安捷倫 Seahorse XF Pro 細(xì)胞能量代謝分析儀以 96 孔規(guī)格測量并報告活細(xì)胞的耗氧率 (OCR)、質(zhì)子釋放率 (PER) 或細(xì)胞外酸化率 (ECAR) 以及 ATP 產(chǎn)生速率,。該分析儀在低速率下具有出眾的 OCR 精度,，具備經(jīng)驗證的儀器性能、優(yōu)化的溫度控制,，并且兼容自動化,。

OCR、PER 和 ATP 產(chǎn)生速率是能量代謝的關(guān)鍵測量,，也是線粒體健康,、毒性、糖酵解和總體細(xì)胞功能/功能障礙的重要指標(biāo),。綜合這些檢測結(jié)果可在系統(tǒng)水平表征培養(yǎng)細(xì)胞和體外樣品的細(xì)胞代謝功能,。

Seahorse XF Pro 細(xì)胞能量代謝分析儀也配備先進(jìn)的軟件、標(biāo)準(zhǔn)化工作流程和安捷倫 Seahorse Analytics 軟件提供的高級數(shù)據(jù)分析功能,。這些功能極大地簡化了從檢測設(shè)計到數(shù)據(jù) QC 和解讀的整個 XF 檢測過程,。

特性

1、96 孔規(guī)格的細(xì)胞能量代謝活細(xì)胞實時分析平臺

2,、每個檢測孔報告多個參數(shù),，包括 OCR、PER 或 ECAR 以及 ATP 產(chǎn)生速率

3,、在低速率下具有出色的 OCR 精度,，提高檢測靜息細(xì)胞類型（如初始 T 細(xì)胞）時的可信度

4、高靈敏度 — 可分析定制 96 孔板中每孔僅 5,000 個細(xì)胞

5,、兼容 XF Pro M 板,，減少邊緣效應(yīng)

6,、具有自動混合功能的四加藥口系統(tǒng)，能評估細(xì)胞對底物,、抑制劑及其他化合物的即時反應(yīng)

7,、經(jīng)驗證的儀器性能，確保板內(nèi)和板間數(shù)據(jù)一致性

8,、4 至 30 °C 的寬工作環(huán)境溫度,，使該分析儀可維持 16 至 42 °C 的內(nèi)部檢測溫度

9、先進(jìn)的 Pro Controller 軟件,，具有用戶引導(dǎo)界面,，可方便地創(chuàng)建檢測方案

10、在 Wave Pro 軟件中查看數(shù)據(jù)質(zhì)量,，自動標(biāo)記異常值

性能指標(biāo)

工作原理

實時監(jiān)測微孔板中的活細(xì)胞生物能量代謝

線粒體呼吸和糖酵解這兩個主要的能量產(chǎn)生途徑,，分別涉及細(xì)胞耗氧量和質(zhì)子釋放率。Seahorse XF 技術(shù)使用無標(biāo)記傳感器檢測這些分析物中的細(xì)胞外變化,，以測定細(xì)胞呼吸率,、糖酵解和 ATP 產(chǎn)生。將細(xì)胞接種于定制 96 孔 XF 微孔板的分析孔中,，融合率為 50%–90%,。懸浮細(xì)胞附著在孔底，實現(xiàn)高度靈敏,。

形成微室,，并計算每分鐘細(xì)胞外流量速率

儀器將探針板降低至分析孔中。傳感器位于孔底上方 200 µm 處,，形成約 2 µL 的瞬時微室,。隨著氧氣和 pH 水平的變化，儀器可讀取傳感器中的相應(yīng)變化,。通常進(jìn)行 3 分鐘測量,，然后自動計算速率。測量期結(jié)束后,，升高探針,，使細(xì)胞外培養(yǎng)基恢復(fù)到基線條件。

最多注入 4 種化合物,，實時測試響應(yīng)或研究生物學(xué)機理

探針板還配置有加藥口（每孔 4 個）,，可在分析過程中將調(diào)節(jié)因子注入細(xì)胞孔中。當(dāng)完成儀器方案配置后,，系統(tǒng)會將化合物“A”注入分析孔中,，緩慢混合，確?；衔镌诜治雠囵B(yǎng)基中均勻分布,。所有孔以此方式同步處理,。系統(tǒng)將自動執(zhí)行后續(xù)測量周期、方案規(guī)定的任何額外加藥及速率計算,。

應(yīng)用

探索細(xì)胞代謝的強大功能

安捷倫 Seahorse XF 平臺可實時測量活細(xì)胞的兩個主要代謝通路（線粒體呼吸和糖酵解）,，提供細(xì)胞生物能量代謝的功能動力學(xué)測量。了解生物能量參數(shù)如何提供有價值的信息,，并作為疾病模型,、關(guān)鍵細(xì)胞過程和療法發(fā)現(xiàn)的指標(biāo)。

免疫代謝

包括激活,、增殖和記憶細(xì)胞發(fā)育在內(nèi)的免疫細(xì)胞過程都是由代謝重編程驅(qū)動的,，代謝重編程可以被調(diào)節(jié)以增強性能和控制免疫細(xì)胞結(jié)局。通過功能性實時代謝測量,，了解激活,、增殖和記憶細(xì)胞發(fā)育等免疫細(xì)胞過程。

癌癥代謝

新陳代謝是癌癥惡性腫瘤細(xì)胞生長的關(guān)鍵驅(qū)動因素,，為了總體上向糖酵解表型轉(zhuǎn)換，癌細(xì)胞增殖通常需要進(jìn)行上調(diào)或“代謝轉(zhuǎn)換”,，從而加快能量需求并生成結(jié)構(gòu)單元,，最終促進(jìn)癌細(xì)胞生長。通過對活細(xì)胞進(jìn)行實時功能性生物能量代謝分析,，揭示癌癥代謝特性,，更深入地了解癌細(xì)胞生物學(xué)。