Pierce BCA 蛋白定量試劑盒是一種雙組分、高精度,、兼容去垢劑的蛋白定量試劑,，可準(zhǔn)確測定蛋白濃度。對于蛋白研究中的常見樣品類型,，Pierce BCA 試劑均可準(zhǔn)確測定蛋白濃度,。Pierce BCA 試劑可用于評估全細(xì)胞裂解物、親和柱分離組分和蛋白樣品純化的產(chǎn)量,，還可在工業(yè)應(yīng)用中用于蛋白污染的監(jiān)測,。與大多數(shù)染料結(jié)合法相比，BCA蛋白定量法受蛋白質(zhì)氨基酸組成差異的影響更小,，因此有更高的蛋白間定量一致性,。            

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• BCA 蛋白定量試劑盒的特點包括：




• •比色法測量

• —可以目測評估,，也可使用標(biāo)準(zhǔn)分光光度計或酶標(biāo)儀 (562 nm) 進(jìn)行測量




• • 高度一致性

• —與染料結(jié)合法 (Bradford) 相比，BCA定量法的蛋白間差異更小




• • 兼容性強(qiáng)

• —在大多數(shù)離子型和非離子型去污劑的常見濃度下,，性能不受影響




• • 定量時間

• —30 分鐘孵育,；與傳統(tǒng) Lowry 法相比，操作更簡單,，且檢測速度快 4 倍




• • 檢測范圍

• —BSA 的線性工作范圍為 20 至 2000 µg/mL




• • 高靈敏度

• —使用增強(qiáng)方案,，可檢測濃度低至 5 µg/mL 的樣品



測定工作原理


• BCA 蛋白測定法是在堿性環(huán)境下，通過蛋白將 Cu²⁺還原為 Cu¹⁺,，再通過二辛可寧酸 (BCA) 來檢測亞銅陽離子 (Cu¹⁺) ,。步是銅與堿性環(huán)境中的蛋白質(zhì)螯合，形成淺藍(lán)色復(fù)合物,，這一過程被稱為雙縮脲反應(yīng),。在該反應(yīng)（雙縮脲反應(yīng)）中，由三個或更多氨基酸殘基的肽在含酒石酸鈉鉀的堿性環(huán)境中與銅離子形成有色螯合復(fù)合物,。

• 在顯色反應(yīng)的第二步中,，BCA 與步形成的還原型（亞銅）陽離子發(fā)生反應(yīng)。兩分子 BCA 與一個亞銅離子螯合,，產(chǎn)生深紫色反應(yīng)產(chǎn)物,。BCA/銅復(fù)合物是水溶性的，在 562 nm 處具有強(qiáng)線性吸收,，且吸收度隨蛋白質(zhì)濃度增加而升高。該復(fù)合物的靈敏度（檢測下限）大約是個反應(yīng)中淡藍(lán)色的 100 倍,。

• 反應(yīng)很大程度上受到蛋白氨基酸序列中四個氨基酸殘基的影響,。然而，不同于考馬斯染料結(jié)合法,，肽鏈也有助于顏色形成,，因此可將不同蛋白間的測量差異降低