化工儀器網(wǎng)>產(chǎn)品展廳>技術(shù)服務(wù)>細(xì)胞生物學(xué)服務(wù)>細(xì)胞培養(yǎng)服務(wù)>EC96312 Ar Qual感受態(tài)(電轉(zhuǎn))
EC96312 Ar Qual感受態(tài)(電轉(zhuǎn))
具體成交價以合同協(xié)議為準(zhǔn)
- 公司名稱 上海語純生物科技有限公司
- 品牌 其他品牌
- 型號 EC96312
- 產(chǎn)地
- 廠商性質(zhì) 生產(chǎn)廠家
- 更新時間 2024/10/31 9:33:54
- 訪問次數(shù) 57
產(chǎn)品標(biāo)簽
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產(chǎn)品簡介
發(fā)根農(nóng)桿菌是根瘤菌科(Rhizobiaceae)農(nóng)桿菌屬(agrobacterium)的一種革蘭氏陰性土壤細(xì)菌,,它能夠
感染大多數(shù)雙子葉植物和少數(shù)單子葉植物以及個別裸子植物。Ar.Qual 發(fā)根農(nóng)桿菌菌株含有農(nóng)桿堿
型 Ri 質(zhì)粒,,具有廣泛的宿主范圍(玉米,,煙草,番茄,,柑橘等),,同時具有鏈m素,氯m素抗性,。
本公司生產(chǎn)的 Ar.Qual 電轉(zhuǎn)化感受態(tài)細(xì)胞經(jīng)特殊工藝制作,,pCAMBIA2301 質(zhì)粒(卡那m素抗性)
檢測,轉(zhuǎn)化效率>105cfu/μg DNA,。
產(chǎn)品組成
組分
Ar.Qual
電轉(zhuǎn)感受態(tài)細(xì)胞
10 ×50 μL
100 ×50 μL
定制
基因型:Agrobacterium rhizogenes (StrR ,CamR ) Ar Qual Ri (agropine type)
存儲條件
-80 ℃保存; 請勿將本品置于-20 ℃或者液氮中保存,。
質(zhì)量控制
除農(nóng)桿堿型 Ri 質(zhì)粒外,無外源質(zhì)粒 DNA 殘留,;
電轉(zhuǎn)法轉(zhuǎn)化效率≥105 cfu/μg DNA
使用方法
1. 將新的 2 mm 電擊杯插入冰中預(yù)冷,;或者將儲存于 75%乙醇中的 2 mm 電擊杯和杯蓋取出,在超凈工
作臺中將其倒置于干凈的吸水紙上,,使乙醇充分揮發(fā),,然后插入冰中預(yù)冷;
2. 取-80℃保存的農(nóng)桿菌感受態(tài)插入冰中待其融化,,加入 0.01-1μg 質(zhì)粒 DNA(體積不大于 5μl),,用
200μl 槍頭將感受態(tài)-質(zhì)粒混合物快速轉(zhuǎn)移到預(yù)冷的電擊杯中,,蓋上杯蓋,;
3. 開啟電轉(zhuǎn)儀,設(shè)置參數(shù)(2500 V ,,200 Ω,,25μF),將電擊杯快速放入電轉(zhuǎn)槽中,,電擊完成后快速插
入冰中,,加入 900μl 無抗生素的 YEB 并將感受態(tài)細(xì)胞轉(zhuǎn)移到無菌空管中,,28 ℃振蕩培養(yǎng) 2~3 小時。
(注:此電轉(zhuǎn)化參數(shù)為 Bio-rad 推薦,,使用者也可使用電轉(zhuǎn)儀所推薦的 Protocol 進(jìn)行操作)
4. 6000 rpm 離心一分鐘收菌,,留取 100μl 左右上清將菌體輕輕吹勻,并涂布于含相應(yīng)抗生素的 YEB 平板
上,,倒置放于 28℃培養(yǎng)箱培養(yǎng) 2~3 天,。
注意事項(xiàng)
1. 加入質(zhì)粒時體積不應(yīng)大于感受態(tài)體積的 1/10;
2. 電轉(zhuǎn)感受態(tài)細(xì)胞中不可混入氣泡,,轉(zhuǎn)化高濃度的質(zhì)??上鄳?yīng)減少最終用于涂板的菌量;
3. 平板上陽性克隆密度不宜過大,,為了獲得大的菌落,,應(yīng)減少質(zhì)粒用量或最終用于涂板的菌量;
4. Ar.Qual 具有鏈m素,、氯m素抗性,,不可用于具有鏈m素抗性或氯m素抗性質(zhì)粒的轉(zhuǎn)化。