化工儀器網(wǎng)>產(chǎn)品展廳>技術(shù)服務(wù)>細(xì)胞生物學(xué)服務(wù)>細(xì)胞培養(yǎng)服務(wù)>CC96162 BW25113感受態(tài)
CC96162 BW25113感受態(tài)
具體成交價以合同協(xié)議為準(zhǔn)
- 公司名稱 上海語純生物科技有限公司
- 品牌 其他品牌
- 型號 CC96162
- 產(chǎn)地
- 廠商性質(zhì) 生產(chǎn)廠家
- 更新時間 2024/11/4 16:55:25
- 訪問次數(shù) 129
產(chǎn)品標(biāo)簽
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產(chǎn)品簡介
BW25113 菌株來源于 E. coli K12 W1485,,是 K12 的衍生菌株,與 MG1655 類似,,也是一種經(jīng)過較
少改造,,比較接近于“野生型”的大腸桿菌工程菌株。BW25113 作為母系菌株,,可以用來制作 E. coli
Keio Knockout 文庫,;同時可作為大腸桿菌模式菌株使用,用來制作各種基因的 Knockout 突變體,。
另外,,BW25113 可用于構(gòu)建,、擴增質(zhì)粒使用,但是不含核酸酶 endA1 突變,,因此體內(nèi)核酸酶含量
較高,,提取質(zhì)粒時務(wù)必使用質(zhì)粒提取試劑盒中去蛋白液盡量去除核酸酶,以防提取的質(zhì)粒被降解,。
BW25113 感受態(tài)細(xì)胞經(jīng)特殊工藝制作,,pUC18 質(zhì)粒檢測轉(zhuǎn)化效率>108 cfu/μg DNA。
產(chǎn)品組成
組分
BW25113 感受態(tài)細(xì)胞
10 × 100 μL
100 × 100 μL
定制
基因型:F-, DE(araD-araB)567, lacZ4787(del)::rrnB-3, LAM-, rph-1, DE(rhaD-rhaB)568, hsdR514
存儲條件
-80 ℃保存,;請勿將本品置于-20 ℃或者液氮中保存,。
質(zhì)量控制
無外源質(zhì)粒 DNA 殘留;
化學(xué)法轉(zhuǎn)化效率≥108 cfu/μg pUC18 DNA,。
使用方法
1. 將感受態(tài)細(xì)胞從-80 ℃中取出,,置于冰水浴中融化;
2. 將待轉(zhuǎn)化 DNA 加入到 100μL 感受態(tài)細(xì)胞中,,輕輕彈勻,,冰上孵育 30min;
3. 將離心管置于 42 ℃水浴鍋中,,不要晃動,,熱激 90s 后,立刻置于冰水浴中靜置 2-3 min,;
4. 向離心管中加入 900μL LB 或 SOC 培養(yǎng)基(室溫或 37 ℃預(yù)熱),,然后置于 37 ℃搖床復(fù)壯 45 min;
5. 取不同體積的轉(zhuǎn)化產(chǎn)物,,用無菌涂布棒均勻涂布于正確抗性的平板上,,于 37 ℃培養(yǎng)箱培養(yǎng)過夜。
注意事項
1. 感受態(tài)細(xì)胞冰水浴中解凍后應(yīng)立即使用,;
2. 加入的待轉(zhuǎn)化 DNA 的總體積不應(yīng)超過感受態(tài)細(xì)胞體積的 1/10,;
3. 加入待轉(zhuǎn)化 DNA 后,不要用移液器吹吸感受態(tài)細(xì)胞,,僅用手指輕彈即可,;
4. 為確保優(yōu)良轉(zhuǎn)化效率,整個操作過程中除熱激外均要保持低溫,,并且要盡量輕柔