CC96163 EPI300 感受態(tài)
具體成交價(jià)以合同協(xié)議為準(zhǔn)
- 公司名稱 上海語(yǔ)純生物科技有限公司
- 品牌 其他品牌
- 型號(hào) CC96163
- 產(chǎn)地
- 廠商性質(zhì) 經(jīng)銷商
- 更新時(shí)間 2024/11/4 16:46:21
- 訪問次數(shù) 80
產(chǎn)品標(biāo)簽
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供貨周期 | 現(xiàn)貨 |
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產(chǎn)品簡(jiǎn)介
EPI300 細(xì)胞含有一個(gè)突變的 trfA 基因,,該基因表達(dá)出的蛋白產(chǎn)物可以促進(jìn)含有 oriV 復(fù)制子的質(zhì)粒的高拷
貝擴(kuò)繁,誘導(dǎo)劑Ⅰ可以誘導(dǎo) trfA 基因的表達(dá)。當(dāng)含有 oriV 復(fù)制子質(zhì)粒的 EPI300 細(xì)胞在 LB/2YT 或 SOB 培
養(yǎng)基中生長(zhǎng)時(shí),,trfA 基因的表達(dá)被抑制,,oriV 復(fù)制子質(zhì)粒的拷貝數(shù)維持在很低的水平;當(dāng)在培養(yǎng)基中加入
CopyMore 300 誘導(dǎo)劑時(shí),,oriV 復(fù)制子質(zhì)粒的拷貝數(shù)可維持在很高的水平,,提高了質(zhì)粒產(chǎn)量。因此,,
EPI300 菌株可以降低 oriV 復(fù)制子質(zhì)粒的拷貝數(shù),,特別適合于各種不穩(wěn)定 DNA 或毒性基因的克隆。 [mrr
hsdRMS-mcrBC]基因型使 EPI300 菌株適合于克隆富含甲基胞嘧啶或甲基腺嘌呤的 DNA(例如:哺乳動(dòng)物
基因組 DNA),。recA1 和 endA1 的突變有利于插入 DNA 的穩(wěn)定和高純度質(zhì)粒 DNA 的提取,。lacZΔM15 標(biāo)
記的存在使 EPI300 可用于藍(lán)白斑篩選,rpsL 賦予其鏈m素抗性,。經(jīng) pUC18 質(zhì)粒轉(zhuǎn)化檢測(cè),,EPI300 感受態(tài)
細(xì)胞的轉(zhuǎn)化效率可達(dá) 108 cfu/μg DNA。
產(chǎn)品組成
組分
EPI300
化學(xué)感受態(tài)細(xì)胞
10 × 100 μL
100 × 100 μL
定制
基因型:F – mcrA ?(mrr-hsdRMS-mcrBC) φ80 lacZ?M15 ?lacX74 recA1 endA1 araD139 ?(ara, leu)7697 galU galK λ– rpsL nupG
trfA dhfr
存儲(chǔ)條件
-80 ℃保存,;請(qǐng)勿將本品置于-20 ℃或者液氮中保存,。
質(zhì)量控制
無外源質(zhì)粒 DNA 殘留;
化學(xué)法轉(zhuǎn)化效率≥108 cfu/μg pUC18 DNA,。
使用方法
1. 將感受態(tài)細(xì)胞從-80 ℃中取出,,置于冰浴中融化;
2. 將待轉(zhuǎn)化 DNA 加入到 100 μL 感受態(tài)細(xì)胞中,,輕輕彈勻,,冰上孵育 30 min;
3. 將離心管置于 42 ℃水浴鍋中,,不要晃動(dòng),,熱激 90 s 后,立刻置于冰浴中靜置 2-3 min,;
4. 向離心管中加入 900 μL LB 或 SOC 培養(yǎng)基(室溫或 37 ℃預(yù)熱),,然后置于 37 ℃搖床復(fù)壯 45 min;
5. 取不同體積的轉(zhuǎn)化產(chǎn)物,,用無菌涂布棒均勻涂布于正確抗性的平板上,,于 37 ℃培養(yǎng)箱培養(yǎng)過夜。
注意事項(xiàng)
1. 感受態(tài)細(xì)胞冰浴中解凍后應(yīng)立即使用,;
2. 加入的待轉(zhuǎn)化 DNA 的總體積不應(yīng)超過感受態(tài)細(xì)胞體積的 1/10,;
3. 加入待轉(zhuǎn)化 DNA 后,不要用移液器吹吸感受態(tài)細(xì)胞,,僅用手指輕彈即可,;
EPI300 化學(xué)感受態(tài)
#CC961634. 為確保優(yōu)良轉(zhuǎn)化效率,,整個(gè)操作過程中除熱激外均要保持低溫,并且要盡量輕柔,。