魚油產(chǎn)品中EPA,、DHA含量測定氣相色譜儀食品脂肪酸分析色譜分析儀

魚油產(chǎn)品中EPA、DHA含量測定氣相色譜儀食品脂肪酸分析色譜分析儀

普瑞GC-9280型氣相色譜分析法通過新的樣品處理方法和相應(yīng)色譜條件的選擇,，實現(xiàn)對魚油等保健品中EPA,、DHA的含量測定。普瑞GC-9280型氣相色譜分析法通過直接加入2,，6-二叔丁基對甲酚(bht)、內(nèi)標(biāo)二十三酸甲酯,、鹽類物質(zhì)來配置標(biāo)準(zhǔn)品和樣品溶液,，直接進(jìn)樣進(jìn)行測定。通過對此方法做了方法學(xué)驗證,，專屬性好,，無雜質(zhì)干擾；線性關(guān)系：r2＝0.9998,；精密度6針EPA含量rsd為0.49％,，DHA含量rsd為0.36％；回收率EPA達(dá)到99.5％,，DHA達(dá)到99.7％,。各項驗證指標(biāo)良好，均符合法規(guī)要求,。且本方法測定簡便易行,，適用于工業(yè)生產(chǎn)中不同批次魚油樣品的測定。

作為優(yōu)選,，樣品溶液的配制方法：

魚油原料：稱取20mg樣品于玻璃瓶中,，按照衍生化部分描述進(jìn)行操作；

魚油軟膠囊：取20粒軟膠囊的內(nèi)容物于一燒杯中,，充分混合,，確保不分層,，然后按照衍生化部分描述進(jìn)行操作。

與現(xiàn)有技術(shù)相比,，普瑞GC-9280型氣相色譜分析法具有如下顯著優(yōu)點：

1,、普瑞GC-9280型氣相色譜分析法是以GC法測定魚油中EPA和DHA的含量，而且此GC法適用于軟膠囊,、魚油原料中EPA和DHA含量的測定,。

2、普瑞GC-9280型氣相色譜分析法先用20g/l氫氧化鈉-甲醇溶液與樣品進(jìn)行皂化反應(yīng)后,，再用甲醇溶液與樣品溶液進(jìn)行反應(yīng),，可甲酯化樣品。

3,、用bht異辛烷溶液溶解樣品,，除易于溶解相應(yīng)樣品外，bht還能起到抗氧化作用,，減少樣品處理過程中的損失,。

4、內(nèi)標(biāo)法的運用,，保證檢測結(jié)果的準(zhǔn)確,。

5、色譜柱選擇hpinnowax,，30m×0.25mm,，0.25μm,能更好的對組分進(jìn)行分離的同時，節(jié)約儀器運行時間,。

6,、根據(jù)魚油中各組分沸點的不同，對柱溫溫度進(jìn)行選擇,，能更好分離樣品,，節(jié)約儀器運行時間。

以下所用試品及試劑：

試劑：丁羥甲苯(bht)：分析純,；二十三酸甲酯：標(biāo)準(zhǔn)品,；氫氧化鈉：分析純,；甲醇：色譜級,；14％甲醇溶液：分析純；異辛烷：色譜級,；氯化鈉：分析純,；分析純,；水：超純水。

標(biāo)準(zhǔn)品：EPA甲酯批號：bcbm9475v,，純度：≥98.5％,，來源：sigma-aldrich

DHA甲酯批號：bcbn2286v,，純度：≥98.5％，來源：sigma-aldrich,；

樣品：1.魚油軟膠囊,，2.魚油原料，

例1魚油軟膠囊中EPA,、DHA含量的測定

魚油軟膠囊EPA和DHA含量的測定：

(1)bht溶液

取50mgbht溶于1000ml異辛烷,。

(2)內(nèi)標(biāo)溶液

精密稱取150mg二十三酸甲酯于25ml容量瓶，用bht溶解,，并稀釋至刻度,。

(3)對照品溶液的配制：

分別精密稱取16mgEPA標(biāo)準(zhǔn)品、12mgDHA標(biāo)準(zhǔn)品于10ml容量瓶,，用內(nèi)標(biāo)溶液溶解,，并稀釋至刻度線。

(4)樣品處理：

成品(軟膠囊)：取20粒軟膠囊的內(nèi)容物于一燒杯中,，充分混合,，確保不分層。然后按照衍生化部分描述進(jìn)行操作,。

(5)衍生化：

移取2.0ml內(nèi)標(biāo)溶液于每一玻璃瓶中,，氮氣吹干；加入1.5ml20g/l的氫氧化鈉-甲醇溶液,，擰緊聚四氟乙烯瓶帽,；水浴加熱并攪拌7min。冷卻至室溫,；加2ml甲醇溶液，擰緊瓶帽,；水浴加熱,，并時時振搖30min；冷卻至40～50℃,，加入1ml異辛烷,；轉(zhuǎn)移溶液至20ml試管；加蓋,，并快速振搖30s,；立刻加入5ml飽和氯化鈉溶液于玻璃瓶中；加蓋,，振搖15s,；轉(zhuǎn)移上層液于10ml試管；用1ml異辛烷重復(fù)萃??；分兩次用1ml水沖洗異辛烷層,；干燥，得到待檢測樣品溶液,。

(6)采用氣相色譜儀對樣品進(jìn)行檢測：

色譜條件：進(jìn)樣量1μl,，

a)色譜柱：hpinnowax，30m×0.25mm,，0.25μm,；

b)載氣：氮氣；

c)柱溫：170℃,，保持5min,；1.5℃/min至188℃保持2min；1.0℃/min

至212℃,；5.0℃/min至230℃保持10min,；

d)進(jìn)樣口溫度：250℃；

e)檢測器溫度：280℃,；

f)分流比：75:1,；

g)進(jìn)樣體積：1μl；

h)流速：1.0ml/min,；

i)氫氣流速：40ml/min,；

j)空氣流速：400ml/min。

(7)根據(jù)峰面積及計算公式計算,，得到樣品EPA和DHA的含量：

式中：

樣品比率(EPA,，DHA)------樣品的峰面積(EPA，DHA)/內(nèi)標(biāo)峰面積(EPA,，DHA),；

標(biāo)準(zhǔn)品比率(EPA，DHA)-------標(biāo)準(zhǔn)品的峰面積(EPA,，DHA)/內(nèi)標(biāo)峰面積(EPA,，DHA)。

儀器特點

(1) 采用了技術(shù)先進(jìn)的百兆/千兆以太網(wǎng)通信接口,、并內(nèi)置IP協(xié)議棧,、使儀器可以通過企業(yè)內(nèi)部局域網(wǎng)、互聯(lián)網(wǎng)實現(xiàn)遠(yuǎn)距離的數(shù)據(jù)傳輸,；方便實驗室的架設(shè),、簡化實驗室的配置、方便分析數(shù)據(jù)的管理,；

(2) 儀器內(nèi)部設(shè)計3個獨立的連接IP地址,，可以連接到工作電腦（實驗室現(xiàn)場）、分管電腦（如質(zhì)檢科,、生產(chǎn)部等）,、以及高管電腦（如環(huán)保局,、技術(shù)監(jiān)督局等），需要時可實時監(jiān)控儀器的運行以及分析數(shù)據(jù)結(jié)果,；

(3) 儀器配備的專用工作站可以同時支持多臺色譜儀接入,，實現(xiàn)數(shù)據(jù)處理以及儀器反向控制，簡化文檔管理,；

(4) 儀器可以通過互聯(lián)網(wǎng)連接到生產(chǎn)廠家,，實現(xiàn)遠(yuǎn)程診斷、遠(yuǎn)程更新等（需用戶設(shè)置）,；

(5) 儀器配備的8吋彩色液晶觸摸屏,，支持熱插拔，可作手持控制器使用,；

(6) 儀器采用了多處理器并行工作方式,，使儀器更加穩(wěn)定可靠；可選配多種高性能檢測器選擇,，如FID,、TCD、ECD,、FPD和NPD,，最多可同時安裝三個檢測器，滿足復(fù)雜樣品的分析需求,。
儀器采用模塊化的結(jié)構(gòu)設(shè)計,，后期維護(hù)簡單方便。

(7) 全新的微機溫度控制系統(tǒng),，控溫精度高,，可靠性和抗干擾；具有八路獨立的溫度控制輸出,，可實現(xiàn)二十階程序升溫,，具有柱箱自動后開門系統(tǒng)，近室溫控制能力得到提高,，升/降溫速度更快,；

(8) 色譜機內(nèi)置低噪聲,、高分辨率24位AD電路,，并具有基線存儲、基線扣除的功能,。

技術(shù)指標(biāo)

操作顯示：彩色液晶觸摸屏

溫控區(qū)域：8路

外部事件：8路,；輔助控制輸出2路

進(jìn)樣器種類：填充柱進(jìn)樣、毛細(xì)管進(jìn)樣,、六通閥氣體進(jìn)樣,、自動進(jìn)樣器

檢測器數(shù)目：3個（最多）,；FID、TCD,、ECD,、FPD和NPD任選

啟動進(jìn)樣：手動、自動可選

通信接口：以太網(wǎng)：IEEE802.3

溫度控制

柱室溫度,；

控溫范圍：室溫加+3℃～399℃,。

控溫精度：優(yōu)于±0.1℃。

溫度梯度：室溫加+3℃～399℃,，柱室有效區(qū)域內(nèi)不大于1%,。

設(shè)定溫度與指示溫度之間偏差不大于1℃。

設(shè)定溫度和實際溫度之間的偏差不大于2%,。

最高升溫階數(shù)：20階,。

設(shè)定升溫速率：0.1～60℃/min。

線性程序升溫范圍：

每分種30℃時為150℃,。

每分種15℃時為300℃,。

每分種10℃時為350℃。

初溫終溫控制時間：0～600min,。

程序升溫的重復(fù)性不大于2%,。

降溫速度：由300℃降至50℃所需時間不大于10min。（其它檢測器溫度升至300℃）,。

汽化室,、檢測室溫度

控溫精度：

汽化室：±0.1℃（室溫+5℃至200℃以內(nèi)），200℃以上為±0.2℃,。

檢測室：±0.1℃（室溫+5℃至200℃以內(nèi)）,，200℃以上為±0.2℃。

設(shè)定溫度與指示溫度之間的偏差不大于1℃,。

閥配置系統(tǒng)

最多搭載8自動控制個閥,，可自動序列運行(四通閥、六通閥,、十通閥以及液體進(jìn)樣閥可選)

可裝側(cè)閥箱,、獨立小柱箱

輔助電子流路控制模塊（可壓力/流量控制模式）

零泄漏吹掃技術(shù)

高速切換電磁閥壽命長(100萬次，10mS)

檢測器技術(shù)指標(biāo)

氫火焰離子化檢測器（FID）

檢測限：≤1.9pgC/s [n-C16]

基線噪聲：≤1PA

基線漂移：≤1PA/30min

線性范圍： ≥107(±10%)

數(shù)據(jù)采集頻率100Hz