產(chǎn)品名稱：SV-HUC-1人膀胱上皮永生化細胞,、SV-HUC-1人膀胱上皮永生化細胞,、SV-HUC-1人膀胱上皮永生化細胞、SV-HUC-1人膀胱上皮永生化細胞細胞介紹 這株細胞是正常輸尿管組織用SV40病毒轉(zhuǎn)染建株的,。 反復(fù)用非洲綠猴腎細胞平板測試檢測傳染性SV40的生成,，結(jié)果都呈陰性。 細胞特性 1） 來源：膀胱 2） 形態(tài)：上皮細胞 3） 含量：>1x106 4） 污染：支原體,、細菌,、酵母和真菌檢測為陰性 5） 規(guī)格：T25瓶或者1mL凍存管包裝 運輸和保存 可選擇干冰運輸及發(fā)送復(fù)蘇存活細胞方式 （1）干冰運輸，收到后立即轉(zhuǎn)入液氮或者-80度冰箱凍存或直接復(fù)蘇,； （2）存活細胞,，收到后應(yīng)繼續(xù)生長，傳代達到細胞生長狀態(tài)良好時,，再進行凍存,。具體操作見細胞培養(yǎng)步驟。 （3）收到細胞后請拍照,，3天內(nèi)如果發(fā)現(xiàn)污染,，請及時拍照與我們聯(lián)系。 細胞用途： 僅供科研使用,。 細胞接收后的處理： 1） 收到細胞后,，請檢查發(fā)貨培養(yǎng)瓶的狀況，若發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)瓶破損,、有液溢出及細胞有污染,，請拍照后及時聯(lián)系我們。 2） 在顯微鏡下確認細胞生長狀態(tài)時,，在低倍鏡（4或5X物鏡)下進行,，能準確判斷細胞的傳代密度?？醇毎男螒B(tài)請在10X和20×物鏡下,，同時給剛收到的細胞拍照,，（10×，20×）各2-3張以及培養(yǎng)瓶外觀照片一張留存,，作為細胞需要售后時提供收到細胞時細胞狀態(tài)的依據(jù),。 3） 觀察好細胞狀態(tài)后，75%酒精消毒瓶壁將T25瓶置于37℃培養(yǎng)箱放置約2-3h,。 4） 貼壁細胞：在運輸過程中貼壁細胞會有脫落的現(xiàn)象,，如發(fā)現(xiàn)貼壁細胞有脫落或者脫落后抱團生長，可將T25瓶置于37℃培養(yǎng)箱放置約2-3h,，然后抽出瓶中的培養(yǎng)基和未貼壁細胞1000rpm離心5分鐘,，棄去上清重懸后接種到加有按照說明書細胞培養(yǎng)條件新配制的培養(yǎng)基的原培養(yǎng)瓶中（或新的培養(yǎng)瓶中）。 5） 懸浮細胞：T25瓶置于37℃培養(yǎng)箱放置約2-3h,，然后抽出瓶中的培養(yǎng)基和細胞1000rpm離心5分鐘，棄去上清重懸后接種到新的培養(yǎng)瓶中（加入按照說明書細胞培養(yǎng)條件新配制的培養(yǎng)基）,。 6） 備注：運輸用的培養(yǎng)基（灌液培養(yǎng)基）不能再用來培養(yǎng)細胞,，請換用按照說明書細胞培養(yǎng)條件新配制的培養(yǎng)基來培養(yǎng)細胞。 收到細胞后次傳代建議1：2傳代 ,。 細胞培養(yǎng)步驟 一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備： 1） 準備F-12K培養(yǎng)基,；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%,；雙抗,，1%。 2） 培養(yǎng)條件： 氣相：空氣,，95%,；二氧化碳，5%,。 溫度：37攝氏度,，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。 3） 凍存液：90%血清,，10%DMSO,，現(xiàn)用現(xiàn)配。 二． 細胞處理： 1） 復(fù)蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻,。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液,，補加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻,。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜（或?qū)⒓毎麘乙杭尤?50px皿中，加入約8ml培養(yǎng)基,，培養(yǎng)過夜）,。第二天換液并檢查細胞密度,。 2） 細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng),。 對于貼壁細胞,，傳代可參考以下方法： 1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣,、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次,。 2. 加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺,，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化,。 3. 按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出,，在1000RPM條件下離心4分鐘,，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,。 4. 將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,。 注：次傳代推薦傳代比例為1:2，以后傳代比例可根據(jù)客戶需要自己決定,。 3） 細胞凍存：待細胞生長狀態(tài)良好時,，可進行細胞凍存。 下面T25瓶為例,； 1．細胞凍存時,，棄去培養(yǎng)基后，PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,，細胞變圓脫落后,，加入2ml培養(yǎng)基終止消化，可使用血球計數(shù)板計數(shù),。 2．1000RPM離心5分鐘去掉上清,。用血清重懸浮，加DMSO至最終濃度為10%,。加入DMSO后迅速混勻,，按每1ml的數(shù)量分配到凍存管中，注意凍存管做好標識,。本公司按每個凍存管細胞數(shù)目大于1X106個細胞凍存,。 3．將凍存管置于程序降溫盒中，放入-80度冰箱,，至少2個小時以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存,。記錄凍存管位置以便下次拿取,。


南京萬木春生物科技有限公司（Najing Wanmuchun Biotechnology Co., Ltd)面向國內(nèi)外市場專業(yè)研發(fā)、生產(chǎn)和銷售細胞,、 外泌體,、ELISA 試劑盒、 抗體,、重組蛋白及相關(guān)試劑,。產(chǎn)品在免疫學、信號轉(zhuǎn)導(dǎo),、代謝,、 神經(jīng)科學等領(lǐng)域內(nèi)都有科學文獻發(fā)表，被國內(nèi)外多所大學,、研究機構(gòu)和藥學平臺使用并發(fā)表文獻多達1000多次,。我公司憑借優(yōu)異的產(chǎn)品和完善的服務(wù) 體系現(xiàn)已受到廣大國內(nèi)外用戶的青睞和認可。
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1,、產(chǎn)品優(yōu)勢：產(chǎn)品具有高特異性,、回收率高、線性好,、變異系數(shù)低、穩(wěn)定性好,；
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抗體：兔多抗,、鼠單抗種類豐富,，一抗 1 萬余種，二抗 100 多種,；
重組蛋白：多項發(fā)明,，原核表達系統(tǒng)穩(wěn)定表達蛋白 1000 余種。


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