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鬼筆環(huán)肽染色實(shí)驗(yàn)

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鬼筆環(huán)肽染色實(shí)驗(yàn)

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   上海達(dá)為科生物科技有限公司,,位于上海長江軟件園,,公司目前具備較好的生物學(xué)、醫(yī)學(xué)技術(shù)服務(wù)平臺,,能夠?yàn)閺V大客戶提供醫(yī)學(xué)科研樣本檢測,、合作研究、開發(fā)及生產(chǎn)服務(wù),。

公司擁有專業(yè)的實(shí)驗(yàn)室,、先進(jìn)的實(shí)驗(yàn)設(shè)備和經(jīng)驗(yàn)豐富的科研技術(shù)人員,。技術(shù)團(tuán)隊(duì)包括研究員(博士后)2人,助理研究員(博士)4人,,核心研究員(碩士)15人,,主要致力于基因組學(xué)、轉(zhuǎn)錄組學(xué),、蛋白質(zhì)組學(xué),、代謝組學(xué)、生物化學(xué),、病理檢測,、基因檢測等技術(shù)在科研中的應(yīng)用與推廣。通過高度細(xì)分,、較好的服務(wù)平臺,,為廣大客戶提供了完善的技術(shù)解決方案和服務(wù)。目前,,,,涉及臨床醫(yī)學(xué)、腫瘤生物學(xué),、免疫學(xué),、細(xì)胞生物學(xué)、分子生物學(xué)等生命科學(xué),、醫(yī)學(xué)等諸多領(lǐng)域,。

我們的目標(biāo)是為了使您的工作更輕松、更快捷,。為了實(shí)現(xiàn)一站式服務(wù)我們不斷更新實(shí)驗(yàn)方法和引進(jìn)新的產(chǎn)品,,控制和降低各種成本,為您的研究加油,。這既是一項(xiàng)長期而艱巨的工作,,又是一項(xiàng)光榮的工作,同時(shí)也是我們企業(yè)發(fā)展的動(dòng)力源泉,。

 

 

 

 

制作動(dòng)物模型 細(xì)胞培養(yǎng) 分子生物學(xué)檢測 病理學(xué)形態(tài)檢測 蛋白質(zhì)技術(shù) 免疫學(xué)檢測 提供培訓(xùn)服務(wù)各種檢驗(yàn)儀器設(shè)備,、玻璃儀器及器具、一次性耗材等

鬼筆環(huán)肽染色實(shí)驗(yàn)

鬼筆環(huán)肽(Phalloidin)是一種從毒蘑菇Amanita phalloides中分離出來的多肽物質(zhì),,它能夠與細(xì)胞中的肌動(dòng)蛋白絲(F-actin)結(jié)合,,從而用于細(xì)胞骨架的染色。

鬼筆環(huán)肽與F-actin的結(jié)合是高度特異性的,,不會與肌動(dòng)蛋白單體(G-actin)結(jié)合,,因此它是研究細(xì)胞骨架的重要工具。通過使用熒光標(biāo)記的鬼筆環(huán)肽,可以在熒光

顯微鏡下觀察細(xì)胞中微絲的分布和形態(tài),。


鬼筆環(huán)肽染色實(shí)驗(yàn)步驟

  1.配制鬼筆環(huán)肽溶液:通常將0.1mg的鬼筆環(huán)肽溶于1ml無水甲醇中(也可以使用DMSO或無水乙醇),,配成貯存液,并在-20°C避光條件下保存,。

    工作液的濃度通常為5μg/ml,,通過將貯存液用PBS稀釋20倍來制備,。

  2.細(xì)胞固定:使用3.7%-4%的甲醛或多聚甲醛固定細(xì)胞20分鐘,,然后用PBS清洗細(xì)胞2次,。

  3.染色:加入5μg/ml的熒光標(biāo)記鬼筆環(huán)肽,,室溫染色30-60分鐘,然后再次用PBS清洗細(xì)胞2次,。

  4.細(xì)胞核染色:可以使用DAPI或Hoechst等染料對細(xì)胞核進(jìn)行染色,,染色時(shí)間通常為10分鐘,,之后再次用PBS清洗細(xì)胞2次。

  5.封片:吸去多余水分后,,加入熒光封片液(中性或偏堿性緩沖液加等量甘油),,蓋上蓋玻片,準(zhǔn)備在熒光或共聚焦顯微鏡下觀察,。


注意事項(xiàng)

  1.鬼筆環(huán)肽的分子量小,,可以輕易穿透細(xì)胞膜,因此通常不需要對細(xì)胞進(jìn)行冷丙酮和Triton X-100處理,。

  2.鬼筆環(huán)肽具有毒性,,操作時(shí)應(yīng)戴手套并在通風(fēng)良好的環(huán)境中進(jìn)行。

  3.鬼筆環(huán)肽染色可以與抗體染色結(jié)合使用,,以同時(shí)觀察細(xì)胞骨架和其他細(xì)胞結(jié)構(gòu),。

  4.避免使用含有甲醇或丙酮的固定劑,因?yàn)檫@些固定劑會破壞肌動(dòng)蛋白的結(jié)構(gòu),,影響染色效果,。


應(yīng)用

廣泛應(yīng)用于細(xì)胞生物學(xué)研究,包括細(xì)胞形態(tài)學(xué),、細(xì)胞運(yùn)動(dòng),、細(xì)胞分裂以及細(xì)胞與細(xì)胞之間的相互作用等領(lǐng)域。

通過觀察F-actin的分布,,研究人員可以更好地理解細(xì)胞的功能和病理過程,。




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