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自誘導(dǎo)LB培養(yǎng)基Auto Induction Medium
- 公司名稱 靶點(diǎn)科技（北京）有限公司
- 品牌
- 型號
- 產(chǎn)地
- 廠商性質(zhì) 代理商
- 更新時間 2025/2/26 10:05:13
- 訪問次數(shù) 704
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背景原理
自誘導(dǎo)培養(yǎng)基Auto Induction Medium（AIM），包含LB Broth (AIM),， 2x YT Broth (AIM),， Terrific Broth (AIM)， Super Broth (AIM)。通常,，外源蛋白在細(xì)菌中表達(dá)時常使用IPTG誘導(dǎo)的啟動子,，如Lac啟動子。當(dāng)細(xì)胞密度達(dá)到理想值時,，通過向培養(yǎng)基中加入IPTG的方法誘導(dǎo)蛋白表達(dá),。使用這個自動誘導(dǎo)培養(yǎng)基，不再需要監(jiān)測細(xì)胞密度和添加IPTG,。葡萄糖作為半乳糖操縱子的阻遏因子阻止細(xì)菌利用α-乳糖，而被優(yōu)先代謝,，促進(jìn)高密度生長,。一旦培養(yǎng)基中的葡萄糖被耗盡（通常發(fā)生在對數(shù)期的后期），乳糖被?-半乳糖苷酶轉(zhuǎn)換成異乳糖（葡萄糖-1,6-半乳糖）,，而后者作為IPTG誘導(dǎo)型啟動子的誘導(dǎo)劑,，引起乳糖阻遏子從與DNA結(jié)合的位點(diǎn)上釋放，啟動重組蛋白的表達(dá),。對于DE3基因型的E.coli中,，異乳糖使T7lac啟動子去阻遏，并誘導(dǎo)lacUV5啟動子表達(dá)T7 RNA聚合酶,。通過這種方式,，在細(xì)菌培養(yǎng)物生長到某一特定點(diǎn)時蛋白表達(dá)自發(fā)開始，省掉了監(jiān)測細(xì)胞密度（OD600）和添加IPTG這兩個步驟,。與傳統(tǒng)IPTG誘導(dǎo)的蛋白表達(dá)過程相比,，使用自動誘導(dǎo)培養(yǎng)基極大地方便和簡化了試驗流程。
自誘導(dǎo)培養(yǎng)基(lac啟動子)(Auto-induction Medium)產(chǎn)品及特點(diǎn)
本產(chǎn)品是在pET專用生長培養(yǎng)基的基礎(chǔ)上開發(fā)而成的,它利用E.coli自身對培養(yǎng) 基中碳源和能源的調(diào)控利用機(jī)制,實(shí)現(xiàn)外源蛋白在細(xì)菌達(dá)到飽和期后的自動誘發(fā),。
具有下列特點(diǎn):
1. 不需添加任何IPTG或相關(guān)誘導(dǎo)物,節(jié)約成本,。
2. 免去了密切監(jiān)控菌液密度的過程,尤其適合大規(guī)模篩選 。
3. 細(xì)菌生長密度遠(yuǎn)高于IPTG誘導(dǎo)表達(dá)系統(tǒng) ,。
4. 外源蛋白表達(dá)量遠(yuǎn)遠(yuǎn)高于IPTG誘導(dǎo)表達(dá)系統(tǒng),。
5. 本產(chǎn)品即開即用,操作簡單 。
6. 與各種細(xì)胞培養(yǎng)容器兼容(如培養(yǎng)瓶,、培養(yǎng)罐,、深孔管、發(fā)酵罐等),。
過夜培養(yǎng)自動誘導(dǎo)細(xì)胞表達(dá)的培養(yǎng)基系統(tǒng),，培養(yǎng)基都可以大程度上提高pET系列和其它IPTG原核誘導(dǎo)表達(dá)系統(tǒng)在大腸桿菌中蛋白的表達(dá)量，其的方便之處在于使用這種培養(yǎng)基不需要對大腸桿菌的生長密度進(jìn)行檢測,。因為IPTG會對細(xì)胞存在毒性,，因此使用了這種不含IPTG的自動誘導(dǎo)體系培養(yǎng)基與傳統(tǒng)培養(yǎng)基相比可以使細(xì)胞數(shù)量和目的蛋白量都大大增加數(shù)倍。
這種培養(yǎng)基是基于F. William Studier博士的技術(shù)，使用了不同代謝成分提高細(xì)胞的生長密度,，并自動誘導(dǎo)lac啟動子開始轉(zhuǎn)錄,。Overnight Express Instant TB Medium培養(yǎng)基現(xiàn)在提供三種不同的成分。作為一種粉末裝TB培養(yǎng)基它可快速溶解在水中,，并進(jìn)行微波加熱和高壓滅菌處理,。
產(chǎn)品介紹
規(guī)格: 500g
外觀: Beige powder. Autoclaved medium should be amber.
存儲: 2oC – 25oC. When not in use, keep container closed to avoid hydration.
配置:
Add 34,85g of the dehydrated medium to one liter of distilled water. Mix well and dissolve by heating with regular agitation. Boil for 1 minute in order to dissolve completely. Dispense in appropriate containers and sterilize by autoclaving at 121oC for 15 to 20 minutes. Store at 2oC to 8oC.
成分 (g/L)：
Tryptone: 10,00
Yeast Extract: 5,00
MgSO4: 0,15
(NH4) 2SO4: 3,30
KH2PO4: 6,80
Na2HPO4: 7,10
Glucose 0,50
Alpha Lactose 2,00
Final pH (25oC): 7,0 ± 0,2
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