FKM多光譜熒光動(dòng)態(tài)顯微成像系統(tǒng)是目前功能強(qiáng)大全面的植物顯微熒光研究?jī)x器,，是基于FluorCam葉綠素?zé)晒獬上窦夹g(shù)的顯微成像定制系統(tǒng),。它由包含可擴(kuò)展部件的增強(qiáng)顯微鏡、高分辨率CCD相機(jī),、激發(fā)光源組,、光譜儀、控溫模塊以及相應(yīng)的控制單元和專用的工作站與分析軟件組成,。它不僅可以進(jìn)行微藻,、單個(gè)細(xì)胞、單個(gè)葉綠體乃至基粒-基質(zhì)類囊體片段進(jìn)行Fv/Fm,、Kautsky誘導(dǎo)效應(yīng),、熒光淬滅、OJIP快速熒光響應(yīng)曲線,、QA再氧化等各種葉綠素?zé)晒饧癕CF多光譜熒光(multicolor fluorescence)成像分析；還能通過(guò)激發(fā)光源組進(jìn)行進(jìn)行任意熒光激發(fā)和熒光釋放波段的測(cè)量,，從而進(jìn)行GFP,、DAPI、DiBAC4,、SYTOX,、CTC等熒光蛋白、熒光染料以及藻青蛋白,、藻紅蛋白,、藻膽素等藻類熒光色素的成像分析；更可以利用光譜儀對(duì)各種熒光進(jìn)行光譜分析，區(qū)分各發(fā)色團(tuán)(例如PSI和PSII及各種捕光色素復(fù)合體等)并進(jìn)行深入分析,。
 

　　FKM多光譜 熒光動(dòng)態(tài)顯微成像系統(tǒng)使熒光成像技術(shù)真正成為光合作用機(jī)理研究的探針,，使科研工作者在藻類和高等植物細(xì)胞與亞細(xì)胞層次深入理解光合作用過(guò)程及該過(guò)程中發(fā)生的各種變化，為直接研究葉綠體中光合系統(tǒng)的工作機(jī)理提供了有力的工具,。FKM作為藻類/植物表型和基因型顯微研究的雙重利器,，得到了學(xué)界的廣泛認(rèn)可并取得了大量的科研成果。
 

　　
 

　　
 

　　FKM多光譜熒光動(dòng)態(tài)顯微成像系統(tǒng)功能特點(diǎn)：
 

　　Ø  內(nèi)置現(xiàn)今葉綠素?zé)晒庋芯康娜砍绦?，如Fv/Fm,、Kautsky誘導(dǎo)效應(yīng)、熒光淬滅,、OJIP快速熒光響應(yīng)曲線,、QA再氧化等，可獲得70余項(xiàng)參數(shù),。
 

　　Ø  配備10倍,、20倍、40倍,、63倍和100倍專用生物熒光物鏡,，可以清晰觀測(cè)到葉綠體及其發(fā)出的熒光。
 

　　Ø  激發(fā)光源組中包括紅外光,、紅光,、藍(lán)光、綠光,、白光,、紫外光和遠(yuǎn)紅光等，通過(guò)紅藍(lán)綠三色光還可以調(diào)出可見(jiàn)光譜中的任何一種色光,，能夠研究植物/藻類中任何一種色素分子或發(fā)色團(tuán),。
 

　　Ø  可進(jìn)行GFP、DAPI,、DiBAC4,、SYTOX、CTC等熒光蛋白,、熒光染料的成像分析,。
 

　　Ø  高分辨率光譜儀能夠深入解析各種熒光的光譜圖。
 

　　Ø  控溫系統(tǒng)可以保證實(shí)驗(yàn)樣品在同等溫度條件下進(jìn)行測(cè)量,，提高實(shí)驗(yàn)精度,，也可以進(jìn)行高溫/低溫脅迫研究。
 

　　應(yīng)用領(lǐng)域：
 

　　Ø  微藻,、大型藻類/高等植物的單個(gè)細(xì)胞,、單個(gè)葉綠體,、基粒-基質(zhì)類囊體片段等的顯微結(jié)構(gòu)植物光合生理研究。
 

　　Ø  藻類/植物逆境研究,。
 

　　Ø  生物和非生物脅迫的研究,。
 

　　Ø  藻類/植物抗脅迫能力及易感性研究。
 

　　Ø  突變體篩選及光合機(jī)理研究,。
 

　　Ø  藻類長(zhǎng)勢(shì)與產(chǎn)量評(píng)估,。
 

　　Ø  藻類色素與光合作用關(guān)系。
 

　　Ø  藻類/植物——微生物交互作用研究,。
 

　　Ø  藻類/植物——原生動(dòng)物交互作用研究,。
 

　　Ø  基因工程與分子生物學(xué)研究。
 

　　測(cè)量樣品：
 

　　Ø  植物活體切片
 

　　Ø  植物表皮
 

　　Ø  植物細(xì)胞
 

　　Ø  綠藻,、藍(lán)藻等各種單細(xì)胞和多細(xì)胞微藻
 

　　Ø  葉綠體提取液
 

　　Ø  類囊體提取液
 

　　Ø  含有葉綠體的原生動(dòng)物
 

　　
 

　　工作原理：
 

　　FKM分析過(guò)程中,，通過(guò)連接在顯微鏡上的激發(fā)光源組和內(nèi)置在6位濾波輪中的一系列濾波器、分光鏡激發(fā)植物樣品中各種發(fā)色團(tuán)的動(dòng)態(tài)熒光,。樣品激發(fā)出的熒光經(jīng)顯微鏡放大后進(jìn)行熒光光譜分析和熒光動(dòng)力學(xué)成像分析,。SM 9000光譜儀通過(guò)光纖與顯微鏡連接，以進(jìn)行激發(fā)熒光光譜分析,。安裝在顯微鏡頂部的高分辨率CCD相機(jī)則用于熒光動(dòng)力學(xué)成像分析,。全部工作過(guò)程通過(guò)工作站和控制單元按照預(yù)先設(shè)定好的程序自動(dòng)進(jìn)行。測(cè)量過(guò)程中,，可通過(guò)溫控模塊調(diào)控藻類,、植物細(xì)胞等實(shí)驗(yàn)樣品的溫度。蠕動(dòng)泵可以實(shí)現(xiàn)培養(yǎng)藻類的連續(xù)測(cè)量,。
 

　　
 

　　技術(shù)參數(shù)：
 

　　Ø  測(cè)量參數(shù)：50多個(gè)葉綠素?zé)晒鈪?shù),，每個(gè)參數(shù)均可顯示二維熒光彩色圖像。
 

　　Ø  可測(cè)定OJIP快速熒光曲線,。
 

　　Ø  GFP,、DAPI、DiBAC4,、SYTOX,、CTC等熒光蛋白和熒光染料的成像分析(選配)。
 

　　Ø  QA再氧化動(dòng)力學(xué)曲線(選配),。
 

　　Ø  Spectrum熒光光譜圖(選配),。
 

　　Ø  具備完備的自動(dòng)測(cè)量程序(protocol)，可自由對(duì)自動(dòng)測(cè)量程序進(jìn)行編輯,。
 

　　Ø  熒光激發(fā)光源：紅外光、紅光,、橙光,、藍(lán)光,、綠光、白光,、紫外光等可選,，根據(jù)客戶要求定制光源組。
 

　　Ø  透射光源(選配)：白光,、遠(yuǎn)紅光,。
 

　　Ø  高分辨率TOMI-2 CCD傳感器。
 

　　Ø  通訊模式：千兆以太網(wǎng),。
 

　　Ø  顯微鏡：Axio Imager M2,，可選配Axio Scope A1簡(jiǎn)潔版或Axio Imager Z2高級(jí)版。
 

　　Ø  物鏡：10倍,、20倍,、40倍、63倍和100倍專用生物熒光物鏡(可選),。
 

　　Ø  6位濾波輪：葉綠素?zé)晒?、GFP/SYTOX、DAPI/CTC等,。
 

　　Ø  客戶定制實(shí)驗(yàn)程序協(xié)議(protocols)：可設(shè)定時(shí)間(如測(cè)量光持續(xù)時(shí)間,、光化學(xué)光持續(xù)時(shí)間、測(cè)量時(shí)間等),、光強(qiáng)(如不同光質(zhì)光化學(xué)光強(qiáng)度,、飽和光閃強(qiáng)度、調(diào)制測(cè)量光等),，具備專用實(shí)驗(yàn)程序語(yǔ)言和腳本,，用戶也可利用Protocol菜單中的向?qū)С绦蚰０孀杂蓜?chuàng)建新的實(shí)驗(yàn)程序。
 

　　Ø  具備自動(dòng)測(cè)量分析功能,，快照模式,，成像預(yù)處理。
 

　　Ø  數(shù)據(jù)分析模式：具備“信號(hào)計(jì)算再平均”模式(算數(shù)平均值)和“信號(hào)平均再計(jì)算”模式,，在高信噪比的情況下選用“信號(hào)計(jì)算再平均”模式,，在低信噪比的情況下選擇“信號(hào)平均再計(jì)算”模式以過(guò)濾掉噪音帶來(lái)的誤差。
 

　　Ø  輸出結(jié)果：高時(shí)間解析度熒光動(dòng)態(tài)圖,、熒光動(dòng)態(tài)變化視頻,、熒光參數(shù)Excel文件、直方圖,、不同參數(shù)成像圖,、不同ROI的熒光參數(shù)列表等。
 葉綠素?zé)晒馀c光譜分析結(jié)果：