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化工儀器網(wǎng)>產(chǎn)品展廳>試劑標(biāo)物>細(xì)胞生物學(xué)試劑>原代細(xì)胞> 兔腎周肌成纖維細(xì)胞

兔腎周肌成纖維細(xì)胞

參考價(jià)4750.00
具體成交價(jià)以合同協(xié)議為準(zhǔn)
  • 公司名稱 上海撫生實(shí)業(yè)有限公司
  • 品牌其他品牌
  • 型號(hào)
  • 所在地上海市
  • 廠商性質(zhì)生產(chǎn)廠家
  • 更新時(shí)間2025/4/9 10:53:01
  • 訪問(wèn)次數(shù) 291
規(guī)格
5×10^54750.00元15 瓶可售

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上海撫生實(shí)業(yè)有限公司(Shanghai Fusheng Industrial Co., Ltd.,,China)是一家生物企業(yè),主要從事免疫學(xué),、分子生物學(xué)和常規(guī)生化試劑的銷售。主營(yíng)產(chǎn)品:生化試劑,、試劑盒,、ELISA試劑盒、抗體,、重組蛋白、生化檢測(cè)試劑盒,、分光光度法檢測(cè)試劑盒,、熒光定量PCR檢測(cè)試劑盒、細(xì)胞株,、原代細(xì)胞,、細(xì)胞培養(yǎng)基、標(biāo)準(zhǔn)溶液產(chǎn)品,。代理并銷售進(jìn)口SIGMA試劑,、abcam抗體、R&D抗體,、CST抗體,、ATCC細(xì)胞、BD公司,、GE公司,、賽默飛世爾公司產(chǎn)品。


上海撫生實(shí)業(yè)有限公司(Shanghai Fusheng Industrial Co., Ltd.,,China)

先后與天津中醫(yī)學(xué)院,、復(fù)旦大學(xué)、上海交通大學(xué)醫(yī)學(xué)院,、上海交通大學(xué),、華東師范大學(xué)、第二軍醫(yī)大學(xué),、南京大學(xué),,暨南大學(xué),南京工業(yè)大學(xué),,曙光醫(yī)院,、華山醫(yī)院、瑞金醫(yī)院,、上海有機(jī)研究所,、中科院上海分院等多家單位建立了良好的合作關(guān)系。本公司可為您提供科研ELISA試劑盒,,種屬標(biāo)本齊全,有專門針對(duì)人血清,、血漿,、全血、分泌物,、尿液,、細(xì)胞培養(yǎng)上清液、組織勻漿,、組織液等標(biāo)本的試劑盒,;另有針對(duì)各種動(dòng)物(鼠、兔,、牛,、馬、雞,、豬,、狗、山羊,、猴,、魚(yú))的科研試劑。

公司秉承“專注品質(zhì),、信守承諾,、積極溝通、創(chuàng)新服務(wù)”的企業(yè)文化積極參與生物領(lǐng)域的技術(shù)創(chuàng)新和技術(shù)服務(wù),,力求為我國(guó)科研事業(yè)更好的,,更專業(yè)的服務(wù)!

公司售后服務(wù)宗旨:有質(zhì)量問(wèn)題可申請(qǐng)退換,,有技術(shù)疑問(wèn)可隨時(shí)給于解答,,一對(duì)一的客服服務(wù),客戶的需求也是我們不斷的更新服務(wù),。








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供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶
貨號(hào) A01X2095 主要用途 僅供科研研究實(shí)驗(yàn)
種屬來(lái)源

一,、細(xì)胞基本屬性:

細(xì)胞名稱

兔腎周肌成纖維細(xì)胞

商品貨號(hào)

A01X2095

種屬來(lái)源

產(chǎn)品規(guī)格

5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶

1.jpg

5.jpg


原代細(xì)胞實(shí)驗(yàn)步驟:

一,、取7-10d雄性SD大鼠,頸椎脫臼處死,浸泡于75%乙醇消毒3-5min,。

二,、在超凈工作臺(tái)中,將大鼠斷頭置于玻璃培養(yǎng)皿中,打開(kāi)顱腔后取出全腦,放在盛有預(yù)冷的PBS玻璃培養(yǎng)皿中,,去除小腦和間腦,。

三、將大腦半球在干濾紙上緩慢滾動(dòng)以去除軟腦膜和腦膜大血管,,再放在新的盛有預(yù)冷的PBS玻璃培養(yǎng)皿中,。

四、用細(xì)解剖鑷去除大腦白質(zhì),、殘余大血管和軟腦膜,,保留大腦皮質(zhì)。

五,、大腦皮質(zhì)放于DMEM中,,剪碎成約1mm3大小,放入50ml的離心管中,,加入混合酶液I(0.05-0 .1%II型膠原酶,0 .025-0 .05%IV型膠原酶,,200-400U DNaseI),,混勻后37℃水浴消化1-1.5h。

六,、室溫1 000×g離心8min,,去上清液。

七,、沉淀中加入20%BSA重懸浮,,充分混勻,1 000×g,,20min,,4℃離心,去上清,。

八,、沉淀加入4ml混合酶液II( 0.05-0.1%的膠原酶/分散酶,0.05-0.1%I型膠原酶,,100-300U DNaseI )重懸浮,,混勻,37℃水浴消化0.5-1h,,700×g室溫離心6min,,去上清液。

九,、沉淀加入2ml DMEM培養(yǎng)液懸浮混勻,,鋪于經(jīng)離心形成連續(xù)梯度的12ml 50%Percoll(25 000×g,60min,4℃),,1000×g,,4℃離心10min。

十,、靠近底部的紅細(xì)胞層之上的白黃色的層面即為純化的微血管段,,吸出后DMEM

漂洗兩次(離心1000×rpm,6min,,室溫),,去上清液。

加入DMEM培養(yǎng)液(20%FBS,,4ug/ml嘌呤霉素 )重懸浮,,接種于含5%的大鼠 血清37℃孵育過(guò)夜所制備的細(xì)胞培養(yǎng)皿中,置于37℃,、5%CO2培養(yǎng)箱內(nèi)靜置培養(yǎng)24h后更換不含嘌呤霉素的混合培養(yǎng)基,,隨后隔天換液。
QQ截圖20240123162116.png

公司正在出售的產(chǎn)品:
雜交瘤細(xì)胞,;1C11

小鼠雜交瘤細(xì)胞,;PyQW204E3
小鼠雜交瘤細(xì)胞;PyXQ20092B12
小鼠雜交瘤細(xì)胞,;AFG202G6
小鼠雜交瘤細(xì)胞,;AFM20092C9
小鼠雜交瘤細(xì)胞;AFG20081C8
雜交瘤細(xì)胞,;2D8F9H12
雜交瘤細(xì)胞,;1GC11B12
雜交瘤細(xì)胞;F3
雜交瘤細(xì)胞,;D6D
鼠雜交瘤細(xì)胞,;TT3B9
雜交瘤細(xì)胞;Mab-boDp1-F14
雜交瘤細(xì)胞,;6B8
雜交瘤細(xì)胞,;ETMcAb4F11
雜交瘤細(xì)胞;ETMcAb3A7
粉萆薢探針?lè)?/span>PCR鑒定試劑盒
榧子探針?lè)?/span>PCR鑒定試劑盒
防已探針?lè)?/span>PCR鑒定試劑盒
防風(fēng)探針?lè)?/span>PCR鑒定試劑盒
番瀉葉探針?lè)?/span>PCR鑒定試劑盒
法半夏探針?lè)?/span>PCR鑒定試劑盒
兒茶探針?lè)?/span>PCR鑒定試劑盒
莪術(shù)探針?lè)?/span>PCR鑒定試劑盒
杜仲探針?lè)?/span>PCR鑒定試劑盒
獨(dú)活探針?lè)?/span>PCR鑒定試劑盒
兔腎周肌成纖維細(xì)胞冬瓜皮探針?lè)?/span>PCR鑒定試劑盒
丁香探針?lè)?/span>PCR鑒定試劑盒
地榆探針?lè)?/span>PCR鑒定試劑盒

地龍?zhí)结樂(lè)?/span>PCR鑒定試劑盒
地黃探針?lè)?/span>PCR鑒定試劑盒

原代細(xì)胞使用方法:

是一種貼壁細(xì)胞,,細(xì)胞形態(tài)呈內(nèi)皮細(xì)胞樣,,在技術(shù)部標(biāo)準(zhǔn)操作流程下,細(xì)胞可傳2-3代,;建議您收到細(xì)胞后盡快進(jìn)行相關(guān)實(shí)驗(yàn),。

客戶收到細(xì)胞后,請(qǐng)按照以下方法進(jìn)行操作,。

1. 取出T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶,,用75%酒精消毒瓶身,拆下封口膜,放入37℃,、5%CO2,、飽和濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中靜置3-4h,以穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài),。

2. 貼壁細(xì)胞消化

1)吸出T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,,用PBS清洗細(xì)胞一次;

2)添加0.25%消化液1mL至T25培養(yǎng)瓶中,,輕微轉(zhuǎn)動(dòng)培養(yǎng)瓶至消化液覆蓋整個(gè)培養(yǎng)瓶底后,,吸出多余消化液,37℃溫浴1-3min,;倒置顯微鏡下觀察,,待細(xì)胞回縮變圓后,再加入5ml培養(yǎng)基終止消化,;

3)用吸管輕輕吹打混勻,,按傳代比例接種T25培養(yǎng)瓶傳代,然后補(bǔ)充新鮮的培養(yǎng)基至5mL,,置于37℃,、5%CO2、飽和濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中靜置培養(yǎng),;

4)待細(xì)胞貼壁后,培養(yǎng)觀察,;之后按照換液頻率更換新鮮的培養(yǎng)基,。

3. 細(xì)胞收貨脫落

1)收集所有細(xì)胞懸液,1000rpm,,離心5min,,保留沉淀;

2)添加0.25%消化液0.5mL至離心管中,,重懸沉淀,,放置于37℃消化3min(或4℃冰箱靜置5-7min);消化完向離心管內(nèi)加入5ml培養(yǎng)基終止消化,;

3)經(jīng)1000rpm,,離心5min,丟棄上清,,用5ml培養(yǎng)基重懸沉淀,,接種于新的培養(yǎng)瓶?jī)?nèi);

4)待細(xì)胞貼壁后,,培養(yǎng)觀察,;之后按照換液頻率更換新鮮的培養(yǎng)基(37℃預(yù)熱)。

5)原瓶?jī)?nèi)貼壁細(xì)胞按正常消化處理。

4. 細(xì)胞實(shí)驗(yàn)

因原代細(xì)胞貼壁特殊性,,貼壁的原代細(xì)胞在消化后轉(zhuǎn)移至其他實(shí)驗(yàn)器皿(如玻璃爬片,、培養(yǎng)板、共聚焦培養(yǎng)皿等)時(shí),,需要對(duì)實(shí)驗(yàn)器皿進(jìn)行包被,,以增強(qiáng)細(xì)胞貼壁性,避免細(xì)胞因沒(méi)貼好影響實(shí)驗(yàn),;包被條件常選用鼠尾膠原Ⅰ(2-5μg/cm2) ,,多聚賴氨酸PLL(0.1mg/ml),明膠(0.1%),,依據(jù)細(xì)胞種類而定,。懸浮/半懸浮細(xì)胞無(wú)需包被。





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