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IMP-H067 人膀胱成纖維細(xì)胞

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  南京賽泓瑞生物科技有限公司專注于是一家專注于研發(fā)和生產(chǎn)原代細(xì)胞,、腫瘤細(xì)胞及細(xì)胞培養(yǎng)相關(guān)試劑產(chǎn)品的生物高科技企業(yè),,可以為各類研究機構(gòu)提供符合標(biāo)準(zhǔn)規(guī)范的原代細(xì)胞、腫瘤細(xì)胞及相關(guān)實驗技術(shù)服務(wù),;

   南京賽泓瑞生物科技有限公司有一支由中國藥科大學(xué)和南京醫(yī)科大學(xué)多名博士組成的研發(fā)團(tuán)隊,,致力于為您的細(xì)胞研究及細(xì)胞培養(yǎng)實驗提供高品質(zhì)、穩(wěn)定性良好的產(chǎn)品,,做“您身邊的細(xì)胞培養(yǎng)專家”,。細(xì)胞培養(yǎng)提供全程服務(wù),產(chǎn)品涵蓋原代細(xì)胞,、細(xì)胞系,、免疫細(xì)胞及干細(xì)胞、胎牛血清,、無血清非程序凍存液,、培養(yǎng)基、基礎(chǔ)培養(yǎng)基,、“支原體”,、“黑膠蟲”清除試劑、細(xì)胞因子,、胰酶,、雙抗等細(xì)胞培養(yǎng)及實驗相關(guān)產(chǎn)品。

  公司設(shè)立質(zhì)量管理部,,建立了高標(biāo)準(zhǔn)的質(zhì)檢系統(tǒng),,產(chǎn)品從原料、半成品,、成品入庫到銷售之前,,每一個環(huán)節(jié)都有嚴(yán)格的質(zhì)檢標(biāo)準(zhǔn),并以標(biāo)準(zhǔn)的生產(chǎn)工藝,,保證產(chǎn)品質(zhì)量的穩(wěn)定性,。



胎牛血清,原代細(xì)胞,耐藥細(xì)胞,,標(biāo)記細(xì)胞,,LUC標(biāo)記細(xì)胞,培養(yǎng)基

一,、細(xì)胞基本屬性
細(xì)胞名稱人膀胱成纖維細(xì)胞
種屬來源
組織來源膀胱
生長特性貼壁生長
形態(tài)特征成纖維細(xì)胞樣
質(zhì)量檢測
纖維連接蛋白(Fibronectin)或波形蛋白(Vimentin)免疫熒光染色為陽性,,純度高于 90%,且不含有HIV-1,、HBV,、HCV、支原體,、細(xì)菌,、酵母和真菌等
產(chǎn)品規(guī)格5x105cells/T25或1mL凍存管
培養(yǎng)基人膀胱成纖維細(xì)胞專用培養(yǎng)基
培養(yǎng)條件氣相:95%空氣+5%二氧化碳;溫度:37℃
換液頻率每2-3天換液一次
消化液0.25%
產(chǎn)品貨期7-8周左右
運輸方式T25培養(yǎng)瓶/順豐快遞(包郵)
供應(yīng)限制于科學(xué)研究,,絕不可作為動物或人類疾病的治療產(chǎn)品使用
背景介紹
人膀胱成纖維細(xì)胞采用-膠原酶混合消化法結(jié)合差速貼壁法制備而來,,人膀胱成纖維細(xì)胞分離自膀胱組織;膀胱是一個儲尿器官,,在哺乳類動物,它是由平滑肌組成的一個囊形結(jié)構(gòu),,位于骨盆內(nèi),,其后端開口與尿道相通。膀胱與尿道的交界處有括約肌,,可以控制尿液的排出,。膀胱壁由三層組織組成,由內(nèi)向外為黏膜層,、肌層和外膜,。肌層由平滑肌纖維構(gòu)成,稱為逼尿肌,,逼尿肌收縮,,可使膀胱內(nèi)壓升高,壓迫尿液由尿道排出,。在膀胱與尿道交界處有較厚的環(huán)形肌,,形成尿道內(nèi)括約肌。在括約肌收縮能關(guān)閉尿道內(nèi)口,,防止尿液自膀胱漏出,。膀胱壁分為三層:即漿膜層(蜂窩脂肪組織)、肌肉層(逼尿肌,、膀胱三角區(qū)?。┖宛つ樱O薄的一層移行上皮組織)。成纖維細(xì)胞(Fibroblast)是疏松結(jié)締組織的主要細(xì)胞成分,,由胚胎時期的間充質(zhì)細(xì)胞分化而來,。成纖維細(xì)胞較大,,輪廓清楚,多為突起的紡錘形或星形的扁平狀結(jié)構(gòu),,其細(xì)胞核呈規(guī)則的卵圓形,,核仁大而明顯。成纖維細(xì)胞功能活動旺盛,,細(xì)胞質(zhì)嗜弱堿性,,具明顯的蛋白質(zhì)合成和分泌活動,在一定條件下,,它可以實現(xiàn)跟纖維細(xì)胞的互相轉(zhuǎn)化,;成纖維細(xì)胞對不同程度的細(xì)胞變性、壞死和組織缺損的修復(fù)有著十分重要的作用,。剛分離的膀胱成纖維細(xì)胞呈圓形,、折光性良好,懸浮于培養(yǎng)基中,。30min細(xì)胞貼壁,,其中部分開始伸出偽足,表現(xiàn)為小的突起,;6h后細(xì)胞基本貼壁,,伸展成梭形,胞核清晰,,分布較均勻,,散在生長,不聚集成團(tuán),;細(xì)胞生長迅速,,5-7天即呈融合狀態(tài),細(xì)胞排列緊密,,有的交叉重疊生長,,平坦、胞體較大,,細(xì)胞質(zhì)透明,,細(xì)胞核較大,呈橢圓形,,顏色淡,。細(xì)胞融合,并彼此連接成網(wǎng)狀,;細(xì)胞呈突起的紡錘形或星形的扁平分布,。膀胱成纖維細(xì)胞分泌的生長因子是一種具有多功能的促有絲分裂原,研究已表明其參與惡性腫瘤的形成過程。近年來,,堿性成纖維細(xì)胞生長因子在膀胱癌發(fā)病過程中的作用,、與生物學(xué)行為之間的關(guān)系以及治療上的應(yīng)用已受到重視。
二,、細(xì)胞培養(yǎng)操作
收貨處理取出T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶,,用75%酒精消毒瓶身,拆下封口膜,,放入37℃,、5%CO2,飽和濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中靜置3-4h,,以穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)
傳代密度細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)
傳代代數(shù)可傳5代左右;3代以內(nèi)狀態(tài),,建議收到細(xì)胞后盡快進(jìn)行相關(guān)實驗
傳代比例傳代建議1:2傳代,,1:2傳代就是1個T25瓶傳2個T25瓶或者2個6cm皿。不是1個T25瓶傳2個10cm皿
傳代方法
1.吸出T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,,用PBS清洗細(xì)胞一次,;
2.添加0.25%消化液1mL至T25培養(yǎng)瓶中,輕微轉(zhuǎn)動培養(yǎng)瓶至消化液覆蓋整個培養(yǎng)瓶底后,,吸出多余消化液,,37℃溫浴1-3min;倒置顯微鏡下觀察,,待細(xì)胞回縮變圓后,再加入5ml培養(yǎng)基終止消化,;
3.用吸管輕輕吹打混勻,,按1:2比例接種T25培養(yǎng)瓶傳代,然后補充新鮮的培養(yǎng)基至5mL,,置于37℃,、5%CO2、飽和濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中靜置培養(yǎng),;
4.待細(xì)胞貼壁后,,培養(yǎng)觀察;之后每2-3天換液一次新鮮的培養(yǎng)基,。
備注:由于實驗所用試劑,、操作環(huán)境及操作手法的不同,以上方法僅供各實驗室參考
客戶在細(xì)胞培養(yǎng)過程中,,有任何技術(shù)問題可以技術(shù)服務(wù)電話: 按 2,,我們隨時給予解答。
三、注意事項
重要提醒
1.培養(yǎng)基于4℃條件下可保存3-6個月,。
2.在細(xì)胞培養(yǎng)過程中,,請注意保持無菌操作。
3.傳代培養(yǎng)過程中,,消化時間不宜過長,,否則會影響細(xì)胞貼壁及其生長狀態(tài)。
4.運輸用的培養(yǎng)基(灌液培養(yǎng)基)不能再用來培養(yǎng)細(xì)胞,,請換用按照說明書細(xì)胞培養(yǎng)條件新配制的培養(yǎng)基來培養(yǎng)細(xì)胞,。
到貨須知
1.收到細(xì)胞后,首先觀察并拍照記錄細(xì)胞瓶是否完好,,培養(yǎng)液是否有漏液,、渾濁等現(xiàn)象,干冰運輸?shù)募?xì)胞檢查干冰是否揮發(fā),,細(xì)胞是否解凍,,若有上述現(xiàn)象發(fā)生請及時和我們聯(lián)系。
2.靜置完成后,,取出細(xì)胞培養(yǎng)瓶,,鏡檢、拍照(當(dāng)天以及第 2,3 天請拍照),,記錄細(xì)胞狀態(tài) (所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù)),;建議細(xì)胞傳代培養(yǎng)后,定期拍照,、記錄細(xì)胞生長狀態(tài),。
3.由于運輸?shù)脑颍糠旨?xì)胞由于溫度變化及劇烈碰亡破碎形成碎片,,是正?,F(xiàn)象。個別敏感細(xì)胞會出現(xiàn)不穩(wěn)定的情況,,請及時和我們聯(lián)系,,告知細(xì)胞的具體情況,以便我們的技術(shù)人員跟蹤回訪直至問題解決,。
4.仔細(xì)閱讀細(xì)胞說明書,,了解細(xì)胞相關(guān)信息,如細(xì)胞形態(tài),、所用培養(yǎng)基,、血清比例、所需細(xì)胞因子等,,確保細(xì)胞培養(yǎng)條件一致,,若由于培養(yǎng)條件不一致而導(dǎo)致細(xì)胞出現(xiàn)問題,,責(zé)任由客戶自行承擔(dān)。
四,、售后服務(wù)
重發(fā)標(biāo)準(zhǔn)
1.細(xì)胞運輸途中遭遇的各種問題,,細(xì)胞丟失、瓶身破損,、培養(yǎng)液嚴(yán)重漏液等,,重發(fā);
2.收到細(xì)胞未開封,,如出現(xiàn)污染狀況,,重發(fā);
3.收到細(xì)胞3天內(nèi),,發(fā)現(xiàn)污染問題,,經(jīng)核實后,重發(fā),;
4.常溫發(fā)貨的細(xì)胞靜置 2 小時后,,絕大多數(shù)細(xì)胞未存活,經(jīng)核實后,,重發(fā),;
5.常溫發(fā)貨的細(xì)胞靜置 22 小時并且未開封,出現(xiàn)污染,,經(jīng)核實后,,重發(fā);
6.細(xì)胞活性問題,,請在收到產(chǎn)品 3 天內(nèi)給我們提出真實的實驗結(jié)果,,用臺盼藍(lán)染色法鑒定細(xì)胞活力,經(jīng)核實后,,重發(fā),;
7.視具體情況而定。
不予重發(fā)
1.客戶操作造成細(xì)胞污染,,不重發(fā);
2.客戶嚴(yán)重操作失誤致細(xì)胞狀態(tài)不好,,不重發(fā),;
3.非我們推薦細(xì)胞培養(yǎng)體系致的細(xì)胞狀態(tài)不好,不重發(fā),;
4.細(xì)胞狀態(tài)不好,,未提供真實清晰的培養(yǎng)前 3 天的細(xì)胞狀態(tài)照片,不重發(fā),;
5.細(xì)胞培養(yǎng)時經(jīng)其它處理導(dǎo)致細(xì)胞出現(xiàn)問題的,,不重發(fā),;
6.收到細(xì)胞發(fā)現(xiàn)問題與客服人員溝通的時間證明大于3天的,不重發(fā),;
7.視具體情況而定,。


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