CC96183 ArcticExpress(DE3)感受態(tài)
具體成交價以合同協(xié)議為準(zhǔn)
- 公司名稱 上海語純生物科技有限公司
- 品牌 其他品牌
- 型號 CC96183
- 產(chǎn)地
- 廠商性質(zhì) 經(jīng)銷商
- 更新時間 2024/11/4 10:35:25
- 訪問次數(shù) 55
產(chǎn)品標(biāo)簽
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供貨周期 | 現(xiàn)貨 |
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產(chǎn)品簡介
ArcticExpress (DE3)來源于 E. coli B 菌株,為 Lon 和 OmpT 蛋白m缺陷型菌株,,可促進(jìn)表達(dá)蛋白的
穩(wěn)定。ArcticExpress (DE3)菌株染色體 DNA 中整合了λ噬菌體 DE3 區(qū),,使得 ArcticExpress (DE3)菌
株可同時表達(dá) T7 RNA 聚合酶和大腸桿菌 RNA 聚合酶,,廣泛用于 pET 系列,pGEX,,pMAL 等質(zhì)粒
的蛋白表達(dá),。ArcticExpress (DE3)菌株具有四環(huán)s,慶大m素抗性,,endA1 突變有利于質(zhì)粒 DNA 的
穩(wěn)定,。[cpn10cpn60 GentR]的存在使 ArcticExpress (DE3)可以表達(dá)適應(yīng)低溫的伴侶蛋白 Cpn10 和
Cpn60(來自嗜冷菌—Oleispira antarctica)。Cpn10 和 Cpn60 伴侶蛋白在 4 - 12 ℃表現(xiàn)出較高活性,,
在 ArcticExpress (DE3)細(xì)胞中表達(dá)時,,可降低重組蛋白包涵體的形成,增加可溶重組蛋白的表達(dá)量
及生物活性,,比傳統(tǒng)的原核表達(dá)伴侶蛋白 GroEL,、GroES 等具有更加優(yōu)異的促融性能,。吐露港生產(chǎn)
的 ArcticExpress (DE3)感受態(tài)細(xì)胞經(jīng)特殊工藝制作,pUC18 質(zhì)粒檢測轉(zhuǎn)化效率達(dá) 108 cfu/μg DNA,。
產(chǎn)品組成
組分
ArcticExpress(DE3)
感受態(tài)細(xì)胞
10 × 100 μL
100 × 100 μL
定制
基因型:E. coli B F– ompT hsdS (rB– mB–) dcm+ TetR gal λ(DE3) endA Hte [cpn10cpn60 GentR]
存儲條件
-80 ℃保存,;請勿將本品置于-20 ℃或者液氮中保存。
質(zhì)量控制
無外源質(zhì)粒 DNA 殘留,;
化學(xué)法轉(zhuǎn)化效率≥108 cfu/μg pUC18 DNA,。
使用方法
1. 將感受態(tài)細(xì)胞從-80 ℃中取出,置于冰水浴中融化,;
2. 將待轉(zhuǎn)化 DNA 加入到 100 μL 感受態(tài)細(xì)胞中,,輕輕彈勻,冰上孵育 30 min,;
3. 將離心管置于 42 ℃水浴鍋中,,不要晃動,熱激 90s 后,,立刻置于冰水浴中靜置 2-3 min,;
4. 向離心管中加入 900μL LB 或 SOC 培養(yǎng)基(室溫或 37 ℃預(yù)熱),然后置于 37 ℃搖床復(fù)壯 45 min,;
5. 取不同體積的轉(zhuǎn)化產(chǎn)物,,用無菌涂布棒均勻涂布于正確抗性的平板上,于 37 ℃培養(yǎng)箱培養(yǎng)過夜,。
注意事項
1. 感受態(tài)細(xì)胞冰水浴中解凍后應(yīng)立即使用,;
2. 加入的待轉(zhuǎn)化 DNA 的總體積不應(yīng)超過感受態(tài)細(xì)胞體積的 1/10;
3. 加入待轉(zhuǎn)化 DNA 后,,不要用移液器吹吸感受態(tài)細(xì)胞,,僅用手指輕彈即可;
4. 為確保優(yōu)良轉(zhuǎn)化效率,,整個操作過程中除熱激外均要保持低溫,,并且要盡量輕柔。