產(chǎn)品名稱：NCTC clone 1469小鼠肝上皮細(xì)胞,、NCTC clone 1469小鼠肝上皮細(xì)胞、NCTC clone 1469小鼠肝上皮細(xì)胞,、NCTC clone 1469小鼠肝上皮細(xì)胞,；細(xì)胞介紹 1952年建系，源于正常C3H/An小鼠的肝臟組織,，表達(dá)H-2K抗原,鼠痘病毒陰性,。 細(xì)胞特性 1） 來源：小鼠的肝組織 2） 形態(tài)：上皮細(xì)胞樣，貼壁生長 3） 含量：>1x106 個(gè)/mL 4） 污染：支原體,、細(xì)菌,、酵母和真菌檢測為陰性 5） 規(guī)格：T25瓶或者1mL凍存管包裝 運(yùn)輸和保存 可選擇干冰運(yùn)輸及發(fā)送復(fù)蘇存活細(xì)胞方式： （1）干冰運(yùn)輸，收到后立即轉(zhuǎn)入液氮凍存或直接復(fù)蘇,； （2）存活細(xì)胞,，收到后應(yīng)繼續(xù)生長，傳代達(dá)到細(xì)胞生長狀態(tài)良好時(shí),，再進(jìn)行凍存,。具體操作見細(xì)胞培養(yǎng)步驟。 （3） 收到細(xì)胞后請拍照,，3天內(nèi)如果發(fā)現(xiàn)污染,，請及時(shí)拍照與我們聯(lián)系。 細(xì)胞用途： 僅供科研使用,。 細(xì)胞接受后的處理： 1） 收到細(xì)胞后,，請檢查是否漏液，如果漏液,，請拍照片發(fā)給我們,。 2） 請先在顯微鏡下確認(rèn)細(xì)胞生長狀態(tài)，去掉封口膜并將T25瓶置于37℃培養(yǎng)約2-3h,。 3） 棄去T25瓶中的培養(yǎng)基,，添加6ml新的培養(yǎng)基。 4） 如果細(xì)胞長滿（90%以上）請及時(shí)進(jìn)行細(xì)胞傳代,。 5） 接到細(xì)胞次日,，請檢查細(xì)胞是否污染，若發(fā)現(xiàn)污染或疑似污染,，請及時(shí)與我們?nèi)〉寐?lián)系,。 細(xì)胞培養(yǎng)步驟 一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備： 1） 準(zhǔn)備DMEM培養(yǎng)基；馬血清,，10%,；雙抗,，1%。 2） 培養(yǎng)條件： 氣相：空氣,，95%,；二氧化碳，5%,。 溫度：37攝氏度,，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。 3） 凍存液：90%血清,，10%DMSO,，現(xiàn)用現(xiàn)配。 二． 細(xì)胞處理： 1） 復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻,。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液,，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻,。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜（或?qū)⒓?xì)胞懸液加入250px皿中，加入約8ml培養(yǎng)基,，培養(yǎng)過夜）,。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。 2） 細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng),。 對于貼壁細(xì)胞，傳代可參考以下方法： 1. 棄去培養(yǎng)上清,，用不含鈣,、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。 2. 加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中,，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落,，迅速拿回操作臺,，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。 3. 按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基,，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘,，棄去上清液,，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。 4. 將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,。 注：次傳代推薦傳代比例為1:2,，以后傳代比例可根據(jù)客戶需要自己決定。 3）細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時(shí)，可進(jìn)行細(xì)胞凍存,。 下面T25瓶為類,； 1，細(xì)胞凍存時(shí),，棄去培養(yǎng)基后,，PBS清洗一遍后加入1ml，細(xì)胞變圓脫落后,，加入1ml含血清的培養(yǎng)基終止消化,，可使用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)。 2,，4min 1000rpm 離心去掉上清,。加1ml血清重懸細(xì)胞，根據(jù)細(xì)胞數(shù)量加入血清和DMSO,，輕輕混勻,，DMSO終濃度為10%，細(xì)胞密度不低于1x106/ml,，每支凍存管凍存1ml細(xì)胞懸液,，注意凍存管做好標(biāo)識。 3,，將凍存管置于程序降溫盒中,，放入-80度冰箱，至少2個(gè)小時(shí)以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存,。記錄凍存管位置以便下次拿取,。


南京萬木春生物科技有限公司（Najing Wanmuchun Biotechnology Co., Ltd)面向國內(nèi)外市場專業(yè)研發(fā)、生產(chǎn)和銷售細(xì)胞,、 外泌體,、ELISA 試劑盒、 抗體,、重組蛋白及相關(guān)試劑,。產(chǎn)品在免疫學(xué)、信號轉(zhuǎn)導(dǎo),、代謝,、 神經(jīng)科學(xué)等領(lǐng)域內(nèi)都有科學(xué)文獻(xiàn)發(fā)表，被國內(nèi)外多所大學(xué),、研究機(jī)構(gòu)和藥學(xué)平臺使用并發(fā)表文獻(xiàn)多達(dá)1000多次,。我公司憑借優(yōu)異的產(chǎn)品和完善的服務(wù) 體系現(xiàn)已受到廣大國內(nèi)外用戶的青睞和認(rèn)可。
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1,、產(chǎn)品優(yōu)勢：產(chǎn)品具有高特異性,、回收率高,、線性好、變異系數(shù)低,、穩(wěn)定性好,；
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抗體：兔多抗、鼠單抗種類豐富,，一抗 1 萬余種,，二抗 100 多種；
重組蛋白：多項(xiàng)發(fā)明,，原核表達(dá)系統(tǒng)穩(wěn)定表達(dá)蛋白 1000 余種,。


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