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IMP-R056 大鼠胰腺星狀細胞

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  南京賽泓瑞生物科技有限公司專注于是一家專注于研發(fā)和生產(chǎn)原代細胞,、腫瘤細胞及細胞培養(yǎng)相關試劑產(chǎn)品的生物高科技企業(yè),,可以為各類研究機構提供符合標準規(guī)范的原代細胞、腫瘤細胞及相關實驗技術服務,;

   南京賽泓瑞生物科技有限公司有一支由中國藥科大學和南京醫(yī)科大學多名博士組成的研發(fā)團隊,,致力于為您的細胞研究及細胞培養(yǎng)實驗提供高品質(zhì)、穩(wěn)定性良好的產(chǎn)品,,做“您身邊的細胞培養(yǎng)專家”,。細胞培養(yǎng)提供全程服務,產(chǎn)品涵蓋原代細胞,、細胞系,、免疫細胞及干細胞、胎牛血清,、無血清非程序凍存液,、培養(yǎng)基、基礎培養(yǎng)基,、“支原體”,、“黑膠蟲”清除試劑、細胞因子,、胰酶,、雙抗等細胞培養(yǎng)及實驗相關產(chǎn)品。

  公司設立質(zhì)量管理部,,建立了高標準的質(zhì)檢系統(tǒng),,產(chǎn)品從原料、半成品,、成品入庫到銷售之前,,每一個環(huán)節(jié)都有嚴格的質(zhì)檢標準,并以標準的生產(chǎn)工藝,保證產(chǎn)品質(zhì)量的穩(wěn)定性,。



胎牛血清,,原代細胞,耐藥細胞,,標記細胞,,LUC標記細胞,培養(yǎng)基

一,、細胞基本屬性
細胞名稱大鼠胰腺星狀細胞
種屬來源大鼠
組織來源胰腺
生長特性貼壁生長
形態(tài)特征成纖維細胞樣
質(zhì)量檢測結蛋白(Desmin)或者平滑肌肌動蛋白(α-SMA)免疫熒光染色為陽性,,純度高于 90%,且不含有HIV-1,、HBV,、HCV、支原體,、細菌,、酵母和真菌等
產(chǎn)品規(guī)格5x105cells/T25或1mL凍存管
培養(yǎng)基大鼠胰腺星狀細胞培養(yǎng)基
培養(yǎng)條件氣相:95%空氣+5%二氧化碳;溫度:37℃
換液頻率每2-3天換液一次
消化液0.25%
產(chǎn)品貨期6周左右
運輸方式T25培養(yǎng)瓶/ 順豐快遞(包郵)
供應限制于科學研究,,絕不可作為動物或人類疾病的治療產(chǎn)品使用
背景介紹大鼠胰腺星狀細胞采用膠原酶制備而來,。大鼠胰腺星狀細胞分離自胰腺組織;胰腺分為外分泌腺和內(nèi)分泌腺兩部分,。外分泌腺由腺泡和腺管組成,,腺泡分泌胰液,腺管是胰液排出的通道,。胰液中含有,、原、脂肪酶,、等,。胰液通過胰腺管排入十二指腸,有消化蛋白質(zhì),、脂肪和糖的作用,。內(nèi)分泌腺由大小不同的細胞團──胰島所組成,胰島主要由4種細胞組成:α細胞,、β細胞,、γ細胞及PP細胞。α細胞分泌胰高血糖素,,升高血糖,;β細胞分泌胰島素,降低血糖,;γ細胞分泌,,以旁分泌的方式抑制α,、β細胞的分泌;PP細胞分泌胰多肽,,抑制胃腸運動,、胰液分泌和膽囊收縮。纖維化是慢性胰腺炎的典型病理特征,,活化的胰腺星狀細胞(PSC)是胰腺纖維化的主要效應細胞,,PSC分離和成功培養(yǎng)是體外研究胰腺纖維化的重要前提。未活性化的PSC胞漿中富含維A脂滴,,并表達Desmin蛋白,,活化后的PSC則表達α-平滑肌肌動蛋白(alpha-SMA)。PSC具有靜息態(tài)與激活態(tài)兩種,,并分別具有特異的標志物。靜息狀態(tài)PSC胞質(zhì)內(nèi)富含的脂滴可以被油紅O染成紅色,,陽性表達Desmin,。激活狀態(tài)PSC陽性表達alpha-SMA。油紅O染色發(fā)現(xiàn),,原代分離的細胞培養(yǎng)6d,,胞漿中仍可見明顯的脂滴,傳代后,,橙紅色的脂滴顆粒顯著減少甚至消失,。免疫細胞化學染色顯示,細胞接種24h仍然表達Desmin,,48h后Desmin基本不再表達,。培養(yǎng)48h后絕大多數(shù)細胞開始表達alpha-SMA,隨著培養(yǎng)時間的增長和傳代次數(shù)的增加,,細胞表達alpha-SMA,,而不再表達Desmin,說明細胞活化,。提示PSC接種24h后即啟動了激活過程,,至培養(yǎng)第6d大多數(shù)細胞激活,傳代后細胞處于高度激活狀態(tài),。原代胰腺星狀細胞可作為慢性胰腺炎新藥的細胞篩選模型,,目前研究發(fā)現(xiàn):胰腺受損時,在各種刺激因子作用下使胰腺星狀細胞活化,,導致細胞形態(tài),、功能發(fā)生變化,促使基質(zhì)增生,、膠原蛋白的大量生成及不規(guī)則沉積,。
二,、細胞培養(yǎng)操作
收貨處理取出T25細胞培養(yǎng)瓶,用75%酒精消毒瓶身,,拆下封口膜,,放入37℃、5%CO2,,飽和濕度的細胞培養(yǎng)箱中靜置3-4h,,以穩(wěn)定細胞狀態(tài)
傳代密度細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)
傳代代數(shù)可傳2-3代左右,,建議收到細胞后盡快進行相關實驗
傳代比例傳代建議1:2傳代,,1:2傳代就是1個T25瓶傳2個T25瓶或者2個6cm皿。不是1個T25瓶傳2個10cm皿
傳代方法
1.吸出T25細胞培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,,用PBS清洗細胞一次,;
2.添加0.25%消化液1mL至T25培養(yǎng)瓶中,輕微轉動培養(yǎng)瓶至消化液覆蓋整個培養(yǎng)瓶底后,,吸出多余消化液,,37℃溫浴1-3min;倒置顯微鏡下觀察,,待細胞回縮變圓后,,再加入5ml培養(yǎng)基終止消化;
3.用吸管輕輕吹打混勻,,按1:2比例接種T25培養(yǎng)瓶傳代,,然后補充新鮮的培養(yǎng)基至5mL,置于37℃,、5%CO2,、飽和濕度的細胞培養(yǎng)箱中靜置培養(yǎng);
4.待細胞貼壁后,,培養(yǎng)觀察,;之后每2-3天換液一次新鮮的培養(yǎng)基。
備注:由于實驗所用試劑,、操作環(huán)境及操作手法的不同,,以上方法僅供各實驗室參考
客戶在細胞培養(yǎng)過程中,有任何技術問題可以技術服務電話: 按 2,,我們隨時給予解答,。
三、注意事項
重要提醒
1.培養(yǎng)基于4℃條件下可保存3-6個月,。
2.在細胞培養(yǎng)過程中,,請注意保持無菌操作。
3.傳代培養(yǎng)過程中,,消化時間不宜過長,,否則會影響細胞貼壁及其生長狀態(tài),。
4.運輸用的培養(yǎng)基(灌液培養(yǎng)基)不能再用來培養(yǎng)細胞,請換用按照說明書細胞培養(yǎng)條件新配制的培養(yǎng)基來培養(yǎng)細胞,。
到貨須知
1.收到細胞后,,首先觀察并拍照記錄細胞瓶是否完好,培養(yǎng)液是否有漏液,、渾濁等現(xiàn)象,,干冰運輸?shù)募毎麢z查干冰是否揮發(fā),細胞是否解凍,,若有上述現(xiàn)象發(fā)生請及時和我們聯(lián)系,。
2.靜置完成后,取出細胞培養(yǎng)瓶,,鏡檢,、拍照(當天以及第 2,3 天請拍照),記錄細胞狀態(tài) (所拍照片將作為后續(xù)服務依據(jù)),;建議細胞傳代培養(yǎng)后,,定期拍照、記錄細胞生長狀態(tài),。
3.由于運輸?shù)脑颍糠旨毎捎跍囟茸兓皠×遗鐾銎扑樾纬伤槠?,是正?,F(xiàn)象。個別敏感細胞會出現(xiàn)不穩(wěn)定的情況,,請及時和我們聯(lián)系,,告知細胞的具體情況,以便我們的技術人員跟蹤回訪直至問題解決,。
4.仔細閱讀細胞說明書,,了解細胞相關信息,如細胞形態(tài),、所用培養(yǎng)基,、血清比例、所需細胞因子等,,確保細胞培養(yǎng)條件一致,,若由于培養(yǎng)條件不一致而導致細胞出現(xiàn)問題,責任由客戶自行承擔,。
四,、售后服務
重發(fā)標準
1.細胞運輸途中遭遇的各種問題,細胞丟失,、瓶身破損,、培養(yǎng)液嚴重漏液等,,重發(fā);
2.收到細胞未開封,,如出現(xiàn)污染狀況,,重發(fā);
3.收到細胞3天內(nèi),,發(fā)現(xiàn)污染問題,,經(jīng)核實后,重發(fā),;
4.常溫發(fā)貨的細胞靜置 2 小時后,,絕大多數(shù)細胞未存活,經(jīng)核實后,,重發(fā),;
5.常溫發(fā)貨的細胞靜置 22 小時并且未開封,出現(xiàn)污染,,經(jīng)核實后,,重發(fā);
6.細胞活性問題,,請在收到產(chǎn)品 3 天內(nèi)給我們提出真實的實驗結果,,用臺盼藍染色法鑒定細胞活力,經(jīng)核實后,,重發(fā),;
7.視具體情況而定。
不予重發(fā)
1.客戶操作造成細胞污染,,不重發(fā),;
2.客戶嚴重操作失誤致細胞狀態(tài)不好,不重發(fā),;
3.非我們推薦細胞培養(yǎng)體系致的細胞狀態(tài)不好,,不重發(fā);
4.細胞狀態(tài)不好,,未提供真實清晰的培養(yǎng)前 3 天的細胞狀態(tài)照片,,不重發(fā);
5.細胞培養(yǎng)時經(jīng)其它處理導致細胞出現(xiàn)問題的,,不重發(fā),;
6.收到細胞發(fā)現(xiàn)問題與客服人員溝通的時間證明大于3天的,不重發(fā),;
7.視具體情況而定,。


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