CC96112 Rosetta (DE3)pLysS 感受態(tài)
具體成交價以合同協(xié)議為準
- 公司名稱 上海語純生物科技有限公司
- 品牌 其他品牌
- 型號 CC96112
- 產(chǎn)地
- 廠商性質(zhì) 生產(chǎn)廠家
- 更新時間 2024/11/1 15:31:42
- 訪問次數(shù) 89
產(chǎn)品標簽
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產(chǎn)品簡介
Rosetta 系列菌株來源于 BL21 系列宿主菌,,該系列菌株含有原本在大腸桿菌中稀少的真核細胞密碼
子,增加了真核細胞的蛋白表達水平,。Rosetta(DE3)pLysS 來源于 Rosetta(DE3),,菌株能夠提供
AUA, AGG, AGA, CUA, CCC, 和 GGA 稀有密碼子的 tRNA。Rosetta(DE3)pLysS 載體通過提供稀有
密碼子,,使得該宿主菌相對于其他大腸桿菌,,能夠提供更加“通用”的蛋白質(zhì)表達,從而提升目的蛋
白表達水平,。DE3 是溶源性的 λDE3, 所以帶有 T7 RNA 聚合酶的染色體拷貝,。該菌株適用于 pET 系
列載體,及其他 T7 啟動子系列載體,。含有 pLysSRARE2 質(zhì)粒,,能夠產(chǎn)生 T7 溶菌m,可以有效降低
目的基因的基礎表達水平,,該質(zhì)粒具有氯m素抗性,。pLysSRARE2質(zhì)粒的起始復制位點是p15 Origin,
這使得該質(zhì)粒能夠和 pUC-及 pBR322-衍生的質(zhì)粒互相共存,。經(jīng) pUC18 質(zhì)粒轉(zhuǎn)化檢測,,
Rosetta(DE3)pLysS 感受態(tài)細胞的轉(zhuǎn)化效率可達 107 cfu/μg DNA 以上。
產(chǎn)品組成
組分
Rosetta(DE3)pLysS
化學感受態(tài)細胞
10 × 100 μL
100 × 100 μL
定制
基因型:F- ompT hsdSB (rB-mB-) gal dcm (DE3) pLysSRARE2 (CamR)
存儲條件
-80 ℃保存,;請勿將本品置于-20 ℃或者液氮中保存,。
質(zhì)量控制
除 pLysSRARE2 外,無外源質(zhì)粒 DNA 殘留,;
化學法轉(zhuǎn)化效率≥107 cfu/μg pUC18 DNA,。
使用方法
1. 將感受態(tài)細胞從-80 ℃中取出,置于冰水浴中融化,;
2. 將待轉(zhuǎn)化 DNA 加入到 100 μL 感受態(tài)細胞中,,輕輕彈勻,冰上孵育 30 min,;
3. 將離心管置于 42 ℃水浴鍋中,,不要晃動,熱激 90 s 后,,立刻置于冰水浴中靜置 2-3 min,;
4. 向離心管中加入900 μL LB或SOC培養(yǎng)基(室溫或37 ℃預熱),然后置于37 ℃搖床復壯45 min,;
5. 取不同體積的轉(zhuǎn)化產(chǎn)物,,用無菌涂布棒均勻涂布于正確抗性的平板上,,于 37 ℃培養(yǎng)箱培養(yǎng)過夜。
注意事項
1. 感受態(tài)細胞冰水浴中解凍后應立即使用,;
2. 加入的待轉(zhuǎn)化 DNA 的總體積不應超過感受態(tài)細胞體積的 1/10,;
3. 加入待轉(zhuǎn)化 DNA 后,不要用移液器吹吸感受態(tài)細胞,,僅用手指輕彈即可,;
4. 為確保優(yōu)良轉(zhuǎn)化效率,整個操作過程中除熱激外均要保持低溫,,并且要盡量輕柔,。