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CC96180 Tuner(DE3)感受態(tài)
具體成交價以合同協(xié)議為準(zhǔn)
- 公司名稱 上海語純生物科技有限公司
- 品牌 其他品牌
- 型號 CC96180
- 產(chǎn)地
- 廠商性質(zhì) 生產(chǎn)廠家
- 更新時間 2024/11/1 11:02:24
- 訪問次數(shù) 67
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產(chǎn)品簡介
Tuner(DE3)菌株是 BL21 菌株的 lacZY 基因 (半乳糖苷透性酶基因)突變株,,此突變導(dǎo)致 IPTG 以均一
速度進(jìn)入體系中大腸桿菌的每個細(xì)胞,,產(chǎn)生更加嚴(yán)格,、均一的濃度依賴。此菌株用于高效表達(dá)克
隆于含有噬菌體 T7 啟動子的表達(dá)載體 (如 pET 系列)的基因,。λ 噬菌體 DE3 區(qū)含有 T7 噬菌體 RNA
聚合酶,,該區(qū)整合于 Tuner 的染色體上,所以稱為 Tuner(DE3),,可同時表達(dá) T7 RNA 聚合酶和大腸
桿菌 RNA 聚合酶,,可用于 pET 系列,pGEX,,pMAL等質(zhì)粒的蛋白表達(dá),。Tuner(DE3)感受態(tài)細(xì)胞由
特殊工藝制作,pUC18 質(zhì)粒檢測轉(zhuǎn)化效率達(dá) 107 cfu/μg DNA,。
產(chǎn)品組成
組分
Tuner(DE3)感受態(tài)細(xì)胞
10 × 100 μL
100 × 100 μL
定制
基因型:F- ompT hsdSB (rB- mB-) gal dcm lacY1 λ(DE3)
存儲條件
-80 ℃保存,;請勿將本品置于-20 ℃或者液氮中保存。
質(zhì)量控制
無外源質(zhì)粒 DNA 殘留,;
化學(xué)法轉(zhuǎn)化效率≥107 cfu/μg pUC18 DNA,。
使用方法
1. 將感受態(tài)細(xì)胞從-80 ℃中取出,置于冰水浴中融化,;
2. 將待轉(zhuǎn)化 DNA 加入到 100 μL 感受態(tài)細(xì)胞中,,輕輕彈勻,,冰上孵育 30 min;
3. 將離心管置于 42 ℃水浴鍋中,,不要晃動,,熱激 90s 后,立刻置于冰水浴中靜置 2-3 min,;
4. 向離心管中加入 900μL LB 或 SOC 培養(yǎng)基(室溫或 37 ℃預(yù)熱),,然后置于 37 ℃搖床復(fù)壯 45 min;
5. 取不同體積的轉(zhuǎn)化產(chǎn)物,,用無菌涂布棒均勻涂布于正確抗性的平板上,,于 37 ℃培養(yǎng)箱培養(yǎng)過夜。
注意事項
1. 感受態(tài)細(xì)胞冰水浴中解凍后應(yīng)立即使用,;
2. 加入的待轉(zhuǎn)化 DNA 的總體積不應(yīng)超過感受態(tài)細(xì)胞體積的 1/10,;
3. 加入待轉(zhuǎn)化 DNA 后,不要用移液器吹吸感受態(tài)細(xì)胞,,僅用手指輕彈即可,;
4. 為確保優(yōu)良轉(zhuǎn)化效率,整個操作過程中除熱激外均要保持低溫,,并且要盡量輕柔