IMP-H021 人內(nèi)皮祖細胞
具體成交價以合同協(xié)議為準
- 公司名稱 南京賽泓瑞生物科技有限公司
- 品牌
- 型號 IMP-H021
- 產(chǎn)地
- 廠商性質(zhì) 生產(chǎn)廠家
- 更新時間 2024/12/30 9:31:55
- 訪問次數(shù) 102
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一,、細胞基本屬性 | ||||
細胞名稱 | 人內(nèi)皮祖細胞 | |||
種屬來源 | 人 | |||
組織來源 | 外周血 | |||
生長特性 | 貼壁生長 | |||
形態(tài)特征 | 長梭狀,不規(guī)則細胞 | |||
質(zhì)量檢測 | CD31和CD34免疫熒光染色為陽性,,純度高于 90%,,且不含有HIV-1、HBV,、HCV,、支原體、細菌,、酵母和真菌等 | |||
產(chǎn)品規(guī)格 | 5x105cells/T25或1mL凍存管 | |||
培養(yǎng)基 | 人內(nèi)皮祖細胞專用培養(yǎng)基 | |||
培養(yǎng)條件 | 氣相:95%空氣+5%二氧化碳,;溫度:37℃ | |||
換液頻率 | 每2-3天換液一次 | |||
消化液 | 0.25% | |||
產(chǎn)品貨期 | 現(xiàn)貨,2周左右 | |||
運輸方式 | T25培養(yǎng)瓶/ 順豐快遞(包郵) | |||
供應限制 | 于科學研究,絕不可作為動物或人類疾病的治療產(chǎn)品使用 | |||
背景介紹 | 內(nèi)皮祖細胞是血管內(nèi)皮細胞的前體細胞,在生理或病理因素刺激下,可從骨髓動員到外周血參與損傷血管的修復研究顯示,內(nèi)皮祖細胞在心腦血管疾病,、外周血管疾病,、腫瘤血管形成及創(chuàng)傷愈合等方面均發(fā)揮重要作用,并為缺血性疾病的研究治療提供了新思路,。 內(nèi)皮祖細胞具有游走特性,,能進一步增殖分化的幼稚內(nèi)皮細胞,缺乏成熟內(nèi)皮細胞的特征性表型,,不能形成管腔樣結(jié)構(gòu),。其功能主要為參與了出生后缺血組織的血管發(fā)生和血管損傷后的修復。 | |||
二,、細胞培養(yǎng)操作 | ||||
收貨處理 | 取出T25細胞培養(yǎng)瓶,,用75%酒精消毒瓶身,拆下封口膜,,放入37℃,、5%CO2,飽和濕度的細胞培養(yǎng)箱中靜置3-4h,,以穩(wěn)定細胞狀態(tài) | |||
細胞復蘇 | 將含有1 mL人原代內(nèi)皮祖細胞細胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍,,加4 mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000 rpm條件下離心3 min,,棄去上清液,,加1-2 mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入含適量培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜(或?qū)⒓毎麘乙杭尤? cm皿中,,加入約4 mL培養(yǎng)基,,培養(yǎng)過夜)。第二天換液并檢查人原代內(nèi)皮祖細胞細胞密度,。 | |||
傳代密度 | 細胞密度達80%-90%,,即可進行傳代培養(yǎng) | |||
傳代代數(shù) | 可傳1-2代;不建議多次傳代,,建議收到細胞后盡快進行相關(guān)實驗 | |||
傳代比例 | 傳代建議1:2傳代,,1:2傳代就是1個T25瓶傳2個T25瓶或者2個6cm皿。不是1個T25瓶傳2個10cm皿 | |||
傳代方法 | a,、棄去培養(yǎng)上清,,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次,。 b,、加1 mL消化液(0.25%Trypsin-0.02%EDTA)于培養(yǎng)瓶中,使消化液浸潤所有細胞,,棄去消化液,,將培養(yǎng)瓶置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-3 min,,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,,迅速拿回操作臺,,加少量培養(yǎng)基終止消化。 c,、按6-8 mL/瓶補加培養(yǎng)基,,輕輕打勻后裝入無菌離心管中,1000 rpm離心4 min,,棄去上清液,,補加1-2 mL培養(yǎng)液后吹勻。 d,、將細胞懸液按1:2比例分到新的含8 mL培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,,置于培養(yǎng)箱中培養(yǎng) | |||
細胞凍存 | 待細胞生長狀態(tài)良好時,可進行細胞凍存,。下面 T25 瓶為例,; a、收集人原代內(nèi)皮祖細胞細胞及細胞培養(yǎng)液,,裝入無菌離心管中,,1000 rpm條件下離心4 min,棄去上清液,,用PBS清洗一遍,,棄盡PBS,進行細胞計數(shù),。 b,、根據(jù)細胞數(shù)量加入無血清細胞凍存液,使細胞密度5×106~1×107/mL,,輕輕混勻,,每支凍存管凍存1mL人原代內(nèi)皮祖細胞細胞懸液,注意凍存管做好標識,。 c、將凍存管放入-80℃冰箱,,24 h后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存,。記錄凍存管位置以便下次拿取。 | |||
備注:由于實驗所用試劑,、操作環(huán)境及操作手法的不同,,以上方法僅供各實驗室參考 客戶在細胞培養(yǎng)過程中,有任何技術(shù)問題可以技術(shù)服務電話: 按 2,,我們隨時給予解答,。 | ||||
三,、注意事項 | ||||
重要提醒 | 1.培養(yǎng)基于4℃條件下可保存3-6個月。 2.在細胞培養(yǎng)過程中,,請注意保持無菌操作,。 3.傳代培養(yǎng)過程中,消化時間不宜過長,,否則會影響細胞貼壁及其生長狀態(tài),。 4.運輸用的培養(yǎng)基(灌液培養(yǎng)基)不能再用來培養(yǎng)細胞,請換用按照說明書細胞培養(yǎng)條件新配制的培養(yǎng)基來培養(yǎng)細胞,。 | |||
到貨須知 | 1.收到細胞后,,首先觀察并拍照記錄細胞瓶是否完好,培養(yǎng)液是否有漏液,、渾濁等現(xiàn)象,,干冰運輸?shù)募毎麢z查干冰是否揮發(fā),細胞是否解凍,,若有上述現(xiàn)象發(fā)生請及時和我們聯(lián)系,。 2.靜置完成后,取出細胞培養(yǎng)瓶,,鏡檢,、拍照(當天以及第 2,3 天請拍照),記錄細胞狀態(tài) (所拍照片將作為后續(xù)服務依據(jù)),;建議細胞傳代培養(yǎng)后,,定期拍照、記錄細胞生長狀態(tài),。 3.由于運輸?shù)脑?,部分細胞由于溫度變化及劇烈碰亡破碎形成碎片,是正?,F(xiàn)象,。個別敏感細胞會出現(xiàn)不穩(wěn)定的情況,請及時和我們聯(lián)系,,告知細胞的具體情況,,以便我們的技術(shù)人員跟蹤回訪直至問題解決。 4.仔細閱讀細胞說明書,,了解細胞相關(guān)信息,,如細胞形態(tài)、所用培養(yǎng)基,、血清比例,、所需細胞因子等,確保細胞培養(yǎng)條件一致,,若由于培養(yǎng)條件不一致而導致細胞出現(xiàn)問題,,責任由客戶自行承擔,。 | |||
四、售后服務 | ||||
重發(fā)標準 | 1.細胞運輸途中遭遇的各種問題,,細胞丟失,、瓶身破損、培養(yǎng)液嚴重漏液等,,重發(fā),; 2.收到細胞未開封,如出現(xiàn)污染狀況,,重發(fā),; 3.收到細胞3天內(nèi),發(fā)現(xiàn)污染問題,,經(jīng)核實后,,重發(fā); 4.常溫發(fā)貨的細胞靜置 2 小時后,,絕大多數(shù)細胞未存活,,經(jīng)核實后,重發(fā),; 5.常溫發(fā)貨的細胞靜置 22 小時并且未開封,,出現(xiàn)污染,經(jīng)核實后,,重發(fā),; 6.細胞活性問題,請在收到產(chǎn)品 3 天內(nèi)給我們提出真實的實驗結(jié)果,,用臺盼藍染色法鑒定細胞活力,,經(jīng)核實后,重發(fā),; 7.視具體情況而定,。 | |||
不予重發(fā) | 1.客戶操作造成細胞污染,不重發(fā),; 2.客戶嚴重操作失誤致細胞狀態(tài)不好,,不重發(fā); 3.非我們推薦細胞培養(yǎng)體系致的細胞狀態(tài)不好,,不重發(fā),; 4.細胞狀態(tài)不好,未提供真實清晰的培養(yǎng)前 3 天的細胞狀態(tài)照片,,不重發(fā); 5.細胞培養(yǎng)時經(jīng)其它處理導致細胞出現(xiàn)問題的,,不重發(fā),; 6.收到細胞發(fā)現(xiàn)問題與客服人員溝通的時間證明大于3天的,,不重發(fā); 7.視具體情況而定,。 |