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IML-118 PC3-LUC-BSD(人前列腺癌細(xì)胞-熒光素酶標(biāo)記(STR鑒定正確))
具體成交價(jià)以合同協(xié)議為準(zhǔn)
- 公司名稱(chēng) 上海淳麥生物科技有限公司
- 品牌
- 型號(hào) IML-118
- 產(chǎn)地
- 廠商性質(zhì) 生產(chǎn)廠家
- 更新時(shí)間 2024/12/30 14:47:36
- 訪問(wèn)次數(shù) 248
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胎牛血清,,細(xì)胞株,,原代細(xì)胞,耐藥細(xì)胞,,LUC細(xì)胞,,標(biāo)記細(xì)胞,大鼠細(xì)胞,,小鼠細(xì)胞,,ELISA試劑盒,感受態(tài)細(xì)胞,,
一,、細(xì)胞基本屬性 | ||||
細(xì)胞名稱(chēng) | PC3-LUC-BSD(人前列腺癌細(xì)胞-熒光素酶標(biāo)記(STR鑒定正確)) | |||
細(xì)胞別稱(chēng) | PC3-LUC-BSD;人前列腺癌細(xì)胞-熒光素酶標(biāo)記,;PC3-熒光素酶標(biāo)記 | |||
種屬來(lái)源 | 人 | |||
組織來(lái)源 | 前列腺 | |||
生長(zhǎng)特性 | 貼壁生長(zhǎng) | |||
細(xì)胞形態(tài) | 上皮細(xì)胞樣 | |||
背景介紹 | Luciferase PC-3細(xì)胞穩(wěn)定表達(dá)螢火蟲(chóng)熒光素酶,。該細(xì)胞株性狀穩(wěn)定,培養(yǎng)時(shí)不需要添加抗生素維持,??捎米魑灮鹣x(chóng)熒光素酶活性檢測(cè)中的陽(yáng)性對(duì)照,,也可用于活體動(dòng)物成像實(shí)驗(yàn)。 PC3-LUC-BSD細(xì)胞通過(guò)慢病毒轉(zhuǎn)染的方式攜帶Luc基因,。 PC-3細(xì)胞源于一位62歲白人男性Ⅳ級(jí)前列腺腺癌患者的骨頭轉(zhuǎn)移灶,;PC-3細(xì)胞的酸性磷酸酶活性和5-α-睪丸激素還原酶活性都低。 | |||
藥篩濃度 | PC3-LUC細(xì)胞bsd(Blasticidin)藥篩濃度為4.0ug/ml,,培養(yǎng)過(guò)程中可不用再添加bsd,,細(xì)胞復(fù)蘇和傳代過(guò)程中,不可使用含有藥物的培養(yǎng)基,。如若擔(dān)心抗性隨著傳代時(shí)間降低,,需在細(xì)胞貼壁,形態(tài)展開(kāi),,生長(zhǎng)穩(wěn)定后,,定期用2.0ug/ml濃度bsd維持。 | |||
Luc成像文獻(xiàn) | PC-3-LUC活體成像參考文獻(xiàn)1 PC-3-LUC活體成像參考文獻(xiàn)2 | |||
STR鑒定位點(diǎn)圖 | ||||
生物安全等級(jí) | 1 | |||
細(xì)胞規(guī)格 | 1x106cells/T25培養(yǎng)瓶或者1mL凍存管包裝 | |||
支原體檢測(cè) | 無(wú) | |||
保藏機(jī)構(gòu) | ATCC; CRL-1435 ATCC; CRL-7934 DSMZ; ACC-465 ECACC; 90112714 | |||
培養(yǎng)基 | 90% F12K+10% FBS+PS | |||
培養(yǎng)條件 | 氣相:95%空氣+5%二氧化碳,;溫度:37℃ | |||
凍存條件 | 無(wú)血清凍存液,,液氮儲(chǔ)存 | |||
細(xì)胞貨期 | 現(xiàn)貨,1周左右 | |||
運(yùn)輸方式 | 復(fù)蘇發(fā)貨(T25瓶免運(yùn)輸費(fèi)用)/凍存發(fā)貨(需加干冰運(yùn)輸費(fèi)用) 順豐快遞 | |||
供應(yīng)限制 | 于科學(xué)研究,,絕不可作為動(dòng)物或人類(lèi)疾病的治療產(chǎn)品使用 | |||
特別說(shuō)明 | 以下細(xì)胞培養(yǎng)凍存處理僅供參考,,具體操作步驟以隨貨產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)為主 | |||
二、細(xì)胞培養(yǎng)操作 | ||||
收貨方式 | T25瓶 | 凍存管 | ||
收貨處理 | 觀察好細(xì)胞狀態(tài)后,,75%酒精消毒瓶壁,,將T25瓶置于37度培養(yǎng)箱放置2-4h,以便穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài) | 收到細(xì)胞后,,需立即轉(zhuǎn)入液氮凍存或直接復(fù)蘇 | ||
傳代密度 | 細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng) | 第二天換液并檢查細(xì)胞密度 | ||
傳代比例 | 傳代建議1:2傳代,1:2傳代就是1個(gè)T25瓶傳2個(gè)T25瓶或者2個(gè)6cm皿,。不是1個(gè)T25瓶傳2個(gè)10cm皿 | 一管細(xì)胞建議接種到6cm培養(yǎng)皿或者T25瓶 | ||
傳代方法 | a,、棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣,、鎂離子的PBS潤(rùn)洗PC3-luc-BSD細(xì)胞1-2次,。 b、加1 mL消化液(0.25%Trypsin-0.02%EDTA)于培養(yǎng)瓶中,,使消化液浸潤(rùn)所有PC3-luc-BSD細(xì)胞,,將培養(yǎng)瓶置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-3 min(視細(xì)胞情況而定),然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,,迅速拿回操作臺(tái),輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加2-3ml培養(yǎng)基終止消化。輕輕打勻后裝入無(wú)菌離心管中,,1000 rpm離心5 min,,棄去上清液,補(bǔ)加1-2 mL培養(yǎng)液后吹勻,。 c,、將細(xì)胞懸液按1:2比例分到新的含8 mL培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,,置于培養(yǎng)箱中培養(yǎng),。 | 將含有1 mL PC3-LUC-BSD細(xì)胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍,加4 mL培養(yǎng)基混合均勻,。在1000 rpm條件下離心3 min,,棄去上清液,加1-2 mL培養(yǎng)基后吹勻,。然后將所有PC3-LUC-BSD細(xì)胞懸液加入含適量培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜(或?qū)⒓?xì)胞懸液加入6 cm皿中,,加入約4 mL培養(yǎng)基,培養(yǎng)過(guò)夜),。第二天換液并檢查細(xì)胞密度,。 | ||
注意事項(xiàng) | 1.運(yùn)輸用的培養(yǎng)基(灌液培養(yǎng)基)不能再用來(lái)培養(yǎng)細(xì)胞,請(qǐng)換用按照說(shuō)明書(shū)細(xì)胞培養(yǎng)條件新配制的培養(yǎng)基來(lái)培養(yǎng)細(xì)胞,。 2.因運(yùn)輸問(wèn)題,,部分細(xì)胞由于溫度變化及劇烈碰亡破碎形成碎片,是正?,F(xiàn)象,。 | 1.收貨時(shí)若發(fā)現(xiàn)干冰化完,檢查凍存管是否融化,,若已融化需直接離心細(xì)胞接種觀察,,若未融化可以將細(xì)胞按正常步驟保存; 2.為保證細(xì)胞的高存活率,,收到產(chǎn)品后,,請(qǐng)立即解凍復(fù)蘇細(xì)胞。 | ||
到貨須知 | 1.收到細(xì)胞后,,首先觀察并拍照記錄細(xì)胞瓶是否完好,,培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象,,干冰運(yùn)輸?shù)募?xì)胞檢查干冰是否揮發(fā),,細(xì)胞是否解凍,若有上述現(xiàn)象發(fā)生請(qǐng)及時(shí)和我們聯(lián)系,。 2.靜置完成后,,取出細(xì)胞培養(yǎng)瓶,鏡檢、拍照(當(dāng)天以及第 2,3 天請(qǐng)拍照),,記錄細(xì)胞狀態(tài) (所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù)),;建議細(xì)胞傳代培養(yǎng)后,定期拍照,、記錄細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài),。 3.由于運(yùn)輸?shù)脑颍瑐€(gè)別敏感細(xì)胞會(huì)出現(xiàn)不穩(wěn)定的情況,,請(qǐng)及時(shí)和我們聯(lián)系,,告知細(xì)胞的具體情況,以便我們的技術(shù)人員跟蹤回訪直至問(wèn)題解決,。 4.仔細(xì)閱讀細(xì)胞說(shuō)明書(shū),,了解細(xì)胞相關(guān)信息,如細(xì)胞形態(tài),、所用培養(yǎng)基,、血清比例、所需細(xì)胞因子等,,確保細(xì)胞培養(yǎng)條件一致,,若由于培養(yǎng)條件不一致而導(dǎo)致細(xì)胞出現(xiàn)問(wèn)題,責(zé)任由客戶自行承擔(dān),。 | |||
備注:客戶在細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中,,有任何技術(shù)問(wèn)題可以技術(shù)服務(wù)電話: 按 2,我們隨時(shí)給予解答,。 | ||||
三,、細(xì)胞凍存操作 | ||||
凍存液配方 | 無(wú)血清凍存液,液氮儲(chǔ)存 | |||
細(xì)胞密度 | 待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí),,可進(jìn)行細(xì)胞凍存,。下面 T25 瓶為例 | |||
凍存方法 | a、收集細(xì)胞及細(xì)胞培養(yǎng)液,,裝入無(wú)菌離心管中,,1000 rpm條件下離心4 min,棄去上清液,,用PBS清洗一遍,,棄盡PBS,加 1 mL血清重懸細(xì)胞,,進(jìn)行細(xì)胞計(jì)數(shù),。 b、根據(jù)細(xì)胞數(shù)量加入無(wú)血清細(xì)胞凍存液,,使細(xì)胞密度5x106~1x107/mL,,輕輕混勻,,每支凍存管凍存1mL細(xì)胞懸液,注意凍存管做好標(biāo)識(shí),。 c,、將凍存管放入-80℃冰箱,24 h后轉(zhuǎn)入液氮灌儲(chǔ)存,。記錄凍存管位置以便下次拿取,。 | |||
注意事項(xiàng) | 凍存細(xì)胞轉(zhuǎn)入液氮后及時(shí)復(fù)蘇一管檢查細(xì)胞凍存活性,若有異常,,及時(shí)調(diào)整實(shí)驗(yàn)方案 | |||
四,、售后服務(wù) | ||||
重發(fā)標(biāo)準(zhǔn) | 1.細(xì)胞運(yùn)輸途中遭遇的各種問(wèn)題,細(xì)胞丟失,、瓶身破損,、培養(yǎng)液嚴(yán)重漏液等,,重發(fā),; 2.收到細(xì)胞未開(kāi)封,如出現(xiàn)污染狀況,,重發(fā),; 3.收到細(xì)胞3天內(nèi),發(fā)現(xiàn)污染問(wèn)題,,經(jīng)核實(shí)后,,重發(fā); 4.常溫發(fā)貨的細(xì)胞靜置 2 小時(shí)后,,干冰凍存發(fā)貨的細(xì)胞復(fù)蘇 2 天后,,絕大多數(shù)細(xì)胞未存活,經(jīng)核實(shí)后,,重發(fā),; 5.常溫發(fā)貨的細(xì)胞靜置 22 小時(shí)并且未開(kāi)封或干冰凍存發(fā)貨的細(xì)胞復(fù)蘇 2 天后,出現(xiàn)污染,,經(jīng)核實(shí)后,,重發(fā); 6.細(xì)胞活性問(wèn)題,,請(qǐng)?jiān)谑盏疆a(chǎn)品 3 天內(nèi)給我們提出真實(shí)的實(shí)驗(yàn)結(jié)果,,用臺(tái)盼藍(lán)染色法鑒定細(xì)胞活力,經(jīng)核實(shí)后,,重發(fā),; 7.視具體情況而定。 | |||
不予重發(fā) | 1.客戶操作造成細(xì)胞污染,,不重發(fā),; 2.客戶嚴(yán)重操作失誤致細(xì)胞狀態(tài)不好,,不重發(fā); 3.非我們推薦細(xì)胞培養(yǎng)體系致的細(xì)胞狀態(tài)不好,,不重發(fā),; 4.細(xì)胞狀態(tài)不好,未提供真實(shí)清晰的培養(yǎng)前 3 天的細(xì)胞狀態(tài)照片,,不重發(fā),; 5.細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)經(jīng)其它處理導(dǎo)致細(xì)胞出現(xiàn)問(wèn)題的,不重發(fā),; 6.收到細(xì)胞發(fā)現(xiàn)問(wèn)題與客服人員溝通的時(shí)間證明大于3天的,,不重發(fā); 7.視具體情況而定,。 |
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