安捷侖二手氣相色譜儀、布魯克紅外光譜儀 液相色譜柱是一種常用的反相色譜柱,，它以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填料,，因此有較高的碳含量和更好的疏水性，對各種類型的生物大分子有更強的適應(yīng)能力,，適用范圍較廣,，是高效液相色譜儀分析中必選的色譜柱類型。
　　目前產(chǎn)品可適用范圍廣,，從極性化合物到非極性化合物都可獲得良好的分離,，在碳水化合物如低聚糖,、苷類糖化學，生藥學和天然產(chǎn)物化學,，生物物質(zhì)如多肽,、蛋白、核酸等多個領(lǐng)域發(fā)揮重要作用,。
　　液相色譜柱使用過程中常見的16個問題：
　　1,、對于一根常用的C18柱，拿到一根新柱的時候應(yīng)該怎樣進行活化及維護,？為什么要這樣做,？
　　答：新柱活化，實際上是一個平衡的過程,，除了用流動相平衡外,，有時候還必須用所測樣品對新柱進行平衡，特別是測定分子量比較高的多肽,，尤其重要。因為分子量高的物質(zhì)分子,，擴散速度慢,，平衡所需時間也相應(yīng)較長。具體平衡方式也很簡單,，多進幾次樣品,，直到峰面積和保留時間穩(wěn)定，再進行正式進樣測定,。
　　如果要加快平衡時間,，把前面用來平衡的進樣樣品濃度加大，或者不等洗脫完成,，連續(xù)進樣多針,。用待測物對新柱平衡，目的是將硅膠基質(zhì)填料表面具有非特異性吸附的位點的吸附能力飽和掉,。
　　2,、測定多肽，一般采用什么柱子,？流動相是乙腈和水,，還有微量的TFA。特別是像類似三肽的短肽,，應(yīng)該怎么選擇柱子,？
　　答：分子量不高的多肽一般選用常規(guī)C18柱就能測定，也有用離子交換柱,、水性C18柱和Hilic親水作用柱的,。
　　3,、氨基柱在進酸性樣品時，很傷柱子,，如使用一段時間后,，柱效降低，峰形改變,，如何恢復(fù),？
　　答：氨基柱測酸性樣品，應(yīng)該是用氨基柱的HILIC模式,。酸的存在可能會使略帶負電荷的氨基官能團質(zhì)子化,，導致使用一段時間后對于某些類的分析物保留性質(zhì)有所改變或表現(xiàn)在柱效下降。建議：用5-10倍的柱體積的含0.5-1.0％NH3的乙腈-水(50:50)溶液沖洗該柱(沖洗后當然要再用不含堿的流動相洗去多余氨),，之后再進行分析這類酸性分析物時建議在流動相中略微添加少許氨如0.1％,。
　　4、色譜柱的技術(shù)都有哪些,？比如封尾等,，這些技術(shù)在應(yīng)用時都體現(xiàn)在哪里？
　　答：色譜柱技術(shù)包括填料技術(shù)和裝柱技術(shù),，填料技術(shù)自不待言,，填料的好壞對色譜柱分離性能和選擇性有決定性影響。裝柱技術(shù)也沒有想象中的這么簡單,，不同固定相,、不同粒徑、不同柱管內(nèi)徑和長度,，裝柱工藝都有所不同,，要裝出緊密、穩(wěn)定,、均一的柱床,，更多是一門藝術(shù)，需要經(jīng)驗積累,。

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