CC96141 Tuner感受態(tài)
具體成交價以合同協(xié)議為準
- 公司名稱 上海語純生物科技有限公司
- 品牌 其他品牌
- 型號 CC96141
- 產(chǎn)地
- 廠商性質(zhì) 生產(chǎn)廠家
- 更新時間 2024/11/1 14:26:03
- 訪問次數(shù) 61
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產(chǎn)品簡介
Tuner 系列菌株是 lacZY 刪除的 BL21 突變菌株,其中 lacY 的突變使得 IPTG 能夠進入所有細胞的胞
內(nèi),,從而使得蛋白的誘導水平具有 IPTG 的濃度依賴性,。當與 pET 系列載體聯(lián)合使用時,可使蛋白
的表達量從低表達水平到超高表達水平的范圍內(nèi)進行有效的調(diào)節(jié),;而在蛋白表達水平低的情況下,,
目的蛋白可能會呈現(xiàn)更好的可溶性和活性。因此,,Tuner系列菌株的蛋白表達水平可以通過IPTG濃
度來進行精確而嚴謹?shù)恼{(diào)控,。此外,Tuner 系列菌株還是 Lon 和 OmpT 蛋白酶缺陷型菌株,。由于該
菌株不含有 λDE3序列,,不表達 T7 RNA 聚合酶,因此不能用于 T7啟動子系列質(zhì)粒的蛋白表達,。經(jīng)
pUC18 質(zhì)粒轉(zhuǎn)化檢測,,Tuner 感受態(tài)細胞的轉(zhuǎn)化效率可達 108 cfu/μg DNA。
產(chǎn)品組成
組分
Tuner
化學感受態(tài)細胞
10 × 100 μL
100 × 100 μL
定制
基因型:F- ompT hsdSB (rB- mB-) gal dcm lacY1
存儲條件
-80 ℃保存,;請勿將本品置于-20 ℃或者液氮中保存,。
質(zhì)量控制
無外源質(zhì)粒 DNA 殘留;
化學法轉(zhuǎn)化效率≥108 cfu/μg pUC18 DNA,。
使用方法
1. 將感受態(tài)細胞從-80 ℃中取出,,置于冰浴中融化;
2. 將待轉(zhuǎn)化 DNA 加入到 100 μL 感受態(tài)細胞中,,輕輕彈勻,,冰上孵育 30 min;
3. 將離心管置于 42 ℃水浴鍋中,,不要晃動,,熱激 90s 后,立刻置于冰水浴中靜置 2-3 min,;
4. 向離心管中加入 900 μL LB 或 SOC 培養(yǎng)基(室溫或 37 ℃預熱),,后置于 37 ℃搖床復壯 45 min;
5. 取不同體積的轉(zhuǎn)化產(chǎn)物,,用無菌涂布棒均勻涂布于正確抗性的平板上,,于 37 ℃培養(yǎng)箱培養(yǎng)過夜。
注意事項
1. 感受態(tài)細胞冰水浴中解凍后應(yīng)立即使用,;
2. 加入的待轉(zhuǎn)化 DNA 的總體積不應(yīng)超過感受態(tài)細胞體積的 1/10,;
3. 加入待轉(zhuǎn)化 DNA 后,,不要用移液器吹吸感受態(tài)細胞,僅用手指輕彈即可,;
4. 為確保優(yōu)良轉(zhuǎn)化效率,,整個操作過程中除熱激外均要保持低溫,并且要盡量輕柔