光片熒光顯微鏡
- 公司名稱(chēng) 深圳明準(zhǔn)醫(yī)療科技有限公司
- 品牌 明準(zhǔn)醫(yī)療
- 型號(hào)
- 產(chǎn)地
- 廠商性質(zhì) 生產(chǎn)廠家
- 更新時(shí)間 2024/11/23 15:53:10
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應(yīng)用場(chǎng)景
技術(shù)發(fā)展
光片技術(shù)優(yōu)秀的光學(xué)斷層能力
光片顯微鏡(Light Sheet Microscopy),,又稱(chēng)SPIM[1],,通過(guò)“光刀”照亮樣本平面,垂直成像,,移動(dòng)樣本或光片進(jìn)行不同層面成像,,是目前集低光損傷、高對(duì)比度,、大視野,、深度采樣、快速三維成像于一體的顯微成像儀器。
光片技術(shù)不斷迭代,,性能大幅提升
第1代[2]技術(shù)使用單角度高斯光束,,僅在束腰附近區(qū)域?qū)崿F(xiàn)良好光學(xué)斷層效果。高分辨率需更薄的光片和更高數(shù)值孔徑(NA)的檢測(cè)物鏡,,導(dǎo)致視場(chǎng)(FOV)嚴(yán)重受限,。之后的所有技術(shù)迭代都是為了在更大的視野范圍內(nèi)獲得更長(zhǎng)且更薄的光片。
第2代[3]技術(shù)采用多角度高斯光束,,可獲得更均勻的照明,但是依賴(lài)后期解卷積等圖像處理算法,,易產(chǎn)生重建偽影,。
第3代[4]技術(shù)如貝塞爾光片,、晶格光片等特殊光片,,因光學(xué)旁瓣效應(yīng)隨著光片長(zhǎng)度增加而加劇,因此實(shí)際成像性能提升低于理論預(yù)期,。
第3.5代[5]技術(shù)在2015年被提出,通過(guò)利用軸向掃描(ASLM)技術(shù),,在不犧牲成像速度的前提下,,實(shí)現(xiàn)了大視場(chǎng)下亞微米級(jí)等向性的三維分辨率,通過(guò)純光學(xué)手段達(dá)到業(yè)界的分辨能力,。
傳統(tǒng)光片和軸向掃描光片技術(shù)對(duì)比
基因表達(dá),、蛋白間相互作用、空間分布及功能等研究對(duì)光學(xué)分辨率的要求,,傳統(tǒng)光片技術(shù)大都忽視了三維分辨率等向性的問(wèn)題,,糟糕的軸向分辨率嚴(yán)重影響了人們對(duì)空間結(jié)構(gòu)的分析和定量。 明準(zhǔn)Pano One系統(tǒng)繼承了軸向掃描光片技術(shù)的優(yōu)點(diǎn),,軸向分辨率比傳統(tǒng)光片技術(shù)提高了6倍,,是目前衍射極限光片顯微鏡中報(bào)告的zuigao軸向分辨率,。其出色的光學(xué)斷層和高質(zhì)量的原始數(shù)據(jù),不需要解卷積等復(fù)雜計(jì)算,,便可對(duì)突觸棘,、神經(jīng)元等復(fù)雜結(jié)構(gòu)進(jìn)行清楚地解析,甚至可以用未處理的數(shù)據(jù)以 3D 形式追蹤神經(jīng)環(huán)路,,同時(shí)也極大促進(jìn)了稀疏標(biāo)志物的精確定量和共定位研究,。 折射率匹配,泛介質(zhì)生物大,、厚樣本成像 現(xiàn)有的多種透明化技術(shù)旨在解決光在組織中傳播受限的問(wèn)題,,其機(jī)制各有優(yōu)缺點(diǎn),并且都需要浸入式介質(zhì),,其折射率范圍通常在 1.33 到 1.56 之間,。樣本、介質(zhì)以及光學(xué)系統(tǒng)三者的折射率差異會(huì)導(dǎo)致分辨率的降低和像差偽影的產(chǎn)生,。
折射率不匹配(左)和匹配后(右)成像效果對(duì)比
明準(zhǔn)Pano One系統(tǒng)針對(duì)生物大樣本的多樣性,制定了折射率的全覆蓋(RI=1.33-1.58)設(shè)計(jì),,優(yōu)秀的光學(xué)設(shè)計(jì),,降低了樣本折射率不匹配帶來(lái)的像差問(wèn)題,兼容各種透明化方法:
疏水性溶劑方案 (BABB, PEGASOS, iDISCO等);
親水性溶液方案 (Scale, Ce3D, CUBIC等);
水凝膠方案 (CLARITY, SHIELD, PACT等),。
倒置成像,,多種樣本加載方式
明準(zhǔn)Pano One系統(tǒng)運(yùn)用了開(kāi)頂式(open-top)倒置成像設(shè)計(jì),相較于傳統(tǒng)光片的復(fù)雜安裝方式,,為用戶(hù)操作提供了大空間,。多種樣本加載固定方式可以滿(mǎn)足不同形狀、尺寸和硬度的穩(wěn)定成像需求,。
高速采集,,低光毒性成像
明準(zhǔn)Pano One系統(tǒng)為滿(mǎn)足胚胎學(xué)、發(fā)育生物學(xué)以及植物學(xué)等研究方向長(zhǎng)時(shí)間的活體觀測(cè)需求
在不犧牲分辨率的前提下,,大幅提高了成像速度,,zuidi程度的降低光毒性對(duì)樣本的損傷。