AmphaTMX30 實時微流控阻抗流式細胞儀
- 公司名稱 上海澤泉科技股份有限公司
- 品牌 其他品牌
- 型號 AmphaTMX30
- 產(chǎn)地
- 廠商性質(zhì) 代理商
- 更新時間 2025/3/11 16:57:27
- 訪問次數(shù) 767
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應(yīng)用領(lǐng)域 | 醫(yī)療衛(wèi)生,生物產(chǎn)業(yè),制藥 |
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實時微流控阻抗流式細胞儀
高通量 多參數(shù) 非標記 實時無損檢測,!
多參數(shù):可獲取細胞活力,、數(shù)量、濃度等信息,,并追蹤細胞分化,、衰老、凋亡及癌變等生理狀態(tài)
通用性:適用于1-50μm內(nèi)所有類型的單細胞 (人體,、動/植物細胞,、細菌、酵母,、孢子,、藻類、體細胞等)
高效性:實時標準化無損檢測,、幾分鐘內(nèi)獲得結(jié)果,,通量高、重復(fù)性高,、精確度高
易用性:無需染色、標記或細胞再培養(yǎng),,操作簡單易上手
靈活性:可根據(jù)細胞類型,、研究目標自定義測量和分析協(xié)議
Ampha X30開創(chuàng)了單細胞分析的新紀元,通過整合微流控技術(shù),、電阻抗技術(shù)與流式細胞術(shù),,能夠在微流體精準參考條件下,實現(xiàn)流動態(tài)單細胞的高通量,、連續(xù),、無損阻抗檢測,實時獲得細胞活力,、數(shù)量,、濃度等信息,并追蹤細胞分化,、衰老,、凋亡及癌變等生理狀態(tài)。與常規(guī)細胞分析儀相比,,Ampha X30實時微流控阻抗流式細胞分析儀具有非標記,、多參數(shù)、低污染,、檢測速度快,、標準化程度高等顯著優(yōu)勢,,是生物學(xué)、醫(yī)學(xué)和藥學(xué)等領(lǐng)域中需要的強有力工具,。
工作原理:
基于細胞膜的電特性(膜電容和膜電阻),,當不同大小和活性的細胞隨懸浮液流經(jīng)廣頻(0-30 MHz)交流電場時將產(chǎn)生不同的電阻抗信號,經(jīng)解析獲得細胞的濃度,、數(shù)量,、活性及大小等信息。如下圖所示:A)細胞在不同頻率的交流電場中的檢測結(jié)果:低頻電場反映細胞的體積特性即電直徑,,高頻電場反映細胞的介電特性即細胞活性,;B) 微流控芯片;C)細胞電阻抗信號(藍色實部即電阻信號,,綠色虛部即容性電抗信號),,細胞膜完整性決定容性電抗的大小,故可通過虛部信號來區(qū)分活細胞和死細胞,,最終以阻抗相位角-振幅散點圖反映出來,。
Ampha X30信號的采集和轉(zhuǎn)導(dǎo)
應(yīng)用領(lǐng)域:
細胞發(fā)育研究:細胞分化、衰老,、凋亡及癌變等生理狀態(tài)
微生物發(fā)酵:酒飲品的釀造,、生物燃料的生產(chǎn)、奶酪/酸奶的生產(chǎn),、疫苗等藥物的生產(chǎn)
生物醫(yī)學(xué):腫瘤診斷,、腫瘤機制研究、細胞信號調(diào)控,、細胞免疫,、臨床即時診斷
藥物/毒理分析:毒性/藥性應(yīng)激反應(yīng)、藥篩/藥物降解,、病毒滴定,、材料安全檢測
混濁、不透明或自發(fā)熒光介質(zhì):牛奶/其他食品基質(zhì),、乳狀液,、金屬工作液、自發(fā)熒光介質(zhì)(如微藻)等,。
高精確度:
圖3. 感染桿狀病毒(BV)后Sf9昆蟲細胞的變化(Ampha X30與Countess™自動細胞計數(shù)儀)
應(yīng)用案例分享:
微生物發(fā)酵在線監(jiān)測
微生物發(fā)酵過程中,,菌種的生產(chǎn)性能、培養(yǎng)基的配比,、原料的質(zhì)量,、滅菌條件、發(fā)酵條件等均影響著發(fā)酵結(jié)果的好壞,。在此過程中,,密切關(guān)注酵母活力和酵母密度是控制和改進發(fā)酵過程的關(guān)鍵,。
微生物發(fā)酵過程中,利用Ampha X30在線監(jiān)測酵母細胞濃度和活力隨時間的變化(圖1,,細胞濃度-灰色,,細胞活力-藍色),能夠間接反映出反應(yīng)器中發(fā)酵條件的變化,,結(jié)果表明酵母細胞的總體密度隨發(fā)酵時間持續(xù)增長,,但細胞活性卻先逐漸降低后又逐漸升高,其中發(fā)酵后的第11個小時活性標準(圖2),。Ampha X30對發(fā)酵過程的監(jiān)測不僅顯示出滯后階段和早期對數(shù)階段,,而且揭示了酵母細胞在進入指數(shù)增長對數(shù)階段之前的活力損失。
釀酒酵母活性檢測:
啤酒釀造過程中酵母菌種,、酵母接種量,、酵母使用代數(shù)、發(fā)酵工藝條件等都會影響啤酒的風(fēng)味,。Ampha X30能夠在啤酒釀造生產(chǎn)過程,,高通量、快速,、精準監(jiān)控啤酒酵母細胞的活力,、濃度、代謝,、繁殖和健康狀態(tài),,實時評估溫度、滲透壓,、培養(yǎng)條件等因素對酵母菌的影響,進而及時優(yōu)化發(fā)酵工藝,。
啤酒釀造過程中酵母菌密度,、活性及酒精濃度的變化
該案例分析了啤酒釀造過程中,啤酒酵母菌密度,、活性及酒精濃度的變化,。如圖所示發(fā)酵1天后 (紅),酵母細胞從滯后期進入早期指數(shù)(對數(shù))期,;第1-2天為發(fā)生細胞顯著增殖的指數(shù)生長期 (綠),;第3天,由于細胞的劇烈增殖和營養(yǎng)物質(zhì)的耗盡,,高相位酵母群逐漸向低相位移動(紅-綠-藍,,活力逐漸降低)。該過程反映了發(fā)酵罐中酵母活性及發(fā)酵條件的變化,,即發(fā)酵初期酵母細胞濃度低,、活力低且發(fā)酵罐中存在大量氧氣,,當發(fā)酵罐中的氧氣全部消耗完后,酵母細胞轉(zhuǎn)入?yún)捬醢l(fā)酵產(chǎn)生乙醇,,乙醇濃度迅速增加并逐漸對酵母細胞產(chǎn)生毒性,,導(dǎo)致酵母細胞活性降低。
腫瘤細胞凋亡進程:
Staurosporine誘導(dǎo)下BL2細胞的凋亡過程
腫瘤細胞培養(yǎng)是研究癌變機理,、抗癌藥檢測,、癌分子生物學(xué)極其重要的手段,監(jiān)測藥物對腫瘤細胞的影響對闡明和解決癌癥將起著不可估量的作用,。該案例研究了Staurosporine對BL2淋巴瘤細胞的影響,。從圖中可以看出,在Staurosporine處理1小時后,,BL2細胞活性(藍)顯著下降,,而對照組(黑)BL2細胞在10小時內(nèi)始終保持高活性,之后才逐漸下降,。Ampha X30實時微流控阻抗流式細胞儀無需進行細胞的染色,、標記或培養(yǎng),可在腫瘤細胞培養(yǎng)過程中隨時檢測腫瘤細胞生理特性的變化,,準確評估腫瘤細胞對凋亡誘導(dǎo)劑,、細胞毒劑的劑量反應(yīng)或分化、凋亡進程,。
CHO細胞發(fā)育變化
人體和動物細胞,,特別是哺乳動物細胞,在藥物研究,、藥效表達,、臨床診斷等應(yīng)用中發(fā)揮著重要作用。哺乳動物細胞常被用于生產(chǎn)抗體,、蛋白質(zhì),、疫苗、再生醫(yī)學(xué)等領(lǐng)域,,中國倉鼠卵巢細胞(CHO)是目前全球研究較多的一種表達系統(tǒng),,在生物制藥領(lǐng)域中應(yīng)用較為廣泛。
本案例利用Ampha X30監(jiān)測了CHO細胞在三周內(nèi)的發(fā)育變化,,上圖為第4天(藍色),、9天(紅色)和19天(綠色)的CHO細胞相位角-振幅散點疊加圖,散點圖左下方的小群體代表死亡細胞,,而右側(cè)的大群體代表活性細胞,,從疊加圖中可以看到CHO細胞活性在前9天里并未發(fā)生變化,而在第19天,散點圖顯著向較低相位角偏移,,這表明由于缺乏底物CHO細胞逐漸失去活性,。
Sf9昆蟲細胞BV感染后活性變化
基于昆蟲桿狀病毒表達系統(tǒng)自身的特點和優(yōu)勢,目前已被廣泛應(yīng)用于藥物研發(fā),、疫苗生產(chǎn),、重組病毒殺蟲劑等眾多領(lǐng)域。Ampha X30實時微流控阻抗流式細胞分析儀可幫助在昆蟲細胞BV感染過程中檢測細胞活力變化,、確定多重性感染(MOI)范圍,、篩選理想的表達條件并預(yù)測BV昆蟲細胞系統(tǒng)中收獲胞內(nèi)蛋白的最佳時間。
如案例所示,,Sf9昆蟲細胞在感染BV后的數(shù)小時(hpi)內(nèi),,Ampha X30細胞分析儀所獲得的相位-振幅散點圖可明顯分離出三個細胞類群,分為是活細胞(viable),、感染晚期(LPI)和死細胞(dead)類群,。感染48hpi后,活細胞的阻抗振幅降低(細胞)且數(shù)量逐漸減少,,直至99hpi細胞全部死亡,。感染晚期(LPI)細胞類群出現(xiàn)在較低相位,這部分細胞在0-60hpi逐漸增加隨后減少直至消失,。
腫瘤藥物藥效評估
腫瘤患者來源的異種移植(PDX)是進行藥物敏感性和毒性評估的有效手段,,對預(yù)測療效十分重要。在藥物處理下分泌到培養(yǎng)基中的亞細胞凋亡小體(ABs)和微泡(MVs),,可作為藥物敏感性的標志物,。目前,實體瘤的體外藥物敏感性評估主要通過:一,、對貼壁細胞進行顯微鏡鏡檢分析ABs細胞的數(shù)量和形狀,;二、流式細胞儀測量統(tǒng)計凋亡條件下ABs和細胞的數(shù)量,,并根據(jù)熒光染色結(jié)果鑒定細胞大小并進行分類,。然而由于ABs復(fù)雜多樣,很難確定每種AB型的適配熒光染料并預(yù)估ABs對不同染料滲透動力學(xué)的依賴性,,因此利用流式細胞儀量化細胞分解過程存在極大的挑戰(zhàn)。
該研究通過不同方法評估了不同藥物濃度下PDAC細胞系的凋亡變化,,結(jié)果表明可在不同的腫瘤微環(huán)境模型和藥物類型下高通量,、非標記、快速無損檢測ABs表型并追蹤細胞凋亡過程,,進而準確評估藥物敏感性和毒性,,是一個測量單細胞電生理學(xué)特性的有效工具,不僅免除了費力耗力的細胞收集和染色標記過程,還可避免因染色不當所造成的細胞凋亡,。
納米材料毒性評估
納米材料廣泛應(yīng)用于工業(yè),、農(nóng)業(yè)、食品,、日用品,、醫(yī)藥等各個領(lǐng)域的同時,已不可避免的給我們的環(huán)境和健康帶來不利影響,。因此,,為確保納米材料的安全性,促進納米技術(shù)的發(fā)展,,進行納米材料毒性評估十分必要且緊迫,。Ampha X30可以非標記、高通量,、快速評估納米材料的毒性,,避免假陰性或假陽性的檢測結(jié)果,是一種可靠且經(jīng)濟高效的檢測方法,。
微藻培養(yǎng)生產(chǎn)脂肪酸
微藻培養(yǎng)生產(chǎn)脂肪酸是一個復(fù)雜但有前景的生物技術(shù)過程,。與其他類型的細胞相比,微藻細胞體積較小且具有自發(fā)熒光,,傳統(tǒng)光學(xué)分析方法難度極大,。Ampha X30基于細胞本身的電特性,不受自身熒光或細胞大小的影響,,可以有效監(jiān)測生物反應(yīng)器中脂肪酸的過生產(chǎn)過程,,幫助篩選合適的微藻種類、優(yōu)化培養(yǎng)條件(如光照,、溫度,、營養(yǎng)鹽濃度等)以實現(xiàn)高效、可持續(xù)的脂肪酸生產(chǎn),。
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