CAEQ-4-019028-1000 HPLC色譜純?nèi)軇?正戊烷
具體成交價(jià)以合同協(xié)議為準(zhǔn)
- 公司名稱 上海安譜實(shí)驗(yàn)科技股份有限公司
- 品牌 CNW
- 型號(hào) CAEQ-4-019028-1000
- 產(chǎn)地
- 廠商性質(zhì) 生產(chǎn)廠家
- 更新時(shí)間 2024/12/24 16:06:46
- 訪問次數(shù) 1430
聯(lián)系方式:Anpel15618996369 查看聯(lián)系方式
聯(lián)系我們時(shí)請(qǐng)說明是化工儀器網(wǎng)上看到的信息,,謝謝!
供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 化工 |
---|
HPLC,,≥99.9%
通常來說,HPLC對(duì)流動(dòng)相的基本要求是∶①與固定相不互溶,,不發(fā)生化學(xué)反應(yīng);②對(duì)樣品有適宜的溶解度,,要求k值在1~10范圍內(nèi)(可用范圍)或2~5(最佳范圍),溶解度太大,,k值太小,,不利于分離;溶解度太小,k值太大,,可能使樣品在流動(dòng)相中產(chǎn)生沉淀;⑧必須與檢測器相適應(yīng),。例如用紫外檢測器,流動(dòng)相本身在檢測波長處應(yīng)無吸收;④流動(dòng)相的粘度要小,,可以降低色語柱的阻力而提高柱效;⑤純度高,,不含機(jī)械雜質(zhì)。
高效液相色譜流動(dòng)相的選擇及注意事項(xiàng)如下:
1,、流動(dòng)相的性質(zhì)要求,。一個(gè)理想的流動(dòng)相溶劑應(yīng)具有低粘度、與檢測器兼容性好,、易于得到純品和低毒性等特征,。選好填料(固定相)后,強(qiáng)溶劑使溶質(zhì)在填料表面的吸附減少,,相應(yīng)的容量因子k降低;而蛟弱的溶劑使溶質(zhì)在填料表面吸附增加,,相應(yīng)的容量因子k升高。理論塔板數(shù)N一般與流動(dòng)相的粘度成反比,。所以選擇流動(dòng)相時(shí)應(yīng)從以下幾個(gè)方面考慮∶@流動(dòng)相不得改變填料的任何性質(zhì),。低交聯(lián)度的離子交換樹脂和排阻色譜填料有時(shí)遇到某些有機(jī)相會(huì)溶脹或收縮,,從而改變色諾柱填床的性質(zhì)。堿性流動(dòng)相不能用于硅膠柱系統(tǒng),。酸性流動(dòng)相不能用于氧化鋁,、氧化鎂等吸附劑的柱系統(tǒng)。②純度,。色諾柱的壽命與流動(dòng)相有較大的關(guān)系,,特別是其所含雜質(zhì)在柱上有大量沉積的溶劑。③與檢測圈匹配,。使用紫外檢測器時(shí),,所用流動(dòng)相在檢測波長下不得有吸收,或吸收很小,。④粘度要低,。高粘度溶劑會(huì)影響溶質(zhì)的擴(kuò)散、傳質(zhì),,降低柱效,,還會(huì)使柱壓增加,分離時(shí)間延長,。最好選擇沸點(diǎn)在100C以下的流動(dòng)相,。
2、流動(dòng)相的pH值,。采用反相色譜法分離弱酸或弱堿樣品時(shí),,通過調(diào)節(jié)流動(dòng)相的pH值,以抑制樣品組分的解離,,增加組分在固定相上的保留,,并改善峰形的技術(shù)稱為反相離子抑制技術(shù)。對(duì)于弱酸,,流動(dòng)相的pH值越小,,組分的k值越大,當(dāng)pH值遠(yuǎn)遠(yuǎn)小于弱酸的pKa值時(shí),,弱酸主要以分子形式存在;對(duì)弱堿,,情況相反。分析弱酸樣品時(shí),,通常在流動(dòng)相中加入少量弱酸,,常用50mmol/L磷酸鹽緩沖液和1%酣酸溶液;分析弱堿樣品時(shí),通常在流動(dòng)相中加入少量弱堿,,常用50mmol/L磷酸鹽緩沖液和30mmol/L三乙胺溶液,。
3、流動(dòng)相的選擇,。在化學(xué)鍵合相色譜法中,,溶劑的洗脫能力直接與它的極性相關(guān),。在正相色諾中,溶劑的強(qiáng)度隨極性的增強(qiáng)而增加﹔通常采用烷經(jīng)加適量極性調(diào)整劑,。反相色譜的流動(dòng)相通常以水作基礎(chǔ)溶劑,,再加入一定量的能與水互溶的極性調(diào)整劑,如甲醇,、乙腈等,,極性調(diào)整劑的性質(zhì)及其所占比例對(duì)溶質(zhì)的保留值和分離選擇性有顯著影響。一般情況下,,甲醇-水系統(tǒng)能滿足多數(shù)樣品的分離要求,且粘度小,、價(jià)格低,,是反相色譜常用的流動(dòng)相.
4、流動(dòng)相的就過,。所有溶劑使用前都必須經(jīng)0.45um濾膜濾過,,以除去雜質(zhì),色譜純?cè)噭┮膊焕?。用速膜過跳時(shí),,特別要注意分清有機(jī)相濾膜和水相濾膜。有機(jī)相濾膜一般用于過濾有機(jī)溶劑,,過濾水溶液時(shí)流速低或?yàn)V不動(dòng),。水相濾膜只能用于過濾水溶液,嚴(yán)禁用于有機(jī)溶劑,,否則濾膜會(huì)被溶解,。溶有速膜的溶劑不得用于HPLC,對(duì)于混合流動(dòng)相,,可在混合前分別越過,,如需混合后疏過,選有機(jī)相旎膜,。對(duì)于冰箱過夜保存的流動(dòng)相,,在使用前仍建議過濾后再使用。
5,、流動(dòng)相的脫氣,,所用流動(dòng)相必須先脫氣,否則容易產(chǎn)生氣泡,,影響泵的正常工作,。氣泡還會(huì)影響柱的分離效率,影響檢測器的靈敏度,、基線穩(wěn)定性,,甚至無法檢測,。此外,溶解在流動(dòng)相中的氧還可能與樣品,、流動(dòng)相甚至固定相反應(yīng),。溶解氣體還會(huì)引起溶劑pH值的變化,結(jié)果容易產(chǎn)生誤差,。溶解氧能與某些溶劑(如甲醇,、四氫味喃)形成有紫外吸收的絡(luò)合物,此絡(luò)合物會(huì)提高背景吸收,,并導(dǎo)致檢測靈敏度的輕微降低,,但更重要的是,會(huì)在梯度淋洗時(shí)造成基線漂移,。超聲脫氣比較好,,20分鐘的脫氣時(shí)間基本上就夠了。
6,、流動(dòng)相的制備,。用高純度的試劑配制流動(dòng)相,必要時(shí)照紫外分光光度法進(jìn)行溶劑檢查,,應(yīng)符合要求,,水應(yīng)為新鮮制備的高純水,利用超級(jí)純水圈制得或用重蒸餾水,。凡規(guī)定pH值的流動(dòng)相應(yīng)使用精密pH計(jì)進(jìn)行調(diào)節(jié),。應(yīng)配制足量的流動(dòng)相備用.
7、流動(dòng)相的貯存,。流動(dòng)相一般貯存于玻璃,、聚四氟乙烯或不銹鋼容器內(nèi),不能貯存在塑料容圈中,。因許多有機(jī)溶劑如甲醇,、乙酸等可浸出塑料表面的增塑劑,導(dǎo)致溶劑受污染,。這種被污染的溶劑如用于HPLC系統(tǒng),,可能造成柱效降低。貯存容器一定要蓋嚴(yán),,防止溶劑揮發(fā)引起組成變化,,也防止氧和二氧化碳溶入流動(dòng)相。磷酸鹽.乙酸鹽緩沖液很易長霉,,應(yīng)盡量新鮮配制使用,。
通常來說,HPLC對(duì)流動(dòng)相的基本要求是∶①與固定相不互溶,,不發(fā)生化學(xué)反應(yīng);②對(duì)樣品有適宜的溶解度,,要求k值在1~10范圍內(nèi)(可用范圍)或2~5(最佳范圍),溶解度太大,,k值太小,,不利于分離;溶解度太小,k值太大,,可能使樣品在流動(dòng)相中產(chǎn)生沉淀;⑧必須與檢測器相適應(yīng),。例如用紫外檢測器,流動(dòng)相本身在檢測波長處應(yīng)無吸收;④流動(dòng)相的粘度要小,,可以降低色語柱的阻力而提高柱效;⑤純度高,,不含機(jī)械雜質(zhì)。
高效液相色譜流動(dòng)相的選擇及注意事項(xiàng)如下:
1,、流動(dòng)相的性質(zhì)要求,。一個(gè)理想的流動(dòng)相溶劑應(yīng)具有低粘度、與檢測器兼容性好,、易于得到純品和低毒性等特征,。選好填料(固定相)后,強(qiáng)溶劑使溶質(zhì)在填料表面的吸附減少,,相應(yīng)的容量因子k降低;而蛟弱的溶劑使溶質(zhì)在填料表面吸附增加,,相應(yīng)的容量因子k升高。理論塔板數(shù)N一般與流動(dòng)相的粘度成反比,。所以選擇流動(dòng)相時(shí)應(yīng)從以下幾個(gè)方面考慮∶@流動(dòng)相不得改變填料的任何性質(zhì),。低交聯(lián)度的離子交換樹脂和排阻色譜填料有時(shí)遇到某些有機(jī)相會(huì)溶脹或收縮,,從而改變色諾柱填床的性質(zhì)。堿性流動(dòng)相不能用于硅膠柱系統(tǒng),。酸性流動(dòng)相不能用于氧化鋁,、氧化鎂等吸附劑的柱系統(tǒng)。②純度,。色諾柱的壽命與流動(dòng)相有較大的關(guān)系,,特別是其所含雜質(zhì)在柱上有大量沉積的溶劑。③與檢測圈匹配,。使用紫外檢測器時(shí),,所用流動(dòng)相在檢測波長下不得有吸收,或吸收很小,。④粘度要低,。高粘度溶劑會(huì)影響溶質(zhì)的擴(kuò)散、傳質(zhì),,降低柱效,,還會(huì)使柱壓增加,分離時(shí)間延長,。最好選擇沸點(diǎn)在100C以下的流動(dòng)相,。
2、流動(dòng)相的pH值,。采用反相色譜法分離弱酸或弱堿樣品時(shí),,通過調(diào)節(jié)流動(dòng)相的pH值,以抑制樣品組分的解離,,增加組分在固定相上的保留,,并改善峰形的技術(shù)稱為反相離子抑制技術(shù)。對(duì)于弱酸,,流動(dòng)相的pH值越小,,組分的k值越大,當(dāng)pH值遠(yuǎn)遠(yuǎn)小于弱酸的pKa值時(shí),,弱酸主要以分子形式存在;對(duì)弱堿,,情況相反。分析弱酸樣品時(shí),,通常在流動(dòng)相中加入少量弱酸,,常用50mmol/L磷酸鹽緩沖液和1%酣酸溶液;分析弱堿樣品時(shí),通常在流動(dòng)相中加入少量弱堿,,常用50mmol/L磷酸鹽緩沖液和30mmol/L三乙胺溶液,。
3、流動(dòng)相的選擇,。在化學(xué)鍵合相色譜法中,,溶劑的洗脫能力直接與它的極性相關(guān),。在正相色諾中,溶劑的強(qiáng)度隨極性的增強(qiáng)而增加﹔通常采用烷經(jīng)加適量極性調(diào)整劑,。反相色譜的流動(dòng)相通常以水作基礎(chǔ)溶劑,,再加入一定量的能與水互溶的極性調(diào)整劑,如甲醇,、乙腈等,,極性調(diào)整劑的性質(zhì)及其所占比例對(duì)溶質(zhì)的保留值和分離選擇性有顯著影響。一般情況下,,甲醇-水系統(tǒng)能滿足多數(shù)樣品的分離要求,且粘度小,、價(jià)格低,,是反相色譜常用的流動(dòng)相.
4、流動(dòng)相的就過,。所有溶劑使用前都必須經(jīng)0.45um濾膜濾過,,以除去雜質(zhì),色譜純?cè)噭┮膊焕?。用速膜過跳時(shí),,特別要注意分清有機(jī)相濾膜和水相濾膜。有機(jī)相濾膜一般用于過濾有機(jī)溶劑,,過濾水溶液時(shí)流速低或?yàn)V不動(dòng),。水相濾膜只能用于過濾水溶液,嚴(yán)禁用于有機(jī)溶劑,,否則濾膜會(huì)被溶解,。溶有速膜的溶劑不得用于HPLC,對(duì)于混合流動(dòng)相,,可在混合前分別越過,,如需混合后疏過,選有機(jī)相旎膜,。對(duì)于冰箱過夜保存的流動(dòng)相,,在使用前仍建議過濾后再使用。
5,、流動(dòng)相的脫氣,,所用流動(dòng)相必須先脫氣,否則容易產(chǎn)生氣泡,,影響泵的正常工作,。氣泡還會(huì)影響柱的分離效率,影響檢測器的靈敏度,、基線穩(wěn)定性,,甚至無法檢測,。此外,溶解在流動(dòng)相中的氧還可能與樣品,、流動(dòng)相甚至固定相反應(yīng),。溶解氣體還會(huì)引起溶劑pH值的變化,結(jié)果容易產(chǎn)生誤差,。溶解氧能與某些溶劑(如甲醇,、四氫味喃)形成有紫外吸收的絡(luò)合物,此絡(luò)合物會(huì)提高背景吸收,,并導(dǎo)致檢測靈敏度的輕微降低,,但更重要的是,會(huì)在梯度淋洗時(shí)造成基線漂移,。超聲脫氣比較好,,20分鐘的脫氣時(shí)間基本上就夠了。
6,、流動(dòng)相的制備,。用高純度的試劑配制流動(dòng)相,必要時(shí)照紫外分光光度法進(jìn)行溶劑檢查,,應(yīng)符合要求,,水應(yīng)為新鮮制備的高純水,利用超級(jí)純水圈制得或用重蒸餾水,。凡規(guī)定pH值的流動(dòng)相應(yīng)使用精密pH計(jì)進(jìn)行調(diào)節(jié),。應(yīng)配制足量的流動(dòng)相備用.
7、流動(dòng)相的貯存,。流動(dòng)相一般貯存于玻璃,、聚四氟乙烯或不銹鋼容器內(nèi),不能貯存在塑料容圈中,。因許多有機(jī)溶劑如甲醇,、乙酸等可浸出塑料表面的增塑劑,導(dǎo)致溶劑受污染,。這種被污染的溶劑如用于HPLC系統(tǒng),,可能造成柱效降低。貯存容器一定要蓋嚴(yán),,防止溶劑揮發(fā)引起組成變化,,也防止氧和二氧化碳溶入流動(dòng)相。磷酸鹽.乙酸鹽緩沖液很易長霉,,應(yīng)盡量新鮮配制使用,。