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IMP-H018 人外周血樹突狀細(xì)胞(DC細(xì)胞)
具體成交價(jià)以合同協(xié)議為準(zhǔn)
- 公司名稱 南京賽泓瑞生物科技有限公司
- 品牌
- 型號(hào) IMP-H018
- 產(chǎn)地
- 廠商性質(zhì) 生產(chǎn)廠家
- 更新時(shí)間 2024/12/30 9:21:08
- 訪問次數(shù) 177
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一,、細(xì)胞基本屬性 | ||||
細(xì)胞名稱 | 人外周血樹突狀細(xì)胞(DC細(xì)胞) | |||
種屬來源 | 人 | |||
組織來源 | 外周血 | |||
生長(zhǎng)特性 | 半貼半懸浮 | |||
細(xì)胞形態(tài) | 樹突狀細(xì)胞樣 | |||
質(zhì)量檢測(cè) | CD11c免疫熒光染色為陽性,,純度高于 90%,且不含有HIV-1,、HBV,、HCV、支原體,、細(xì)菌,、酵母和真菌等 | |||
產(chǎn)品規(guī)格 | 5x105cells/T25或1mL凍存管 | |||
培養(yǎng)基 | 人外周血樹突狀細(xì)胞專用培養(yǎng)基 | |||
培養(yǎng)條件 | 氣相:95%空氣+5%二氧化碳;溫度:37℃ | |||
換液頻率 | 每2-3天換液一次 | |||
消化液 | 0.25% | |||
產(chǎn)品貨期 | 7-8周左右 | |||
運(yùn)輸方式 | T25培養(yǎng)瓶/ 順豐快遞(包郵) | |||
供應(yīng)限制 | 于科學(xué)研究,,絕不可作為動(dòng)物或人類疾病的治療產(chǎn)品使用 | |||
背景介紹 | 人外周血DC細(xì)胞采用密度梯度離心法分離外周血單個(gè)核細(xì)胞,、培養(yǎng)過程添加細(xì)胞因子誘導(dǎo)而來,人外周血DC細(xì)胞分離自外周血,,由外周血單核細(xì)胞誘導(dǎo)而成的,;外周血是除骨髓之外的血液,臨床上常用一些方法把骨髓中的造血干細(xì)胞釋放到血液中,,再在從血液中提取分離得到造血干細(xì)胞,,我們把這樣得到的干細(xì)胞稱為外周血干細(xì)胞,在二十一世紀(jì)初人類開始的生命方舟計(jì)劃中提出外周血這一新概念,。DC細(xì)胞,,全稱樹突狀細(xì)胞(DC),是近年來倍受們關(guān)注的專職抗原呈遞細(xì)胞(APC),,能攝取,、加工及呈遞抗原,啟動(dòng)T細(xì)胞介導(dǎo)的免疫反應(yīng),。由美國(guó)學(xué)者Steinman于1973年在淋巴結(jié)中發(fā)現(xiàn),,從脾臟中分離出一類與粒細(xì)胞,、巨噬細(xì)胞和淋巴細(xì)胞形態(tài)和功都不同的白細(xì)胞,因其細(xì)胞膜向外伸出,,形成與神經(jīng)細(xì)胞軸突相似的膜性樹狀突起,,故而命名為樹突狀細(xì)胞。未成熟DC具有較強(qiáng)的遷移能力,,成熟DC能有效激活初始型T細(xì)胞,,處于啟動(dòng)、調(diào)控,、并維持免疫應(yīng)答的中心環(huán)節(jié),。樹突狀細(xì)胞(Dendritic cells, DC)是機(jī)體功能的專職抗原遞呈細(xì)胞,它能高效地?cái)z取,、加工處理和遞呈抗原,,未成熟DC具有較強(qiáng)的遷移能力,成熟DC能有效激活初始型T細(xì)胞,,處于啟動(dòng),、調(diào)控、并維持免疫應(yīng)答的中心環(huán)節(jié),。 DC的來源有兩條途徑:①髓樣干細(xì)胞在GM-CSF的刺激下分化為DC,,稱為髓樣DC,也稱DCl,,與單核細(xì)胞和粒細(xì)胞有共同的前體細(xì)胞,;包括朗格漢斯細(xì)胞,間皮(或真皮)DCs以及單核細(xì)胞衍生的DCs等,,②來源于淋巴樣干細(xì)胞,,稱為淋巴樣DC或漿細(xì)胞樣DC,即DC2,,與T細(xì)胞和NK細(xì)胞有共同的前體細(xì)胞,。樹突狀細(xì)胞(DC)表面具有豐富的抗原遞呈分子、共刺激因子和粘附因子,,是功能強(qiáng)大的專職抗原遞呈細(xì)胞(APC),。DC自身具有免疫刺激能力,是目前發(fā)現(xiàn)的惟一能激活未致敏的初始型T細(xì)胞的APC,。 | |||
二,、細(xì)胞培養(yǎng)操作 | ||||
收貨處理 | 取出T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶,用75%酒精消毒瓶身,,拆下封口膜,,放入37℃、5%CO2,,飽和濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中靜置3-4h,,以穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài) | |||
傳代特征 | 屬于高度分化細(xì)胞;屬于不增殖細(xì)胞群,,建議收到細(xì)胞后盡快進(jìn)行相關(guān)實(shí)驗(yàn) | |||
傳代比例 | 不傳代 | |||
半貼壁半懸浮細(xì)胞處理 | 1.收集T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基至50ml離心管中,,用吸管吸取PBS,吹洗細(xì)胞培養(yǎng)瓶1-2次,,收集清洗液,;經(jīng)1200-1500rpm離心3min,棄上清,,收集細(xì)胞沉淀①,; 2.添加0.25%消化液1mL至T25培養(yǎng)瓶中,輕微轉(zhuǎn)動(dòng)培養(yǎng)瓶至消化液覆蓋整個(gè)培養(yǎng)瓶底后,,吸出多余消化液,,37℃溫浴1-3min;倒置顯微鏡下觀察,,待細(xì)胞回縮變圓后,,再加入5ml培養(yǎng)基終止消化; 3.用吸管輕輕吹打混勻,,收集細(xì)胞懸液至離心管中,;經(jīng)1200-1500rpm離心3min,棄上清,,收集細(xì)胞沉淀②,; 4.吸取5ml新鮮培養(yǎng)基,重懸細(xì)胞沉淀①,、細(xì)胞沉淀②,把①,、②混勻。 5.用吸管輕輕吹打混勻,、分散細(xì)胞,,按實(shí)驗(yàn)需求接種于實(shí)驗(yàn)器皿內(nèi),然后補(bǔ)充適量新鮮的培養(yǎng)基,,置于37℃,、5%CO2、飽和濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中靜置培養(yǎng); 6.待細(xì)胞狀態(tài)穩(wěn)定后,,用于實(shí)驗(yàn),;可以每2-3天換液一次新鮮的培養(yǎng)基。 | |||
備注:由于實(shí)驗(yàn)所用試劑,、操作環(huán)境及操作手法的不同,,以上方法僅供各實(shí)驗(yàn)室參考 客戶在細(xì)胞培養(yǎng)過程中,有任何技術(shù)問題可以技術(shù)服務(wù)電話: 按 2,,我們隨時(shí)給予解答,。 | ||||
三,、注意事項(xiàng) | ||||
重要提醒 | 1.培養(yǎng)基于4℃條件下可保存3-6個(gè)月。 2.在細(xì)胞培養(yǎng)過程中,,請(qǐng)注意保持無菌操作,。 3.傳代培養(yǎng)過程中,消化時(shí)間不宜過長(zhǎng),,否則會(huì)影響細(xì)胞貼壁及其生長(zhǎng)狀態(tài),。 4.運(yùn)輸用的培養(yǎng)基(灌液培養(yǎng)基)不能再用來培養(yǎng)細(xì)胞,請(qǐng)換用按照說明書細(xì)胞培養(yǎng)條件新配制的培養(yǎng)基來培養(yǎng)細(xì)胞,。 | |||
到貨須知 | 1.收到細(xì)胞后,,首先觀察并拍照記錄細(xì)胞瓶是否完好,培養(yǎng)液是否有漏液,、渾濁等現(xiàn)象,,干冰運(yùn)輸?shù)募?xì)胞檢查干冰是否揮發(fā),細(xì)胞是否解凍,,若有上述現(xiàn)象發(fā)生請(qǐng)及時(shí)和我們聯(lián)系,。 2.靜置完成后,取出細(xì)胞培養(yǎng)瓶,,鏡檢,、拍照(當(dāng)天以及第 2,3 天請(qǐng)拍照),記錄細(xì)胞狀態(tài) (所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù)),;建議細(xì)胞傳代培養(yǎng)后,,定期拍照、記錄細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài),。 3.由于運(yùn)輸?shù)脑?,部分?xì)胞由于溫度變化及劇烈碰亡破碎形成碎片,是正?,F(xiàn)象,。個(gè)別敏感細(xì)胞會(huì)出現(xiàn)不穩(wěn)定的情況,請(qǐng)及時(shí)和我們聯(lián)系,,告知細(xì)胞的具體情況,,以便我們的技術(shù)人員跟蹤回訪直至問題解決。 4.仔細(xì)閱讀細(xì)胞說明書,,了解細(xì)胞相關(guān)信息,,如細(xì)胞形態(tài)、所用培養(yǎng)基,、血清比例,、所需細(xì)胞因子等,確保細(xì)胞培養(yǎng)條件一致,若由于培養(yǎng)條件不一致而導(dǎo)致細(xì)胞出現(xiàn)問題,,責(zé)任由客戶自行承擔(dān),。 | |||
四、售后服務(wù) | ||||
重發(fā)標(biāo)準(zhǔn) | 1.細(xì)胞運(yùn)輸途中遭遇的各種問題,,細(xì)胞丟失,、瓶身破損、培養(yǎng)液嚴(yán)重漏液等,,重發(fā); 2.收到細(xì)胞未開封,,如出現(xiàn)污染狀況,,重發(fā); 3.收到細(xì)胞3天內(nèi),,發(fā)現(xiàn)污染問題,,經(jīng)核實(shí)后,重發(fā),; 4.常溫發(fā)貨的細(xì)胞靜置 2 小時(shí)后,,絕大多數(shù)細(xì)胞未存活,經(jīng)核實(shí)后,,重發(fā),; 5.常溫發(fā)貨的細(xì)胞靜置 22 小時(shí)并且未開封,出現(xiàn)污染,,經(jīng)核實(shí)后,,重發(fā); 6.細(xì)胞活性問題,,請(qǐng)?jiān)谑盏疆a(chǎn)品 3 天內(nèi)給我們提出真實(shí)的實(shí)驗(yàn)結(jié)果,,用臺(tái)盼藍(lán)染色法鑒定細(xì)胞活力,經(jīng)核實(shí)后,,重發(fā),; 7.視具體情況而定。 | |||
不予重發(fā) | 1.客戶操作造成細(xì)胞污染,,不重發(fā),; 2.客戶嚴(yán)重操作失誤致細(xì)胞狀態(tài)不好,不重發(fā),; 3.非我們推薦細(xì)胞培養(yǎng)體系致的細(xì)胞狀態(tài)不好,,不重發(fā); 4.細(xì)胞狀態(tài)不好,,未提供真實(shí)清晰的培養(yǎng)前 3 天的細(xì)胞狀態(tài)照片,,不重發(fā); 5.細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)經(jīng)其它處理導(dǎo)致細(xì)胞出現(xiàn)問題的,不重發(fā),; 6.收到細(xì)胞發(fā)現(xiàn)問題與客服人員溝通的時(shí)間證明大于3天的,,不重發(fā); 7.視具體情況而定,。 |
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