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CC96190 M15(pREP4)感受態(tài)
具體成交價(jià)以合同協(xié)議為準(zhǔn)
- 公司名稱 上海語純生物科技有限公司
- 品牌 其他品牌
- 型號(hào) CC96190
- 產(chǎn)地
- 廠商性質(zhì) 生產(chǎn)廠家
- 更新時(shí)間 2024/11/4 9:28:30
- 訪問次數(shù) 109
產(chǎn)品標(biāo)簽
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產(chǎn)品簡介
M15(pREP4)蛋白表達(dá)菌株含有 pREP4 質(zhì)粒,,該質(zhì)粒通過 p15A 復(fù)制子啟動(dòng)復(fù)制,可以與許多原核
表達(dá)質(zhì)粒共存于同一大腸桿菌細(xì)胞中,;同時(shí)該質(zhì)粒攜帶 lacI 基因,,可高效表達(dá) LacI 抑制蛋白,在
IPTG誘導(dǎo)前可抑制目標(biāo)蛋白的本底表達(dá),,特別適合毒性基因的表達(dá),。M15(pREP4)菌株是 PQE系列
質(zhì)粒的配套菌株,特別適合 PQE 系列質(zhì)?;蛴?nbsp;E. coli T5 啟動(dòng)子驅(qū)動(dòng)蛋白表達(dá)的質(zhì)粒,。pREP4 質(zhì)粒
賦予該菌株卡那m素抗性,。吐露港生產(chǎn)的 M15(pREP4)感受態(tài)細(xì)胞經(jīng)特殊工藝制作,,pUC18 質(zhì)粒檢
測轉(zhuǎn)化效率達(dá) 108 cfu/μg DNA。
產(chǎn)品組成
組分
M15(pREP4)
感受態(tài)細(xì)胞
10 × 100 μL
100 × 100 μL
定制
基因型:F- φ80 lacZΔM15 thi lac- mtlrecA+ KanR
存儲(chǔ)條件
-80 ℃保存,;請(qǐng)勿將本品置于-20 ℃或者液氮中保存,。
質(zhì)量控制
無外源質(zhì)粒 DNA 殘留,;
化學(xué)法轉(zhuǎn)化效率≥108 cfu/μg pUC18 DNA。
使用方法
1. 將感受態(tài)細(xì)胞從-80 ℃中取出,,置于冰水浴中融化,;
2. 將待轉(zhuǎn)化 DNA 加入到 100 μL 感受態(tài)細(xì)胞中,輕輕彈勻,,冰上孵育 30 min,;
3. 將離心管置于 42 ℃水浴鍋中,不要晃動(dòng),,熱激 90s 后,,立刻置于冰水浴中靜置 2-3 min;
4. 向離心管中加入 900μL LB 或 SOC 培養(yǎng)基(室溫或 37 ℃預(yù)熱),,然后置于 37 ℃搖床復(fù)壯 45 min,;
5. 取不同體積的轉(zhuǎn)化產(chǎn)物,用無菌涂布棒均勻涂布于正確抗性的平板上,,于 37 ℃培養(yǎng)箱培養(yǎng)過夜,。
注意事項(xiàng)
1. 感受態(tài)細(xì)胞冰水浴中解凍后應(yīng)立即使用;
2. 加入的待轉(zhuǎn)化 DNA 的總體積不應(yīng)超過感受態(tài)細(xì)胞體積的 1/10,;
3. 加入待轉(zhuǎn)化 DNA 后,,不要用移液器吹吸感受態(tài)細(xì)胞,僅用手指輕彈即可,;
4. 為確保優(yōu)良轉(zhuǎn)化效率,,整個(gè)操作過程中除熱激外均要保持低溫,并且要盡量輕柔,。