 溫度：37攝氏度,，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%,。 3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配,。 二． 細(xì)胞處理： 1） 復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻,。在1000RPM條件下離心4分鐘,，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻,。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜（或?qū)⒓?xì)胞懸液加入250px皿中,，加入約8ml培養(yǎng)基，培養(yǎng)過(guò)夜）,。第二天換液并檢查細(xì)胞密度,。 2） 細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng),。 對(duì)于貼壁細(xì)胞,，傳代可參考以下方法： 1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣,、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次,。 2. 加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺(tái),，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化,。 3. 按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出,，在1000RPM條件下離心4分鐘,，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,。 4. 收到細(xì)胞后傳代推薦將細(xì)胞懸液按1：2的比例分到新的含6ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,，建議凍存一支備用，后續(xù)傳代根據(jù)實(shí)際情況按1:2到1:5的比例進(jìn)行,。 細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí),，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。 下面T25瓶為例,； 1．細(xì)胞凍存時(shí),，棄去培養(yǎng)基后，PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,，細(xì)胞變圓脫落后,，加入2ml培養(yǎng)基終止消化，可使用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)。 2．1000RPM離心5分鐘去掉上清,。用血清重懸浮,，加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻,，按每1ml的數(shù)量分配到凍存管中,，注意凍存管做好標(biāo)識(shí)。本公司按每個(gè)凍存管細(xì)胞數(shù)目大于1X106個(gè)細(xì)胞凍存,。 3．將凍存管置于程序降溫盒中,，放入-80度冰箱，至少2個(gè)小時(shí)以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲(chǔ)存,。記錄凍存管位置以便下次拿取,。


南京萬(wàn)木春生物科技有限公司（Najing Wanmuchun Biotechnology Co., Ltd)面向國(guó)內(nèi)外市場(chǎng)專業(yè)研發(fā)、生產(chǎn)和銷售細(xì)胞,、 外泌體,、ELISA 試劑盒、 抗體,、重組蛋白及相關(guān)試劑,。產(chǎn)品在免疫學(xué)、信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo),、代謝,、 神經(jīng)科學(xué)等領(lǐng)域內(nèi)都有科學(xué)文獻(xiàn)發(fā)表，被國(guó)內(nèi)外多所大學(xué),、研究機(jī)構(gòu)和藥學(xué)平臺(tái)使用并發(fā)表文獻(xiàn)多達(dá)1000多次,。我公司憑借優(yōu)異的產(chǎn)品和完善的服務(wù) 體系現(xiàn)已受到廣大國(guó)內(nèi)外用戶的青睞和認(rèn)可。
品牌優(yōu)勢(shì)
1,、產(chǎn)品優(yōu)勢(shì)：產(chǎn)品具有高特異性,、回收率高、線性好,、變異系數(shù)低,、穩(wěn)定性好；
2,、質(zhì)量保證：產(chǎn)品質(zhì)量穩(wěn)定,，每批次產(chǎn)品必須通過(guò) QA、QC 檢測(cè)才可出庫(kù),；
3,、實(shí)力強(qiáng)大： 標(biāo)準(zhǔn)實(shí)驗(yàn)室、研發(fā)中心,，動(dòng)物房 ,；
4,、技術(shù)支持：技術(shù)部 5*8 小時(shí)技術(shù)問(wèn)題及時(shí)解答；
5,、服務(wù)周到：發(fā)貨及時(shí),，三個(gè)工作日順豐快遞；售后無(wú)憂,，包退包換,。
6、研發(fā),、生產(chǎn)科研產(chǎn)品：ELISA 試劑盒：人,、大小鼠、牛,、兔、山羊,、倉(cāng)鼠,、豬、馬,、雞,、犬、豚鼠,、猴,、綿羊等多種屬1000多種指標(biāo)；
抗體：兔多抗,、鼠單抗種類豐富,，一抗 1 萬(wàn)余種，二抗 100 多種,；
重組蛋白：多項(xiàng)發(fā)明,，原核表達(dá)系統(tǒng)穩(wěn)定表達(dá)蛋白 1000 余種。


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