Sigma-Aldrich P5147蛋白酶 來(lái)源于灰色鏈霉菌

Type XIV, ≥3.5 units/mg solid, powder

別名:

Actinase E, Pronase E

特異性

  一種具有包括細(xì)胞外絲氨酸蛋白酶在內(nèi)至少三種蛋白水解活性的混合物,。通常,，絲氨酸蛋白酶可顯示出廣泛的底物特異性，而這被視為通過(guò)分子中由一個(gè)Asp,、一個(gè)His和Ser殘基組成的活性位點(diǎn)所介導(dǎo)的,。該酶更傾向于水解谷氨酸或天冬氨酸的羧基側(cè)的肽鍵。

應(yīng)用

  來(lái)自灰色鏈霉菌的蛋白酶已被用于：

• 消化髓核（NP）組織

• 催化不對(duì)稱(chēng)曼尼希一鍋反應(yīng)

• 淀粉脫蛋白[3]

• 消化細(xì)胞解離用腦切片

  來(lái)自Sigma的酶已用于抗凝血酶-肝素復(fù)合物的消化和分析,。[5]它還用于分離抗酶淀粉,。

  蛋白酶是一種通過(guò)水解肽鍵來(lái)分解蛋白的酶。 蛋白酶用于降解蛋白,、研究蛋白酶抑制劑和研究熱滅活動(dòng)力學(xué),。 蛋白酶用于孵育中核酸的分離過(guò)程。 來(lái)自灰色鏈霉菌的蛋白酶已用于通過(guò)四肽醛和絲氨酸蛋白酶而形成的共價(jià)復(fù)合物的結(jié)晶學(xué)和動(dòng)力學(xué)研究中[7],。

蛋白酶通常用于核酸的分離過(guò)程,，通過(guò)補(bǔ)充0.2％十二烷基硫酸鈉和10 mM EDTA并孵育0.5-3.0小時(shí)。

  該酶比已知堿性蛋白酶在更高的pH范圍內(nèi)更具活性,，即使在0.2N NaOH溶液中也顯示出了蛋白水解活性,。該酶用于不溶性蛋白的蛋白水解和蛋白的結(jié)構(gòu)研究。

生化/生理作用

  蛋白酶可通過(guò)肽鍵的水解使蛋白質(zhì)分解代謝,。 蛋白酶可被絲氨酸活性位點(diǎn)抑制劑所滅活,，如苯甲（jia）基磺酰氟（PMSF）和二異丙基氟磷酸鹽。 來(lái)自灰色鏈霉菌的蛋白酶是一種具有包括細(xì)胞外絲氨酸蛋白酶在內(nèi)至少三種蛋白水解活性的混合物,。絲氨酸蛋白酶顯示出廣泛的底物特異性,，而這被視為通過(guò)分子中由一個(gè)Asp、一個(gè)His和Ser殘基組成的活性位點(diǎn)所介導(dǎo)的,。該酶更傾向于水解谷氨酸或天冬氨酸的羧基側(cè)的肽鍵,。

  該產(chǎn)品是由至少三種酪蛋白水解活性和一種氨肽酶活性所組成的混合物。[8]該酪蛋白分解酶被命名為灰色鏈霉菌蛋白酶A,、灰色鏈霉菌蛋白酶B和灰色鏈霉菌胰蛋白酶,。當(dāng)需要廣泛或完（wan）全降解蛋白質(zhì)時(shí)，可使用該產(chǎn)品,。該蛋白酶混合物是高度非特異性的并可作為單氨基酸消化酪蛋白至>70％的程度,。

特點(diǎn)和優(yōu)勢(shì)

• 在pH 5.0中9.0范圍內(nèi)高度穩(wěn)定，在pH 8.8具有最高活性

• 與多種DNA和RNA分離緩沖液兼容

• 廣泛的底物特異性

質(zhì)量

含有醋酸鈣,。

物理屬性

  通過(guò)在80 °C以上加熱15-20分鐘以完（wan）全滅活,。

單位定義

  在pH 7.5，37 °C 條件下,，一單位的酶每分鐘將會(huì)水解酪蛋白以產(chǎn)生與1.0 μ摩爾 (181 μg) 酪氨酸等同的顏色（Folin-Ciocalteu試劑提供的顏色）,。

制備說(shuō)明

  收集自灰色鏈霉菌的培養(yǎng)基肉湯中。

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